【摘要】 目的 探讨Cfos和PCNA在胃癌发生发展中的作用。方法 应用SP免疫组织化学方法检测76例胃癌组织中Cfos和PCNA的表达。结果 Cfos和PCNA在胃癌中表达的强弱与癌组织的分化程度及淋巴结转移有关（P＜005），与胃癌浸润深度无关（P＞005）。结论 Cfos和PCNA与胃癌的发生发展密切相关，可能是反映胃癌生物学行为和预测预后的重要标记物。

【关键词】 胃癌 Cfos基因 增殖细胞核抗原 免疫组织化学

目前认为与肿瘤发生有密切关系的基因已有100多种，其中它们在染色体上的定位已有一半以上被确定〔1〕。胃癌的发生是涉及多种癌相关基因多个阶段累积作用的结果，细胞增殖和凋亡的失衡也是这一过程的重要因素。因此，我们采用免疫组织化学方法检测胃癌组织中Cfos和PCNA的表达情况，旨在探讨它们的异常表达在胃癌组织中发生、发展中的作用。

1 材料与方法

11 材料 选自1996～2002年河北北方学院病理外检胃癌手术标本76例，男53例，女23例；年龄27～72岁；高分化24例，中分化14例，低分化38例；浸润到浅肌层8例，浸润到深肌层28例，浸润浆膜层40例；术后病理证实淋巴结转移30例，无淋巴结转移46例。

12 试剂 兔抗 人Cfos多克隆抗体，鼠抗 人PCNA单克隆抗体，均为美国ZYMED公司产品，SP免疫组化检测试剂盒、DAB均购自北京中山公司。

13 方法 全部标本均用10%中性福尔马林固定，石蜡包埋，5 μ m厚连续切片，分别做免疫组化染色，HE染色。Cfos、PCNA均采用热抗原修原，以已知免疫组化染色阳性切片做阳性对照，以PBS液代替第一抗体做阴性对照，DAB显色，各项指标的检测均严格按试剂盒说明书操作。

14 判定标准 Cfos及PCNA免疫组化阳性反应多定位于细胞核内，细胞质不着色。Cfos阳性核染色的细胞＜10%为（-）；细胞染色10～80%为（+）；细胞染色＞80为（）。PCNA阳性细胞分为Ⅳ级，阳性细胞＜25%为Ⅰ级；26%～50%为Ⅱ级；51%～75%为Ⅲ级；＞75%为Ⅳ级。Ⅰ、Ⅱ级为阴性，Ⅲ、Ⅳ级为阳性。

15 统计学处理 采用χ2检验。

2 结果

21 Cfos表达与临床病理特征的关系 Cfos阳性表达在分化程度不同的胃癌组间随着胃癌分化程度降低而提高，高分化组与低分化组比较有显著差异（P＜ 005）。在淋巴结转移组中，Cfos阳性率明显高于非转移组（P＜ 005）（表1）。

表1 Cfos和PCNA表达与胃癌病理指标之间的关系（略）

1）P＜ 005，2）P＜ 005

22 PCNA表达与临床病理特征的关系 PCNA表达在分化程度不同的胃癌组间随着胃癌分化程度降低而提高（P＜ 005），有淋巴结转移的阳性率明显高于无淋巴结转移（P＜ 005），但与胃癌浸润深度无显著差异（P＞005）（表1）。

23 Cfos与PCNA表达的关系 在Cfos呈阳性表达34例中，31例（911%）PCNA表达阳性；在Cfos呈阴性表达的42例中，26例（620%）PCNA表达阳性，两者表达呈正相关（P＜ 005）。

3 讨论

Cfos是核心癌基因，由380个氨基酸组成，是编码为55KD的核内蛋白质。它定位于第14号染色体（14q），Cfos包含5个外显子，其3′末端非编码区的缺失，可使Cfos激活，当Cfos基因被激活后迅速转录mRNA,然后进入胞质中，合成Cfos蛋白，之后较快的进入胞核，从而调节细胞核内癌基因，所以称为核内癌基因〔2〕。在细胞正常增长的情况下，如果Cfos过量表达，可以破坏细胞数量的动态平衡，可导致肿瘤的发生。Cfos参与细胞生长，浸润及转移的调节，当受到非某些因素影响后，其结构表达失常，从而被激活，此时，Cfos具有肿瘤转化活性，检测基因产物有助于从蛋白水平认识肿瘤的本质，本研究结果显示Cfos表达与胃癌的分化、浸润、淋巴结转移有密切关系。肿瘤分化程度低者Cfos阳性率明显高于中高分化；癌组织浸及浆膜层表达率高于浸及浅肌层深肌层；有淋巴结转移者的阳性率明显高于无淋巴结转移者，与文献报道相符〔3，6〕。提示基因是预后不良因子，其表达在胃癌的侵袭、转移过程中起重要作用，是判断胃癌生物学行为的一个重要指标。

PCNA是一种在增殖细胞中合成或表达的核内多肽，也就是控制细胞DNA合成所必需的一种36KD的核蛋白，为DNA聚合酶的辅助蛋白，其表达的程度含量反映了细胞增殖的活性。它在G1早期开始上升，S期达高峰，G2、M期持续下降，G0期维持极低水平，它对DNA复制和调节起重要作用〔4，5〕。PCNA是目前一个能较好地反映肿瘤细胞增殖状况的指标，对于判断肿瘤的预后的重要价值。本组资料显示，肿瘤分化程度较低，增殖活性越高，而肿瘤增殖活性越高，越易发生浸润，也更容易发生淋巴结转移，生存期越短，预后越差。因此，PCNA表达可作为一个胃癌分化程度，判断其侵袭力和预测预后的可靠指标〔7〕。

目前认为肿瘤的发生、发展是多基因协同作用的过程，多个基因检测比检测单个基因表达产物更具预后判断意义。本研究提示，在胃癌的发生、发展、浸润转移过程中，Cfos与PCNA有协同作用，但两者的作用机制有待于进一步研究。

【参考文献】
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