【摘要】 目的 探讨S100+DC浸润、HLADR抗原的表达在胃癌发生、发展中的作用及临床意义。方法 应用免疫组织化学方法对43例胃癌、24例癌前病变组织中的S100+ DC、HLADR进行检测。结果 S100+ DC、HLADR在胃癌组、癌前病变组中的表达均显著高于正常胃粘膜组（P<0.05）。在低分化、淋巴结转移和远处转移胃癌患者中S100+ DC数目明显减少（P<0.01）。HLADR在低分化胃癌中的阳性表达率显著降低（P<0.05）。S100+ DC与HLADR的表达有正相关性。结论 胃粘膜中S100+ DC与HLADR的变化反映了胃癌局部免疫状态，二者在胃癌发生、发展中起重要作用。

【关键词】 树突状细胞 HLADR 胃粘膜免疫 胃癌 癌变

肿瘤组织中S100+ DC的浸润被认为是机体抗肿瘤免疫反应标志之一。研究肿瘤微环境中DC的数量和功能比研究外周血免疫状态更能准确反映宿主的抗肿瘤免疫反应。HLADR抗原是人体主要组织相容性复合体（major histocompatibility complex, MHC）Ⅱ类分子中最有代表性的一个主要类型，它通过MHCⅡ类分子限制的T细胞对外来多肽抗原的识别，在机体的免疫应答及免疫调节过程中发挥着重要的作用。

1 材料与方法

1.1 材料

77例标本均取自我院病理科手术切除后经病理诊断明确的存档蜡块。其中胃癌标本43例，慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生13例，慢性萎缩性胃炎伴不典型增生11例，正常胃粘膜标本10例。胃癌组中浸及浆膜层者27例，未及者16例；高、中分化腺癌17例，低分化腺癌26例；有淋巴结转移24例，无淋巴结转移19例；有远处转移9例，无远处转移34例；TNM分期为Ⅰ、Ⅱ期者18例,Ⅲ、Ⅳ期者25例。

1.2 方法

采用SP法免疫组化染色，HLADR抗体孵育前经微波修复以暴露抗原，S100蛋白孵育前经0.1%蛋白胰酶消化3～5分钟，操作按说明书进行。浓缩型鼠抗人S100单抗、HLADR单抗、即用型SP试剂盒均购自北京中山生物公司。

1.3 结果判断标准

S100+ DC判定标准：以细胞浆中出现棕黄色颗粒为阳性细胞。高倍镜（×400）计数10个镜下DC总数。HLADR判定标准：为细胞浆染色，选5个高倍视野（×400），每个视野计数200个腺上皮细胞，在胃癌组共计数1 000个癌细胞，按阳性细胞数占计数腺上皮细胞或癌细胞的百分比分为：“-”<10%，“+”10%～50%，“++”51%～80%，“+++”>81%。

1.4 统计方法

HLADR表达率的分析采用χ2检验。S100+DC在两组间的比较采用成组t检验，多组间比较采用单因素方差分析，多组的两两间比较采用SNK检验。

2 结果

2.1 S100蛋白、HLADR的免疫组化染色特点

S100蛋白阳性细胞胞浆被染成棕黄色，呈树突状。在正常胃黏膜中可见少量S100+ DC散在分布于间质，癌前病变组中DC呈簇状分布于病变区胃黏膜中。胃癌组织中，DC的突起可与癌细胞及淋巴细胞紧密接触。HLADR在正常胃黏膜仅可见染色于少量间质细胞。癌前病变组病变胃黏膜区腺上皮细胞有明显HLADR阳性表达。胃癌组织中，癌细胞及病变区腺上皮细胞均有部分阳性表达。

