【关键词】 食管癌

【摘要】 肿瘤蛋白质研究是肿瘤学的新领域。本文就食管癌蛋白质差异表达的实验研究现状分食管癌组织中低表达蛋白质的研究、食管癌组织中高表达蛋白质的研究和中药对食管癌细胞蛋白质的影响等三方面作了简明回顾和梳理。

【关键词】 食管癌;蛋白质表达

生物功能的主要体现者是蛋白质，复杂的基因间和蛋白质间的相互作用、细胞内的活动和环境的影响都会影响基因的表达及蛋白质的翻译后加工。所以，通过对食管癌发生发展和防治的不同阶段蛋白质的变化进行分析，可以阐明蛋白质表达水平的变化与食管癌发生发展的相互关系及其规律。

1 食管癌组织中低表达蛋白质的研究

秦艳茹 ［1］ 等采用免疫组化卵白素-生物素-过氧化物酶复合物（ABC）方法，分析食管癌高发区食管内镜活检组织p21、p16的表达，林州市医院食管内镜活检组织共134例，其中21例食管上皮正常（NOR），45例基底细胞过度增生（BCH），23例间变（DYS），45例原位癌组织（CIS）。从NOR→BCH→DYS→CIS，p21的表达逐渐降低（P<0.05），免疫阳性率分别为61.9%（13/21）、57.8%（26/45）、56.5%（13/23）和37.8%（17/45）;辉县市医院食管内镜活检组织132例，其中NOR12例，BCH71例，DYS27例，CIS22例。从NOR→BCH→DYS→CIS，p16的表达逐渐降低（P<0.05），免疫阳性率分别为75.0%（9/12）、73.2%（52/71）、59.3%（16/27）和22.7%（5/22）。结论:p21、p16的低表达可能是导致病变持续向癌变方向发生和发展的机制之一。蔡瑞君 ［2］ 等实验表明随着食管肿瘤细胞分化程度降低其p16蛋白表达阳性率下降，且缺失率与突变率和肿瘤细胞恶性程度相关，提示p16基因在晚期食管癌可能缺失或突变频率增加;同时显示p16蛋白表达淋巴转移组明显低于未转移组，提示p16基因蛋白对食管癌的浸润和转移有抑制作用。陈新 ［3］ 应用PCR和PCR-SSCP法探讨p16在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义。结果:p16缺失率在食管鳞状细胞癌Ⅱa期与Ⅱb期、Ⅲ期中分别为45.0%与92.3%、100.0%，在高分化组与中、低分化组中分别为9.1%、52.2%和100.0%。说明食管鳞状细胞癌存在着显著的p16缺失，p16的缺失与肿瘤的病程进展有关。万文徽 ［4］ 在《p16蛋白在食管癌中表达的回顾研究》一文中总结出食管癌组织具有较高的p16蛋白表达缺失率（49.5%）;早期食管癌患者p16表达阳性率明显高于晚期（P=0.0039）;高分化鳞状细胞癌患者中p16表达阳性率明显高于中低分化患者（P=0.016）;p16阳性患者生存时间明显高于阴性患者（P=0.0007）。王明荣 ［5］ 应用多聚酶链反应技术及限制性片段长度多态现象研究APC/MCC基因与食管癌发生发展的关系，对46例食管癌APC和MCC基因的杂合性缺失（LOH）进行了分析。结果:食管癌APC和MCC基因LOH阳性表达分别为29.0%（9/31）和33.3%（8/24）。这说明APC、MCC基因的LOH是食管癌的常见改变，可能参与了食管癌的发生。不难看出，食管癌组织中低表达蛋白质的研究仅限于p16、p21、APC、MCC等。

