【摘要】 目的 探讨乳腺癌患者血浆CXCL12水平的变化及意义。方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA) 检测54例乳腺癌患者，20例乳腺良性病变者，18例正常健康志愿者血浆中CXCL12的水平，分析CXCL12与乳腺癌临床病理参数的相关性及临床治疗对其的影响。结果 乳腺癌患者血浆CXCL12水平高于两对照组，Ⅲ+Ⅳ期高于Ⅰ+Ⅱ期，有腋窝淋巴结及远处转移者更高, 治疗后低于治疗前（P<0.05），CXCL12与其他临床病理参数无显著相关性，两对照组血浆CXCL12水平无显著性差异（P>0.05）。结论 趋化因子CXCL12在乳腺癌的转移中发挥了重要作用，可作为乳腺癌新的肿瘤标志物。

【关键词】 乳腺癌；趋化因子CXCL12；肿瘤转移

Changes and Significance of Plasma CXCL12 Levels in Patients with Breast Cancer

LU Xiangming1，WANG Zhong1，YUAN Hongyin2

1. Department of Oncology,Liyuan Hospital,Tongji Medical College,Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430077, China; 2. Department of Oncology, Zhongnan Hospital,Wuhan UniversityAbstract：Objective To study the changes and function of plasma CXCL12 levels in patients with breast cancer. Methods Enzymelinked immunosorbent assay(ELISA) was available to detect the plasma CXCL12 levels in 54 patients with breast cancer,20 patients with benign breast tumors and 18 normal healthy donors,analysis the correlation of plasma CXCL12 and the clinical pathological parameters of breast cancer,the changes of plasma CXCL12 by clinical treatments. Results Plasma CXCL12 levels in breast cancer group were significantly higher than those of the two control groups, patients of stage Ⅲ and Ⅳ, axilla lymph nodes positive and distant metastasis were significantly higher than those of stage Ⅰand Ⅱ, lymph nodes negative and nondistant metastasis,the levels of plasma CXCL12 were remarkably reduced after effectual treatments（P<0.05),no significant correlation was found between plasma CXCL12 and the other clinical pathological parameters of breast cancer, plasma CXCL12 levels of the two control groups showed no significant difference (P>0.05). Conclusion Chemokine CXCL12 play an important role in breast cancer metastasis, it may serve as a novel tumor marker for breast cancer.

Key words： Breast cancer；Chemokine CXCL12；Tumor metastasis

乳腺癌的趋向性器官转移是患者主要的死亡原因。近年来的研究表明，趋化因子CXCL12及其相应的独特型受体CXCR4在乳腺癌的器官趋向性转移中发挥重要作用。本文探讨了CXCL12与乳腺癌转移的关系，现报告如下。

1 资料与方法

1．1 一般资料

所有研究对象均为女性。 54例乳腺癌患者为2003年10月～2004年4月我科及武汉大学中南医院肿瘤科的部分住院病人， 年龄35～78岁， 平均51.3岁， <50岁23例， ≥50岁31例， 绝经前17例， 绝经后31例， 肿瘤直径≤2.0cm 13例， 2.1～5.0cm 28例， >5.0cm 7例， 腋窝淋巴结转移阳性23例， 阴性25例， 临床分期Ⅰ期12例， Ⅱ期26例， Ⅲ期7例， Ⅳ期9例（3例伴锁骨上淋巴结转移者新辅助化疗后行了根治术）， 浸润性导管癌35例， 其他类型13例， 免疫组化SP法检测受体表达： ER(+)21例， ER(-)27例， PR(+)19例， PR(-)29例， HER-2(+)31例， HER-2(-)17例， 6例未手术的Ⅳ期患者只统计年龄这一临床参数。 乳腺良性病变者20例， 年龄28～70岁， 平均44.4岁， 病理类型为乳腺纤维腺瘤或乳腺囊性增生症。 正常健康志愿者18例， 年龄36～63岁， 平均50.7岁。 入院前已行肿瘤局部切除， 有糖尿病、 高血压、 急性感染者不入组。

1．2 治疗分组

手术组为入院后即行手术，术前未行新辅助化疗者；化疗组包括行辅助化疗或新辅助化疗者，新辅助化疗未缓解者除外；综合治疗组为手术加辅助化疗或新辅助化疗者。

1．3 方法

1．3．1 标本采集及处理

取乳腺癌患者术前、术后2周，间隔≥2周期的连续化疗前，综合治疗前后（均于治疗实施前）、乳腺良性病变术前，正常健康志愿者的清晨空腹肘静脉血各3mL，用肝素抗凝管抗凝，3 000r/min离心10分钟后，再次对血浆在2℃～8℃离心10 000r×30min以完全清除血小板，分离血浆置-70℃冰箱保存待测。溶血标本予以剔除。