2.2 在不同胃黏膜病变中S100+ DC数、HLADR阳性表达率不同

在正常胃黏膜组织中S100+DC数、HLADR阳性表达率显著低于慢性萎缩性胃炎伴肠化、萎缩性胃炎伴不典型增生及胃癌组。其中胃癌组S100+DC数、HLADR阳性表达率与慢性萎缩性胃炎伴肠化、萎缩性胃炎伴不典型增生相比也明显下降,见表1。 表1 HLADR、S100+ DC在胃癌与癌前病变中的变化 HLADR阳性表达率在高、中分化组(82.35%)明显高于低分化组(46.15%，P<0.05)。随着淋巴结转移、远处转移、分化程度降低，S100+ DC数明显减少（P<0.01），见表2。 表2 HLADR表达率、S100+ DC数与临床病理因素之间的关系

2.4 胃癌组HLADR表达程度与S100+ DC的关系

胃黏膜不同HLADR表达程度,S100+ DC数不同,总体上随着HLADR表达程度的增加,S100+ DC增加,说明二者呈正相关关系，见表3。 表3 胃癌组HLADR表达程度与S100+DC的关系

3 讨论

在胃组织石蜡切片中，S100蛋白可作为DC的特异性标志物［1,2］。DC是唯一能激活初始型T细胞的抗原提呈细胞（antigen presenting cells, APC），它不仅能以抗原特异的形式启动T细胞识别和杀伤肿瘤细胞，而且也可以激发免疫记忆保护，在机体再次受到肿瘤细胞攻击时发挥保护作用［3］。肿瘤组织内DC数量可作为原位抗肿瘤免疫反应的标准。

本研究显示，与正常胃黏膜相比，癌前病变组中DC数量显著增高，表明胃黏膜有活动性炎症反应。胃癌组织中，DC数量也比正常胃黏膜中增高，但随着胃癌的进展，DC数量有逐渐降低的趋势。许多研究表明［4］，肿瘤微环境中DC浸润的程度与患者的预后、淋巴结转移有明显关系。肿瘤中浸润的DC越多，其预后就越好。胃癌中DC趋于下降的原因可能有多种，最近有学者［5］发现有些肿瘤可引起DC凋亡，使DC在局部遭受破坏。癌组织内DC细胞的浸润程度反映了宿主防御机制所处的状态，癌组织内DC数量和功能的异常使肿瘤细胞可逃逸免疫监视从而发生转移。目前，在一系列动物实验及临床Ⅰ、Ⅱ期研究中均证明DC确实可以诱导出特异性抗肿瘤保护效应［6］。

HLAⅡ类抗原一般仅在树突状细胞、巨噬细胞、郎罕氏细胞等抗原提呈细胞中表达，HLADR是HLAⅡ类分子中最重要的一个亚型。本研究显示，癌前病变组腺上皮细胞HLADR阳性率明显高于正常胃黏膜。胃癌组癌细胞及腺上皮细胞HLADR阳性表达率明显高于正常胃黏膜，但随着胃癌组织分化程度的降低逐渐减少。总的研究结果表明HLADR在分化程度高的肿瘤细胞中的阳性率高于低分化者，并且其阳性率与患者的预后呈正相关［7］。大多数表达HLADR抗原的肿瘤有较好预后，HLADR在肿瘤细胞的表达使肿瘤细胞具有抗原递呈作用，在一定程度上产生自身免疫调节，从而限制肿瘤细胞的转移和进一步恶化［8］。虽然肿瘤细胞异常表达HLADR的机制尚无一致看法［9］，但如何增加HLAII基因在肿瘤细胞中的表达已成为肿瘤免疫治疗中一个值得重视的问题。

S100+ DC与HLADR从两个不同角度反映了胃黏膜局部的免疫状态。在癌前病变中，炎症因子的作用使S100+ DC数量增多，同时上调HLADR阳性表达，使细胞免疫过盛，导致黏膜免疫损伤。随着胃癌的进展，S100+ DC数、HLADR阳性表达率均逐渐降低。二者在抗肿瘤免疫及阻止肿瘤的进展和转移中起到协同作用，均可作为判断肿瘤患者预后的重要指标，并对指导肿瘤免疫治疗具有重要意义。

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