【关键词】 固相免疫放射分析法

［摘要］目的 探讨胃液中肿瘤坏死因子.α（TNF.α）、糖类抗原19.9（CA19.9）和癌胚抗原（CEA）联合检测对胃癌的诊断价值。 方法 采用放射免疫法测定42例胃癌和61例良性胃病患者胃液中TNF.α、CA19.9和CEA的含量。 结果 胃癌组胃液中TNF.α、CA19.9和CEA的测定值和灵敏度显著高于良性胃病组（P<0.001）;胃癌组联合检测胃液中TNF.α、CA19.9和CEA其灵敏度和特异度均明显高于单项指标的灵敏度和特异度。 结论 胃液中TNF.α、CA19.9和CEA联合检测能有助于提高胃癌的诊断率。

［关键词］ 固相免疫放射分析法;胃癌;肿瘤坏死因子.α;糖类抗原19.9;癌胚抗原

Combining testing levels of TNF.α，CA19.9and CEA in gastric juice for
the clinical diagnosis of gastric cancer

YU Qian，LI Ming，LIU Shun-ying，WU Zi-ying，ZHANG You-zhen

（Department of Gastroenterology，Zhongda Hospital，Southeast University，Nanjing210009，China）

Abstract:Objective To explore the clinical values of combining testing gastric juice levels of tumor necrosis factor-α（TNF.α）、carbohydrate antigen19.9（CA19.9）and carcinoembryonic antigen（CEA）in gastric cancer pa-tients.Methods The gastric juice levels of TNF.α、CA19.9and CEA in42cases of all stages of gastric cancer and61cases of benign gastric disorders were determined preoperatively by using immunoradiometric analysis（IRMA）method.Results The results showed that the gastric juice levels of TNF.α、CA19.9and CEA and their sensitivities were significantly higher（P<0.001）in the gastric cancer group than those in the benign gastric disorders group.The sensitivity and specificity of combining assaying gastric juice TNF.α、CA19.9and CEA levels were higher than those of the simple index in gustric cancer group.Conclusion Combining testing gastric juice levels of TNF.α、
CA19.9and CEA can contribute to add the diagnosis capacity in the patients with gastric cancer.

Key words:immunoradiometric analysis;gastric cancer;tumor necrosis factor;carbohydrate antigen19.9;carcinoembryonic antigen （Modern Medical Journal，2005，33:291.293）

胃癌是威胁人类生命健康的最常见的恶性肿瘤之一，在世界范围内长期占据癌症死亡率的首位。尽管近年来对胃癌的研究取得明显进展，但对失去手术机会的中晚期胃癌及术后复发患者，目前尚缺乏有效的治疗手段，所以胃癌的早期诊断就显得尤其重要。肿瘤标志物的检测特别是联合检测是恶性肿瘤早期诊断和复发诊断的一个重要方法［1～3］ 。关于胃肠道肿瘤标志物联合检测报道很多，临床意义评价不一。我们尝试联合检测胃液中肿瘤坏死因子.α（TNF.α）、糖类抗原19.9（CA19.9）、癌胚抗原（CEA）的水平，以期获得较高的灵敏度和诊断准确率。

1 资料与方法

1.1 临床资料

2004年6月～12月本科门诊患者共103例，其中男49例，女54例，年龄20～87岁，平均60.7岁。其中浅表性胃炎（甲组）30例，萎缩性胃炎伴不同程度的肠化生、不典型增生（乙组）31例，各期胃癌（丙组）42例。均经胃镜及病理学检查确诊。每例患者均空腹8h以上，在胃镜直视下用导管抽取胃液10ml，以4000r・min-1 离心10min，后取上清液2ml冻存待检。剔除胃液中有明显血液、胆汁者。

1.2 试剂和仪器

碘［125 I］.CEA放射免疫分析药盒、碘［125 I］.CA19.9放射免疫分析药盒、碘［125 I］.TNF放射免疫分析药盒均由北京北免东雅生物技术研究所提供。GC.911型γ放射免疫计数器由科大创新股份有限公司中佳分公司提供。

1.3 阳性界限值的判定

胃液参考值:采用乙组患者各指标总体均数95%可信区间的上限作为阳性值标准，由公式ˉx±t0.05（v）Sˉx 计算，可得CEA、CA19.9、TNF.α的参考值分别为21.32ng・ml-1 、42.11U・ml-1 和6.12ng・ml-1 。

1.4 统计学处理

实验数据以ˉx±s表示，采用t检验和χ2 检验进行统计学分析，P<0.05为有显著性差异。

2 结 果

2.1 胃液中各项指标的检测水平比较

丙组胃液中CEA、CA19.9、TNF.α水平均显著高于甲组和乙组（均P<0.001），乙组胃液中CEA、CA19.9、TNF.α水平显著高于甲组（P<0.05）。见表1。 表1 胃液中各项指标的检测水平比较（略）