1．3．2 治疗方法

手术方式为乳腺癌改良根治术或根治术。化疗方案采用CMF或CEF方案，28天为一周期。综合治疗为乳腺癌改良根治术或根治术加至少一个周期的化疗。

1．3．3 实验检测方法

成批采用ELISA法测定血浆CXCL12水平，试剂盒购自美国R&D公司。实验操作严格按试剂盒说明书要求进行。分析仪器为上海雷勃分析仪器有限公司生产的Multiskan MK 3板式酶标仪。

1．3．4 统计学方法

实验数据以 ±s表示，行t检验，以P<0.05有显著性差异。

2 结果

2．1 乳腺癌患者血浆CXCL12水平高于乳腺良性病变及正常健康志愿者（P<0.05）,后两组比较无显著性差异（P>0.05）,见表1。表1 乳腺癌组与两对照组血浆CXCL12水平的比较注：b vs a,P>0.05,c vs a、c vs b,P<0.052．2 乳腺癌患者血浆CXCL12水平手术前后，化疗前后，综合治疗前后均有显著性差异(P<0.05)，见表2。

2．3 乳腺癌患者血浆CXCL12水平Ⅲ+Ⅳ期高于Ⅰ+Ⅱ期，有腋窝淋巴结及远处转移者更高(P<0.05)，见表3。它与患者年龄、月经、肿瘤直径、肿瘤病理类型及受体表达等临床病理参数无显著相关性（P>0.05）。表2 乳腺癌临床治疗前后血浆CXCL12水平的比较注：各组治疗前后，P均<0.05 表3 乳腺癌CXCL12水平与临床病理参数的关系注：各单一临床病理参数组间t检验，P均<0.05

3 讨论

“土壤和种子”的理论表明不同的器官为特定的癌细胞提供最合适的生长条件，而归巢理论认为不同的器官具有特殊的能力通过趋化因子去捕捉或吸引特殊类型的癌细胞[1]。肿瘤细胞转移分子调节机制认为，在肿瘤细胞转移播散至特定的部位之前，首先要在主要的转移部位表达某种物质，且同步要求其靶细胞表达这种物质的特异性受体[2]。趋化因子CXCL12属CXCELR—亚家簇成员，即基质细胞衍生因子1（SDF1），一般认为SDF1有2个亚型，即SDF1α与SDF1β，它们是SDF1 mRNA的2种不同的拼接变异体，二者在表达及功能上未发现差别。CXCL12同其他趋化因子的区别是它由基质细胞持续分泌，而不是由炎症等因素诱导表达。CXCR4又名CD184，是高度保守的G蛋白偶联的7次跨膜片段受体，为CXCL12的独特型受体[3]。CXCL12和CXCR4 广泛地、组成性地表达于多种细胞和组织中，主要介导淋巴细胞和树突状细胞的迁移、归巢、发育和分化及癌细胞的转移，也与造血、HIV的感染、血管生成、神经系统等密切相关。人乳腺癌细胞系、乳腺癌原发灶及转移灶均高表达CXCR4，在乳腺癌最常见的转移部位如淋巴结、肺、肝脏和骨髓则高水平地表达其配体CXCL12[4]。

基于恶性肿瘤及艾滋病两大顽疾的生物靶向治疗考虑，趋化因子受体CXCR4是目前研究的热点。如小分子CXCR4拮抗剂，肽T22、T14012和合成复合物AMD3100，抗CXCR4的单克隆抗体12G5，均有可能应用于临床治疗，但其安全性尚需要进一步验证。在体外使用CXCR4 拮抗剂T140可抑制乳腺癌细胞的迁移反应，给SCID小鼠皮下注射T140 的类似物4FbenzoylTN14003也 可显著性地抑制人乳腺癌细胞MDAMB231的淋巴结和肺转移[5]。因为多数学者认为SDF1蛋白水平正常情况下难以测得，这可能是CXCL12在乳腺癌患者外周血中的表达未见报道的主要原因。我们对已完全清除了血小板的血浆进行检测发现，乳腺癌患者血浆CXCL12水平高于乳腺良性病变及正常健康志愿者，Ⅲ+Ⅳ期高于Ⅰ+Ⅱ期，有腋窝淋巴结及远处转移者亦更高（P<0.05），而与其他临床病理参数无显著相关性，两对照组血浆CXCL12水平无显著性差异，经临床有效治疗后其水平显著下降，说明趋化因子CXCL12在乳腺癌的转移中发挥了重要作用，并可作为乳腺癌新的肿瘤标志物。

【参考文献】
［1］ StetlerStevenson WG, Kleiner DE Jr. Molecular biology of cancer: invasion and metastases［Ａ］. In: DeVita VT Jr, Hellman S, Rosenberg SA, et al. Cancer: principles and practice of oncology. 6th ed［M］. Philadelphia: Lippincott Williams & Wilkins, 2001.123136.

[2] Wang J M, Deng X, Gong W,et al. Chemokine and their role in tumor growth and metastasis[J]. Immunol Methods,1998,220(12):1<