2 食管癌组织中高表达蛋白质的研究

陈新 ［3］ 应用PCR和PCR-SSCP法探讨p53在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义。结果:p53突变率在鳞状细胞癌组织和正常黏膜组织中分别为46.7%和0，两者差异有显著性;在高、中分化组与低分化组中分别为20.0%、21.4%与90.9%，前两者与后者相比差异有显著性。说明食管鳞状细胞癌存在着显著的p53突变，p53的缺失突变与肿瘤的病程进展无关，是肿瘤发生的早期事件。李涛 ［6］ 等采用原位杂交技术检测人食管癌细胞经低剂量辐射处理前后p53、bc1-2和bax基因蛋白表达的变化。结果:经4cGy射线照射Eca-109细胞后12h，p53基因蛋白表达显著降低;bc1-2基因蛋白表达有降低趋势。陶仪声 ［7］ 等用HE染色确定上皮类型.用免疫组化LSAB法检测各种癌旁上皮及原位癌中p53蛋白的表达。结果:正常粘膜上皮中无p53蛋白的积聚。增生上皮p53蛋白阳性率为55%，但阳性细胞少，染色浅。不典型增生上皮p53蛋白阳性率为79%，且阳性细胞逐渐增多，染色加深;原位癌中p53蛋白阳性率为98%。三者之间统计学处理有显著性差异（P<0.01）。秦艳茹 ［1］ 等采用免疫组化卵白素-生物素-过氧化物酶复合物（ABC）方法，分析食管癌高发区食管内镜活检组织p53、Rb、E2F1和cyclin E的表达。结果林州市医院食管内镜活检组织共134例，其中21例食管上皮正常（NOR），45例基底细胞过度增生（BCH），23例间变（DYS），45例原位癌组织（CIS）。从NOR→BCH→DYS→CIS，p53和cy-clin E的免疫阳性率逐渐增高（P<0.05），分别为23.8%（5/21）、33.3%（15/45）、56.5%（13/23）和71.1%（32/45）;28.6%（6/21）、33.3%（15/45）、56.5%（13/23）和75.6%（34/45）;辉县市医院食管内镜活检组织132例，其中NOR12例，BCH71例，DYS27例，CIS22例。从NOR→BCH→DYS→CIS，Rb和E2F1的免疫阳性率逐渐增高（P<0.05），分别为41.7%（5/12）、62.0%（44/71）、77.8%（21/27）和90.9%（20/22）;50.0%（6/12）、45.0%（32/71）、66.7%（18/27）和68.2%（15/22）。p53、Rb、E2F1和cyclin E的高表达可能导致了病变持续向癌变方向发生和发展。段序梅 ［8］ 认为bcl-2基因蛋白家族是通过抑制许多细胞凋亡的因素，而抑制食管癌细胞凋亡作用。周正波 ［9］ 等应用流式细胞免疫荧光技术，分别检测CD44V6在50例食管癌及食管正常黏膜中的表达。结果:CD44V6在食管癌组织中的阳性表达率72%，高于食管正常黏膜的阳性表达率20%，差异有显著性意义（P<0.05）。CD44V6蛋白的表达与患者年龄、性别、病变部位、病变长度，大体病理类型及细胞分化程度无明显关系，但与癌浸润深度及淋巴结转移具有相关性。谷化平 ［10］ 等应用微波-SP免疫组化法，检测65例食管鳞状细胞癌组织中CD15抗原、蛋白质c-erbB-2和组织蛋白酶D（cathepsinD，Cath-D）表达水平。结果:在食管癌中CD15、c-erbB-2和Cath-D表达阳性率分别为58.5%、50.8%、和64.6%。CD15、c-erbB-2和Cath-D表达均与肿瘤分级、浸润、淋巴结转移和预后相关。CD15表达与c-erbB-2和Cath-D表达呈正相关。吴晓华 ［11］ 采用抗cyclin D1和CDK4的单克隆抗体对10例正常食管和50例食管鳞状上皮癌标本进行免疫组织化学染色。