【关键词】 胃癌

摘要：目的研究胃癌人表皮生长因子受体(HER) -2/neu基因的表达与生存期的关系，探讨其作为胃癌预后指标的可行性。方法 应用免疫组织化学方法检测103例胃癌标本HER-2/neu基因的表达，并将检测结果与患者的随访资料及临床病理参数进行综合分析。结果 103例胃癌组织中HER-2/neu基因的阳性表达率为31.1% (32/103)；HER-2/neu基因在胃良性病变和癌旁组织中均无表达；HER-2/neu基因表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、部位、分化程度均无相关性（P>0.05），而与肿瘤的浸润深度、临床分期、淋巴结转移、远处转移及患者的生存时间相关(P<0.05 )。结论 HER-2/neu基因与胃癌的浸润、转移及预后密切相关，可作为判断胃癌生物学行为和预后的重要参考指标。

关键词：胃癌 HER-2/neu基因；免疫组织化学；预后
Association of HER-2/neu expression with prognosis of gastric cancer
CHEN Bin, LUO Rong-cheng,Cui Fei, QIAN Xin-yu
Oncology Center, Nanfang Hospital, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China

Abstract: Objective To investigate the association between the expression of human epidermal growth factor receptor (HER)-2/neu gene and prognosis of gastric cancer. Methods The expression of HER-2/neu in gastric cancer was detected by immunohistochemical technique and analyzed in relation with the follow-up and clinicopathologic data of the patients. Results Thirty-two of the 103 gastric cancer specimens (31.1 %) were positive for HER-2/neu, but whose expression was not found in benign gastric lesion and normal gastric mucosa. HER-2/neu expression was not correlated with the patients’ sex, age, tumor size and location or the degree of differentiation (P>0.05), but with the depth of invasion, clinical stage, lymph node and distant metastasis of the tumor and survival of the patients (P<0.05). Conclusions HER-2/neu expression is closely related to invasion, metastasis and prognosis of gastric cancer and can be used to evaluate the biological behavior and prognosis of gastric cancer.
Key words: gastric cancer, prognosis; HER-2/neu gene; immunohistochemistry

胃癌的发生发展是一个多因素、多阶段的复杂过程，涉及到多个基因和多种分子水平变化，故在肿瘤基因水平上寻找新的预后指标是目前肿瘤研究的重点。本研究应用免疫组织化学方法, 检测了胃癌中人表皮生长因子受体(HER) -2/neu基因的表达, 旨在探讨其与胃癌的临床病理和预后的关系，报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料

对2000年1月至2004年1月在我院手术切除并经病理确诊为胃腺癌（包括乳头状腺癌、管状腺癌、黏液腺癌、印戒细胞癌）的225例患者进行随访（随访截止时间为2006年1月，随访时间为2～6年）。 将有随访结果和资料完整（有完整原癌病灶、淋巴结和癌旁组织）的103例胃腺癌患者资料作为实验组，另选取20例胃良性病变作为对照组。实验组中男性67例、女性36例，年龄31～78岁，平均（57.97±12.28）岁，临床分期Ⅰ期＋Ⅱ期47例、Ⅲ＋Ⅳ期56例。
1.2试剂和仪器

1.2.1 试剂 试剂购自福州迈新生物技术开发公司，一抗为MBI RMA-0555 Rabbit Monoclonal anti-C-erbB-2 (克隆号SP3，批号50909555C1)。试剂盒选用即用型免疫组化(IHC)二步法EliVisionTM 染色试剂盒。

1.2.2 仪器 石蜡切片机(SHANDON AS325)；显微镜(OLYMPUS BX40)；电热恒温干燥箱(56 ℃～65 ℃，上海跃进医疗器械一厂，标准号：ZBY149-83，型号：GZX-DH-50×55 )；微波炉（WHIRL POOL VIP202S 850W）。

1.3方法

免疫组化（EliVisionTM二步法）：65℃烤片2～4 h；石蜡切片脱蜡至水；蒸馏水冲洗；抗原修复，本实验用法为浸泡于枸橼酸盐缓冲液(pH 6.0)中，在功率850 W的微波炉中加热11 min，放至室温后用蒸馏水冲洗2 min；3％H2O2中在功率350 w的微波炉中加热2 min 30 s，以消除内源性过氧化物酶的活性；蒸馏水冲洗2 min，PBS冲洗2 min×3次；滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液，37℃孵育1 h；PBS冲洗，2 min×3次；滴加试剂1(polymer helper), 37℃孵育20 min；PBS冲洗，2 min×3次；滴加试剂2(poly peroxidase-anti-mouse/rabbit, IgG),37℃孵育30 min，PBS冲洗，2 min×3次；DAB显色5 min；自来水充分冲洗，复染，脱水透明，封片。
1.4结果判断

每批实验设阳性和阴性对照。HER-2/neu蛋白阳性：细胞膜及细胞质呈棕黄色。阴性：细胞膜及细胞质无棕黄色颗粒样沉淀。染色分级:整张切片无一个阳性细胞（－）；阳性细胞数<10%（＋）；阳性细胞数10%～50%（＋＋），阳性细胞数>50% (＋＋＋)。

1.5统计学处理

采用χ2 检验和Fisher's精确概率法，生存期分析采用Life-tables法和Logrank检验。

2 结果

2.1HER-2/neu基因在胃腺癌组织中的表达特点HER-2/neu基因主要表达于细胞膜及细胞质，HER-2/neu基因在胃良性病变和癌旁组织中均无表达。103例胃癌组织中32例表达阳性（阳性率31.1