【摘要】 目的 检测原发性乳癌中c|erbB|2扩增和mdr|1表达的情况，并探讨二者的相关性。方法 分别采用PCR和RT|PCR法检测47例乳癌中c|erbB|2扩增和mdr|1表达。结果 ⑴c |erbB|2扩增与组织学分级和腋淋巴结阳性数有关，有统计学意义。ER、PR阴性与阳性乳癌比较，非浸润性与浸润性乳癌比较，c |erbB|2扩增均有显著性差异。⑵ mdr|1表达与组织学分级有关，有统计学意义。⑶ mdr|1表达与c|erbB|2扩增之间无统计学意义。结论 c|erbB|2扩增与乳癌的组织学分级、腋淋巴结阳性数、ER、PR状态、组织学类型有关，mdr|1表达只与组织学分级有关，c|erbB|2扩增与mdr|1表达无关。

【关键词】 乳腺癌；c |erbB |2癌基因；mdr |1基因

Study on the correlation between c |erbB |2 amplification and mdr |1 expression in breast cancer

CHENG Jing ,XU Jie ,ZHOU Yun|feng,et al

Department of Radio|Chemotherapy,

Zhongnan Hospital of WuhanUniversity,Wuhan 430071, China

Abstract:Objective To investigate the c|erbB|2 amplification and the mdr|1 expression in primary breast cancer and to reveal the correlation between these two genes.Methods PCR and RT|PCR was used respectively to examine the c|erbB|2 amplification and mdr|1 expression in 47 primary breast cancer. Results (1) The c|erbB|2 amplification was significantly linked to histological grade and the axillary lymph node involvement. Statistically significant difference in c|erbB|2 amplification was observed not only between ER/PR|negative and ER/PR|positive tumors , but also between non|infiltrating and infiltrating tumors.(2)mdr|1 expression was strongly correlated with histological grade.(3) No significant corrlation between the amplification of c|erbB|2 and the expression of mdr|1 was found. Conclusion c|erbB|2 amplification was significantly associated with histological grade, axillary lymph node involvement, ER,PR status and histological subtype. Only histological grade was associated with the expression of mdr|1.No significant correlation was observed between c|erbB|2 amplification and mdr|1 expression.

Key words: Breast cancer;c|erbB|2 oncogene;Mdr|1 gene

癌基因c|erbB|2扩增/过表达于15%～30%原发乳癌，而且被认为是引起乳癌化疗耐药的重要原因之一。很多学者已致力于探讨c |erbB |2 与mdr |1的关系，因为mdr |1过表达是化疗耐药的主要机制之一。有关c |erbB |2与mdr |1相互关系的报道结果不一，其原因可能与实验对象和方法的不同有关。本研究首次取材于人体乳癌新鲜标本，采用分子生物学方法检测c |erbB |2与mdr |1，以期从新的角度探讨两种基因与有关临床、病理指标的关系，并试图从分子水平分析与研究两基因的相关性。

1 对象与方法

1.1 研究对象 收集1999年1月～ 1999年7月武汉大学中南医院手术切除之新鲜乳腺癌标本47例，术前未行化疗，术后均经病理组织学证实，其中非浸润性乳癌2例，浸润性乳癌45例(浸润性小叶癌1例，浸润性导管癌20例，单纯癌17例，髓样癌2例，硬癌3例，粘液腺癌2例)。

1.2 研究方法

1.2.1 PCR法检测c |erbB |2扩增

1.2.2 RT|PCR法检测mdr |1的表达

1.3 统计学处理 所有数据均用χ2检验或确切概率计算法。

2 结果

2.1 乳癌中c |erbB |2扩增、mdr |1表达与组织学分级的关系

WHO乳癌组织学分级标准分为3级，1～2级和3级的c |erbB |2扩增率分别为17.14%和50%，有统计学差别(χ2=5.07，P<0.05)。1级﹑2级和3级的mdr |1表达率分别为88.89%﹑57.68%和33.33%，有统计学差别（χ2=6.50，P<0.05）。

2.2 乳癌中c |erbB |2扩增、mdr |1表达与腋淋巴结转移数的关系

根据腋淋巴结转移数分为3组，腋淋巴结转移数0组、1～6组、大于或等于7组，3组的c |erbB |2扩增率分别为3.57%、36.36%和87.5%，3组间均存在显著性差别(P<0.05)。3组的mdr |1表达率分别为64.29%﹑45.45%和50%，没有显著性差别(χ2=1.41，P>0.05)。

2.3 乳癌中c |erbB |2扩增、mdr |1表达与组织学类型的关系

2例非浸润性乳癌均有c |erbB |2扩增（100%），22.22%浸润性乳癌有c |erbB |2扩增，两者间有统计学差别(χ2=6.09，P<0.05)。而这两组的mdr |1表达率分别为50%和57.78%，没有统计学差别(χ2=0.99，P>0.05)。