2.2 胃液中各项指标检测结果的评价

由表1数据算出胃液中CEA、CA19.9、TNF.α的灵敏度、特异度、阳性预期值、阴性预期值和阳性似然比（表2）。胃液中CEA、CA19.9对胃癌的诊断价值相似，而胃液中TNF.α的各项评价指标均高于CEA、CA19.9，尤其阳性似然比为2.81，明显高于CEA、CA19.9，提示TNF.α的诊断价值较高。表2 胃液中各项指标检测结果的评价指标（略）

2.3 胃液中各项指标的联合检测

胃液中任意两项指标的联合检测对胃癌诊断的各项指标提高有限，而三项指标联合检测对胃癌诊断的各项指标明显提高，诊断价值也明显提高。见表3。表3 胃液中各项指标的联合检测（略）注:a胃液CEA，b胃液CA19.9，c胃液TNF.α

3 讨 论

肿瘤标志物由胃癌组织产生后多经淋巴引流进入血液循环，并可由唾液腺及胃、肠腺等消化道腺体分泌，其在血清中含量的高低不仅取决于肿瘤组织产生的量，也与患者肝脏清除及胆道排泄能力有关。胃液之所以能较敏感地反映胃的病变，因为此类肿瘤标志物不仅来源于胃黏膜上皮细胞的分泌和不断吞咽的唾液，也来源于胃癌组织分泌和脱落细胞分解，此外还与肿瘤的大小、生长方式和癌组织的脱落以及对周围组织的侵犯有关。目前，检测胃液的主要指标有CEA、S抗原、pH值及胃蛋白酶原，少有胃液TNF.α和CA19.9检测的报道。由于胃液收集困难且易被稀释，不易获得一个统一的临界参考值，文献中的标准也不一致。本研究采用统一的胃液收集方法并与胃良性疾病进行对照，将良性疾病的胃液平均检测值的95%可信区间上限作为胃癌胃液诊断的参考值。实验结果显示，胃液标志物的检测对于胃癌的诊断有着较高的价值。

CEA阳性物质呈棕黄色颗粒状存在于胃癌细胞质内，高分化胃癌细胞内的CEA显色强度明显弱于低分化胃癌，且集中排列于细胞游离缘侧胞膜的糖萼内，故认为CEA为外分泌蛋白。本研究胃液中CEA检测灵敏度达到61.9%，与有关报道一致［4］ 。

CA19.9在临床上用于诊断胰腺癌、大肠癌、胃癌。Lai等［5］ 认为血清CA19.9升高与胃癌淋巴结转移、肝脏转移和生存率以及预后密切相关。本实验中胃液CA19.9的灵敏度、特异度分别达到65.7%和67.2%。

TNF.α是由巨噬细胞和活化T细胞分泌的具有多种生物学活性的细胞因子，在机体的炎症及免疫应答等防御机制中起着重要作用［6，7］ 。近年来，研究表明TNF.α对肿瘤的作用呈双向性:TNF.α即可杀伤多种肿瘤细胞，起到抗肿瘤作用;又可作为一种生长因子促进肿瘤细胞生长和转移。陈军等［8］ 观察到胃癌患者血 清中有较高水平的TNF.α存在，但肿瘤仍继续发展、生长，体内的TNF.α并没有表现出抑制或杀灭肿瘤的效应，反而有促进肿瘤发生和转移的作用，这可能与肿瘤细胞表面缺乏与TNF.α相结合的受体有关。本研究中TNF.α在胃癌患者的胃液中明显高于良性病变者，其阳性似然比为2.81，高于良性病变者，提示TNF.α的诊断价值较高。多数学者研究证明［4，5，9］ ，将数种肿瘤标志物按一定的方式进行联合检测可起到优势互补的作用，可明显提高胃癌的诊断率。本研究提示，大部分两项指标联合测定不能显著提高胃癌诊断的灵敏度，而联合检测胃液中TNF.α、CEA和CA19.9可获得最佳的灵敏度和诊断准确度，有助于提高胃癌的诊断，可作为诊断早期胃癌的一个重要方法。

［参考文献］

［1］MARRELLI D，PINTO E，STEFANO A D，et al.Clinical utility of CEA，CA19.9，and CA72.4in the follow-up of patients with re-sectable gastric cancer［J］.Am J Surg，2001，181:16.19.

［2］SOLETORMOS G，NIELSEN D，SCHIOLER H，et al.Monitoring different stages of breast cancer using tumour markers CA15.3，CEA and TPA［J］.Eur J Cancer，2004，40:481.486.

［3］SAKAO Y，TOMIMITSU S，TAKEDA Y，et al.Carcinoembryonic antigen as a predictive factor for postoperative tumor relapse in ear-ly-stage lung adenocarcinoma［J］.Eur J Cardio-thoracic Surg，2004，25:520.522.

［4］成军，王严庆.胃癌患者胃液血清中CA72.4、CA19.9和CEA联合检<