【摘要】 目的 探讨乳腺癌中c|erbB|2、E|cad蛋白表达与临床病理参数，淋巴结转移，临床预后的关系及其相关性。方法 应用免疫组织化学二步法技术检测72例乳腺癌组织中二种蛋白的表达状况。结果 c|erbB|2蛋白的超表达，E|cad蛋白表达下降与病理分级、核分裂、淋巴结转移、生存期短等不良因素呈正相关趋势。 结论 c|erbB|2，E|cad蛋白在乳腺癌中的表达呈负相关，在乳腺癌的发生发展中独自发挥作用。

【关键词】 乳腺肿瘤；免疫组织化学；c|erbB|2；E|cad

The prognostic value and correlation of c|erbB|2 andE|cad grne protenin expression in human breast carcinoma

WU Yue|long,LI Jing,PAN Gang

Department of Pathology, Shanghai Jia|Ding Central Hospital, Shanghai 201800,China

Abstract: Objective The aim of the present study was to investigate the between the gene protein expression of c|erbB|2,E|cad and clinical data, and to analyse the correlation among these two gene proteins in the prognostic determination of human breast carcinoma . Methods In 72 cases of breast carcinoma 2 proteins were detected by immunohistochemical methods.Results The gene protein over expression of c|erbB|2 and decrease expression of E|cad was significantly correlated with lymph node metastasis,short survival.Conclusion The gene protein expression of c|erbB|2 and E|cad was lift correlated and was alone give play to action with the origin and development of breast carcinoma .

Key words:Breast neoplasms;Immunohistochemistry;c|erbB|2;E|cad

癌基因c|erbB|2的扩增是乳腺癌中较为常见的基因改变,它的超表达往往预示着癌细胞增殖,已可以作为探讨乳腺癌预后分子指标的主要代表[1]。上皮钙粘附素(E|cad)是一种钙依赖的具有细胞与细胞粘附特性的转膜糖蛋白,维持上皮细胞的形态和组织结构[2],是乳腺癌预后的相关因素。本文应用免疫组织化学二步法技术检测c|erbB|2、E|cad蛋白在乳腺癌中的表达状况,探讨其与乳腺癌的临床病理参数的关系以及二种蛋白在乳腺癌中的相关性。

1 资料和方法

1.1 选取1994年1月～1996年1月在本院确诊为女性乳腺浸润性导管癌的根治切除手术标本的存档蜡块72例,临床随访资料完整。患者年龄为32～76岁,平均50.5岁。30～39岁7例,40～49岁32例,50岁以上33例。术前均未做化疗和放疗。术后化疗56例,化疗加放疗5例,未做治疗11例。术后无复发与器官转移53例,有复发与器官转移并已死亡19例,随访时间5～7年,平均63个月。

1.2 病理指标 病理学分级和核分裂计数参照Bloom|Richardson系统的Nottingham改良方案[3]。

1.3 免疫组织化学方法 免疫组化试剂均为美国ADI产品,即用型,购自上海长岛抗体公司。切片二甲苯脱蜡,酒精梯度水化后置于PH6.0的柠檬酸缓冲液中煮15min,室温冷却20min,PBS冲洗,滴加试剂A(抗体),室温放置60min,PBS冲洗,滴加试剂B(检测试剂),室温放置30min,PBS冲洗,DAB显色,苏木素复染,脱水,封片。用已知乳腺癌阳性切片作阳性对照,以PBS取代试剂A作阴性对照。

1.4 结果判断 c|erbB|2的免疫染色结果判定标准：A项， 按切片中癌细胞有无深浅黄色计分,0分为不着色,1分为浅黄色,2分为棕黄色,3分为棕褐色。B项，按显色细胞的比例评分,1分为1%～10%,2分为11%～50%,3分为51%～80%,4分为>80%。每例癌细胞积分按A×B计算,0分为阴性,1～4分为弱阳性,>4分为强阳性。E|cad免疫结果判定标准,E|cad免疫染色阳性物质呈棕褐色,主要定位于细胞膜或围绕细胞膜呈线性着色,无阳性细胞者为阴性,阳性细胞占总细胞数的25%以下为+,25%～75%为++，75%以上为+++。

1.5 统计学方法 采用χ2检验。

2 结果

2.1 免疫组化结果 72例乳腺浸润性导管癌c|erbB|2阳性37例(51.39%)。阳性染色主要定位于细胞膜上,少数伴有弱的胞浆染色。E|cad阳性39例(54.17%),阳性染色定位于细胞|细胞交界处,或围绕细胞膜呈线性着色，见表1。表1 72例乳腺癌c|erbB|2、E|cad免疫组化结果

2.2 两种基因蛋白表达之间的关系,见表2。表2 72例乳腺癌c|erbB|2、E|cad表达之间的关系在35例c|erbB|2染色阴性的病例中,E|cad染色阳性26例(74.29%),在37例c|erbB|2染色阳性的病例中,E|cad染色表达阳性13例(35.14%),两者比较存在明显的负相关趋势,统计学上有非常显著意义(P<0.005)。