结果:cyclin D1和CDK4在正常食管上皮呈现较低水平的表达，在食管鳞状上皮癌中则过表达。李丽 ［12］ 应用免疫组化S-P方法和原位杂交方法分别检测48例食管癌组织中cyclin E和p21WAF1蛋白及mRNA表达。结果从食管正常黏膜到非典型增生组织 和癌组织，cyclin E蛋白和mRNA阳性表达率皆呈逐渐升高的趋势。p21WAF1蛋白及mRNA在癌组织中表达皆较高。陈克能 ［13］ 《食管癌基因分子水平的研究进展》综述了以下几项:（1）p53基因突变致p53蛋白过度表达的发生率由基底膜→癌前细胞→癌细胞的顺序增加;（2）与细胞分化增殖有关的基因改变，如c-myc基因扩增所编码的核蛋白可调节其它与细胞生长相关基因的转录;（3）多药耐药基因，如癌组织中p53，pCNA阳性表达有高度相关性。吴名耀 ［14］ 等应用免疫组织化学SABC法，观察51例食管癌组织和10例切缘食管粘膜中HSP25、HSP60、HSP70等不同类型热休克蛋白（HSPs）的表达，并比较其阳性率。结果:癌旁食管粘膜和癌组织中HSP25、HSP60和HSP70蛋白的阳性率分别为50.0%、92.3%、61.5%和11.8%、94.1%、60.8%;仅HSP70的阳性表达率与食管癌的分化程度有关（P<0.05，各型HSPs的表达与食管癌的淋巴结转移无关（P>0.05）。结论:提示某些类型的热休克蛋白可在癌旁食管粘膜和癌组织过量表达，其中HSP70还与食管癌的分化有关。王延明 ［15］ 等应用逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）方法，对51例食管癌、癌旁及33枚淋巴结组织中多药耐药相关蛋白基因（MRP）的表达进行检测分析。结果:食管癌组织中MRP阳性率（35.3%）高于癌旁组织（3.9%）。低分化食管癌的MRP阳性分布明显高于高分化肿瘤（P<0.05）。来自13例患者的21枚转移淋巴结中，5例癌组织MRP表达阳性的6枚转移淋巴结组织MRP均阳性，12枚非转移淋巴结中未见MRP阳性表达;对部分病例随访发现，MRP阳性者肿瘤复发、转移的发生率（42.9%）高于MRP阴性者（19%）。蔡瑞君 ［2］ 等实验表明Rb蛋白的表达与肿瘤细胞组织分化相关，即肿瘤组织分化越差，其表达率越高。Rb蛋白表达与淋巴结转移、临床分期和预后无明显相关。但在临床分期中，晚期食管癌中Rb蛋白有逐渐增加趋势。美国Emmert-Buck ［16］ 利用激光捕获显微切割、二维电泳和质谱技术研究食管癌组织细胞与癌旁正常上皮组织细胞的蛋白质差异表达，结果发现有10个蛋白质仅在食管癌细胞中表达。由此可见，食管癌组织中高表达蛋白质的研究范围广泛，癌基因蛋白质家族、抑癌基因蛋白质家族、多药耐药基因蛋白质家族、与细胞分化增殖有关的基因蛋白质家族等均有涉猎。

3 中药对食管癌细胞蛋白质的影响

实验研究 ［17］ 主要有这几个方面:（1）对肿瘤细胞的直接杀伤作用。某些中药的抗肿瘤作用是通过细胞毒作用损伤DNA或癌细胞其他蛋白质成分而发挥效力，如冬凌草。（2）通过对蛋白质的调节，阻滞肿瘤细胞增殖周期，诱导其发生凋亡。（3）影响肿瘤基因蛋白表达。中药诱导肿瘤细胞凋亡研究，主要局限于p53、C-myc、Bcl-2等几个重要的基因蛋白家族。中药丹参能使C-myc高蛋白水平表达而诱导细胞发生凋亡;丹参酮能抑制SMMC-7721细胞的C-myc癌基因蛋白表达;榄香烯可诱导多种肿瘤细胞发生凋亡，其作用机制可能与癌基因Bcl-2、C-myc表达减少，p53表达增加有关。

【参考文献】

1 秦艳茹，范宗民，庄则豪，等.细胞周期调节蛋白在食管癌前病变组织的表达及意义.实用肿瘤杂志，2004，5:394-398.

2 蔡瑞君，杨俊明，纪娜，等.食管<