【摘要】 目的 评价乳腺癌患者化疗前后血浆内皮素|1（Endothelin|1, ET|1）水平变化的临床意义。方法 采用放射免疫法检测20例正常人及45例乳腺癌患者化疗前后血浆ET|1水平，并作对比分析。结果 各期乳腺癌患者血浆ET|1水平明显高于正常对照组(P<0.01)，Ⅳ期乳腺癌血浆ET|1水平明显高于Ⅲ期和Ⅱ期，Ⅲ期明显高于Ⅱ期（P <0.05），化疗后有效（完全缓解和部分缓解）患者血浆ET|1水平明显低于化疗前（P <0.05）。结论 血浆ET|1水平与乳腺癌的发生发展有一定关系，血浆ET|1检测可作为乳腺癌治疗疗效和判断预后的一个监测指标。

【关键词】 血浆内皮素|1;乳腺癌;化学疗法；放射免疫法

Plasma endothelin in breast cancer before and after chemotherapy

LIANG Qi|lian, YIN ZHeng|min, ZHANG Ying, et al

Affiliated Hospital of Guangdong Medical College, Zhanjiang 524001, China

Abstract: Objective To evalue the value of plasma endothelin|1(ET|1) in predicting the prognosis of breast cancer patients before and after chemotherapy. Methods Radioimmunoassay was available to detect the level of plasma ET|1 in 20 cases of normal control subject and 45 cases of patients with breast cancer before and after chemotherapy. Results Level of plasma ET|1 were elevated in all subgroups of patients with breast cancer compared to the controls (P <0.01), the plasma ET|1 level in stage Ⅳ was higher in comparison with stage Ⅲ and Ⅱ，and in stage Ⅲ it was higher than in stageⅡ（P <0.05）; and that the plasma ET|1 levels were remarkably reduced in complete remission or partial remission patients(P<0.01) after chemotherapy.Conclusion The elevation of plasma ET|1 were correlated with progression of breast cancer; it is suggested that monitoring plasma ET|1 level has clinical and prognostic significance in patients with breast cancer and that further prospective studies are indicated.

Key words:Plasma endothelin|1; Breast cancer; Chemotherapy; Radioimmunoassay

内皮素|1（Endothelin|1, ET|1）是日本学者Yanagisawa[1]等首先从培养的猪动脉内皮细胞上清液中分离成功的、是一族生物活性多肽，由21个氨基酸残基组成、具有强大的缩血管作用。研究表明ET不仅存在于内皮细胞中，而且广泛分布于细胞平滑肌、神经及巨噬细胞中，具有重要的生理及病理意义，并对肿瘤的发生发展有重大影响。ET|1有3种类型：ET|1、ET|2、ET|3，以ET|1活性最强。本文通过对乳腺癌患者不同病期血浆ET|1水平测定，以及化疗前后乳腺癌患者血浆ET|1水平的变化，为评价ET在乳腺癌的判断病情、化疗效果观察提供依据。

1 资料与方法

1.1 临床资料 正常对照组20例为女性健康查体者，年龄23～61岁，中位年龄41岁；乳腺癌组45例均为女性，其中单纯癌25例、浸润性导管癌16例，粘液腺癌4例，Ⅱ期11例、Ⅲ期20例，Ⅳ期14例；年龄24～65岁，中位年龄43岁，治疗前Karnofsky 评分>60分，预计生存期在3个月以上，无过敏体质, 心、肾功能和血象正常，近1个月内未作过其他抗肿瘤治疗。

1.2 治疗措施 Ⅱ期患者采用CMF方案：CTX(环鳞酰胺) 500mg/㎡ 静注，第1、8d, MTX(甲氨蝶蛉)20～30 mg/㎡ 静滴，第1、8d， 5|FU(氟尿嘧啶)300mg/㎡静滴，第2～5d，此方案每3周为1周期，每例化疗2个周期以上。Ⅲ期、Ⅳ期采用CAF方案：ADM(阿霉素)40mg/㎡ 静注，第2d,CTX 、5|FU剂量、用法同CMF方案，此方案每3周为1周期，每例化疗2个周期以上。

1.3 疗效评价标准 完全缓解（CR）：治疗后见到的病灶完全消失、且持续4周以上，无新的病灶出现；部分缓解（PR）：病灶已缩小到治疗前的50%以上，持续4周以上，无新的病灶出现；稳定（SD）：病灶无明显变化，包括病灶缩小不到50%或增大不超过25%；进展（PD）：病灶增大25%以上或出现新的病灶。CR+PR为有效。

1.4 实验方法 晨起空腹时抽取静脉血2ml,注入含10%EDTA二钠30μL和抑酞酶40μL的试管中，混匀后4℃、3000r/min离心10min，分离出血浆，放入|70℃冰箱保存，成批采用放射免疫法检测血浆ET|1水平，药盒由解放军总医院东亚研究所提供；主要技术参数：灵敏度5pg/ml,可测定范围20～1000pg/ml，批内变异CV≤10%、批间变异CV≤15%，特异性方面本抗体与α|人心钠素、降钙素|基因相关肽、血管紧张素Ⅰ、Ⅱ及舒血管肠肽等均无交叉反应；实验操作严格按说明书要求进行。正常对照组以及乳腺癌组分别于化疗前与第2周期化疗结束后10天检测指标。