2.3 两种蛋白表达与临床病理参数的关系，见表3。表3 72例乳腺癌两种蛋白表达与临床病理参数的关系注：A：两项均阴性 B：两项均阳性 C：仅c|erB|2阳性 D：仅E|cad阳性

2.3.1 与病理分级、核分裂计数的关系 随着乳腺癌分级的升高,c|erbB|2过度表达率升高,I级和III级、II级和III级间差异均有显著性,P<0.005,I级和II级间差异无显著性,P>0.05。E|cad蛋白表达随乳腺癌分级的升高而下调,病理分级I级和III级、II级和III级间差异有显著性,P<0.005,I级和II级间差异无显著性,P>0.05；核分裂计数I级和III级、II级和III级、I级和II级间差异均有显著性,P<0.005。

2.3.2 与淋巴结转移的关系 72例乳腺癌中有淋巴结转移的42例,c|erbB|2、E|cad蛋白 表达的阳性率分别为71.43%(30/42)和26.19%(11/42)；无淋巴结转移组30例,c|erbB|2、E|cad蛋白表达的阳性率分别为23.33%(7/30)和93.33%(28/30),两两相比差异有非常显著意义(P<0.005)。

2.3.3 与病人术后生存期的关系 72例乳腺癌术后生存期5年以下组19例,c|erbB|2、E|cad蛋白表达阳性者分别为16例(84.21%)和4例(28.57%)；术后生存期5年以上组53例,c|erbB|2、E|cad蛋白表达阳性者分别21例(39.62%)和35例(66.04%)。两组间两种蛋白表达阳性的差异有显著性( P<0.005)。

3 讨论

c|erbB|2基因作为一种原癌基因,在体内承担着重要的生理功能,参与对细胞生长、繁殖、分裂的调控及控制肿瘤生长等复杂调控功能。介导上皮细胞粘附的最主要分子是钙依赖性上皮细胞粘附分子E|钙粘附素(E|cad),属同种亲和性粘附分子,其功能障碍或缺失会使正常细胞与正常细胞间的粘附缺失,影响细胞的分化和粘着,肿瘤细胞间的连接也减弱,瘤细胞易于从母体脱离,发生转移。

c|erbB|2具有转化细胞的功能,其过度表达的肿瘤细胞对化疗不敏感,还能下调粘附分子E|cad和整合素α2亚单位,促进细胞的侵袭；另外,能促进在血管生成中起重要作用的VEGF的产生[4]。从表2可以看出,本组72例乳腺癌中c|erbB|2蛋白表达|、+、++组的E|cad表达阳性率分别为74.29%(26/35)、41.18%(7/17)、30%(6/20)，c|erbB|2和E|cad蛋白表达呈明显的负相关趋势,统计学上有非常显著意义。本研究中,我们还比较了c|erbB|2蛋白高表达与E|cad蛋白表达阴性、与两者均阳性、与两者均阴性这三种情况下,对乳腺癌的病理学分级、核分裂、淋巴结转移、生存期方面的影响,其差异无显著性,说明c|erbB|2和E|cad蛋白表达对乳腺癌的演进没有叠加作用,可能在乳腺癌的发生发展中独自发挥作用。

本研究显示 ,c|erbB|2基因蛋白的超表达和E|cad蛋白表达下调与乳腺癌的病理学分级、核分裂、淋巴结转移、生存期短等不良因素关系密切。有淋巴结转移组和无淋巴结转移组c|erbB|2蛋白表达的阳性率分别为71.43%和22.33%,差异有显著性。同时我们也注意到,在c|erbB|2蛋白阳性表达的16例死亡者中有4例无淋巴结转移(25%)。上述结果说明：用c|erbB|2表达预测乳腺癌的预后优于用淋巴结转移预测预后。另外,从表3可以看出,在淋巴结转移方面,E|cad所起的负面作用似比 c|erbB|2更强,E|cad表达阴性的乳腺癌病人的淋巴结转移率显著增高。说明E|cad表达下调是乳腺癌浸润性增强、转移能力增强的一个指征,是乳腺癌重要的预后因子[5]。

【参考文献】
[1] Slamon DJ,Clark GM,Wong SG,et al.Human breast cancer correlation of relapse and survival with amplification of the HER2/neu[J]. Oncogene,1987,23:177|179.

[2] 韩安家,熊敏,李智,梁英杰.上皮钙依赖粘附素相关分子在乳腺浸润性小叶癌和导管癌中表达的意义[J].中华病理学杂志,2001,30(1)：27|30.

[3] 回允中.阿克曼外科病理学[M].第8版下卷.沈阳:辽宁教育出版社,1999.1625.

[4] 朱孝峰,曾益新,杨大俊. ST2325对c|erbB|2过表达的乳腺癌细胞周期的影响及分子机制[J].中国癌症杂志,2001,11(2 )：97|100.

[5] 赵书燕,张晓杰. E|cadherin在乳腺癌中的表达及其意义[J].临床与实验病理学杂志,2000,16(3)：217|218.