2.4 乳癌中c |erbB |2扩增、mdr |1表达与ER、PR的关系

ER阳性组与阴性组的c |erbB |2扩增率分别为8%和45.45%，PR阳性组与阴性组的c |erbB |2扩增率分别为12.5%和39.13%，统计学上有显著性意义（χ2=8.63和4.38，P<0.05）。而ER阳性组与阴性组的mdr |1表达率分别为64%和50%，PR阳性组与阴性组的mdr |1表达率分别为70.83%和76.92%,在统计学上无显著性意义（χ2=0.94和0.51，P>0.05）。

2.5 乳癌中c |erbB |2扩增与mdr |1表达的关系

25.53%有c |erbB |2扩增，57.45%有mdr |1表达，两者之间没有统计学相关关系(χ2=0.56，P>0.05)。

3 讨论

3.1 乳癌中c |erbB |2的扩增与临床、病理指标的关系

本实验结果显示c|erbB|2扩增率为25.53%，与腋淋巴结转移数、组织学分级有关。大多数报道认为c|erbB|2过表达于病理分期晚、组织学分级高的乳癌。腋淋巴结转移越多，c |erbB |2扩增率越高，这与c |erbB |2过表达使乳癌细胞转移能力增强有关。Tan等[1]将c |erbB |2转染低表达c |erbB |2的人乳癌细胞株MDA|MB|435,使之高表达c |erbB |2，将未转染和转染的MDA|MB|435细胞分别注入ICR|SCID鼠尾静脉,发现后者形成的转移灶明显多于前者,说明c |erbB |2过表达能增强人乳癌细胞MAD|MB|435的转移能力。

有报道发现c |erbB |2扩增与ER、PR呈负相关，在本实验中也得到了证实。由于ER、PR阳性提示内分泌治疗有效，因此c |erbB |2扩增则提示内分泌治疗疗效差。Wright等[2]报道无论ER阴性或阳性，c |erbB |2未过表达者内分泌疗效为37％，若c |erbB |2过表达则为7%，ER阳性而c |erbB |2过表达者有效率从48％下降至20％，ER阴性而c |erbB |2过表达者，有效率为0。如果用单克隆抗体抑制c |erbB |2的表达，则有可能增加内分泌治疗效果。

本实验中2例非浸润性导管癌均有c |erbB |2扩增，显著高于浸润性乳癌。由于目前普遍认为浸润性乳癌由原位癌发展而来，而原位癌的c|erbB|2过表达却显著高于浸润性乳癌，而其预后明显好于浸润性乳癌，因此学者们提出一种假说来解释这个矛盾：⑴c|erbB|2过表达的浸润性导管癌由特殊类型的非浸润性乳癌发展而来。⑵c |erbB |2是乳癌的早期事件,但并不是乳癌发展过程中所必需的条件，DCIs向IDCs发展过程中c |erbB |2扩增受到抑制，如果肿瘤在该过程中仍保持c |erbB |2扩增，则提示肿瘤生长快、转移能力强，化疗及内分泌治疗效果差，预后不好。

3.2 乳癌中mdr |1的表达与临床、病理指标的关系

Mdr |1是乳腺癌化疗耐药的重要影响因素之一，它在乳腺癌的表达率各家报道的结果悬殊较大，可能与检测方法及敏感性不同有关。大部份国外报道用RT|PCR法检测乳癌的mdr |1表达率为40%～60%。本实验结果显示57.45%原发乳癌中有mdr |1表达，说明较多乳癌组织中存在着固有耐药的因素。

关于mdr |1表达与腋淋巴结阳性数、ER、PR、组织学类型的关系迄今尚无定论，Dexter等[3]对74例乳癌用RT|PCR检测mdr |1，发现mdr |1的表达独立于组织学分级、病理分期、腋淋巴结阳性数、ER、PR之外，但与年龄及组织学类型明显相关。Ferrero等[4]用RT|PCR|ELISA检测了85例腋淋巴结阳性乳癌，结果提示mdr |1与组织学分级有关，与ER、PR无关。本实验发现mdr |1只与组织学分级有关，随着组织学分级的增高，mdr|1表达率下降，具有统计学差异，因此有可能从分化程度来估计未行mdr |1检测患者的mdr |1表达水平以及化疗敏感性。

3.3 c |erbB |2与mdr |1的关系

c |erbB |2与mdr |1的关系尚有争议，有学者认为c |erbB |2可能激活mdr |1而致细胞产生耐药。Sabbatin等[5]将c |erbB |2和c |Ha|ras转染到P|gp表达阴性的人乳癌细胞株MCF|10A后，发现细胞mdr|1mRNA、P|gp的表达增加，细胞对ADM出现耐受性并可被钙离子通道抑制剂维拉帕米逆转。有些作者认为c |erbB |2与mdr |1没有关系，Yu等[6]将c |erbB |2转染人乳癌细胞株MDA|MB|435后，mdr|1表达未见增强，用MAb抑制c |erbB |2后