1.5 统计方法 各组数据用均数±标准差（±s）表示，采用方差分析或配对t检验。

2 结果

2.1 各病期乳腺癌患者与正常对照组血浆ET|1水平比较,见表1。表1各病期乳腺癌患者与正常 对照组血浆ET|1水平比较结果表明血浆ET|1水平Ⅳ期>Ⅲ期>Ⅱ期>正常对照组，差异有显著性（P<0.05）。

2. 2 近期治疗有效与无效组化疗前后血浆ET|1水平比较，见表2。表2近期治疗有效与无效组化疗前后血浆ET|1水平比较化疗后有效组血浆ET|1水平明显低于化疗前，差异有显著性（P<0.05）；无效组化疗后血浆ET|1水平与化疗前无明显差异（P>0.05）。

3 讨论

1988年发现ET以来，相关研究表明ET具有广泛的生物学功能，参与多种疾病的发生发展，与肿瘤关系密切。Shichiri等[2]发现人类喉癌HEP|2细胞和子宫颈HELα细胞表面存在ET|1受体，这两类细胞可以释放ET|1，释放的ET|1以剂量依赖的方式，增加癌细胞Ca2+例浓度，刺激静止期的癌细胞增殖分裂，说明了ET可能是通过旁分泌和自分泌方式起作用；Nakagawa等[3]对恶性血管内皮细胞瘤患者手术前后ET水平的研究发现：术后血浆ET水平明显低于术前；Ishihashi等[4]用ELISA法测定发现肝癌患者血浆ET|1和big| ET|1明显高于正常对照组，big| ET|1与AFP呈正相关，经动脉栓塞治疗后，big| ET|1下降程度与肿瘤缩小、AFP下降程度一致；Nakamuta等[5]发现肝癌患者血浆免疫反应性ET|1(iγET|1)水平明显高于肝硬化患者、并与肿瘤大小呈正相关；Shankar等[6]测定30例肝癌患者血浆的ET|1水平，表明均升高，用免疫组化方法发现肿瘤组织内的肿瘤细胞、肌纤维及上皮细胞均聚集有高水平的ET|1，提示肿瘤细胞可产生ET|1；Giaid等[7]用免疫组化方法研究66例肺肿瘤组织石蜡切片，发现28例为ET阳性，主要为肺鳞癌和肺腺癌，小细胞肺癌、肺类癌、肺肉癌、肺淋巴瘤不表达ET，表明ET|1在肺鳞癌和肺腺癌中可能对肿瘤的生长分化起一定作用；Yokokawa等[8]发现45%的肺癌血浆big| ET|1水平明显升高，而且肿瘤组织中也含有大量的big|ET|1；Kusuhava等[9]用放射免疫方法检测42株人癌细胞，其中13株产生不同程度的ET|1，其余细胞株未分泌ET|1，而且发现这42株人癌细胞表面存在ET|1受体，表明ET可以通过旁分泌机制刺激间质细胞的生长，证明了结肠癌、胰腺癌、宫颈癌、乳腺癌均能合成并释放ET；Asham等[10]研究表明ET|1有刺激肿瘤血管再生的作用。

本组45例乳腺癌患者血浆ET|1水平显著高于正常对照组，说明乳腺癌患者与正常人之间血浆ET|1水平有一定差异，Ⅳ期乳腺癌血浆的ET|1水平明显高于Ⅲ期和Ⅱ期，Ⅲ期高于Ⅱ期，说明血浆ET|1水平与乳腺癌的发展程度相关；本文研究表明化疗后有效者血浆ET|1水平下降，其降低的水平与乳腺癌化疗的近期疗效密切相关，因此血浆ET|1水平测定对估计乳腺癌的疗效及预后有一定的意义。

【参考文献】
[1] Yanagisawa M, Kurijaea H, Kimuea S, et al. A novel potent vasoconstrictor peptide produced by vascular endothelial cell[J]. Nature, 1988, 332(6163):411|415.

[2] Shchiri M, Hirata Y, Nakjima T, et al. Endothelin|1 is an autocrine/paracrine grouwth factor for human cancer lines [J]. J Clin Invest, 1991, 87(3):1867|1871.

[3] Nakagawa K, Nishino K, Takane K, et al. Measurement of immunoreactive endothelin|1 in plasma of a patient with malignant hemangioendothelioma[J]. Nippon Hifukai Zasshi, 1990, 100(14):1453|1456.

[4] Ishibashi M, Fujita M, Nagai K, et al. Production and secretion of endothelin by hepatocellular carcinoma[J]. J Clin Endocrinol Metab, 1993, 76(2):378|383.

[5] Nakamuta M, Ohashi M, Tabata S, et al. High plasma concentrations of endothelin|like immunoreactivities in patients with hepatocellular carcinoma[J]. Am J Gastroenterol, 1993, 88(2):248|252.

[6] Shankar A, Loizidou M, Alier G, et al. Raised endothelin|1 levels in patients with colorectal live metastases[J].Br J Surg, 1998, 85(4):502|506.