【关键词】 胃癌 GST_π P_gP C_erbB_2 免疫组织化学

Expression of GST_π, P_gP and Oncogene(C_erbB_2)in Gastric Cancer and Its

SignificanceQIU Qian_cheng, HUANG Jie_xiong, HONG Liang_li, XIE Bin, ZENG Qing_chun, DONG Heng

(Department of Pathology, The First Affiliated Hospital, Shantou University Medical College, Shantou515041, China)

［Abstract］Objective: To study the expression of GST_π, P_gP and oncogene(C_erbB_2)in gastric cancer and its significance. Methods: The gastric cancer samples(262 cases)were collected. The expression of GST_π, P_gP and C_erbB_2 in gastric cancer was detected by immunohistochemistry. Results: In the all gastric cancer samples, GST_π expressed in 169 samples(645%), P_gP in 167 samples(637%)and C_erbB_2 in 173 samples(660%). The expression of GST_π, P_gP had no correlation with the size, the histological category of tumor, the metastasis of the lymph nodes and clinical stages. The expression of C_erbB_2 had correlation with the size, the histological category of tumor, clinical stages but no correlation with the metastasis of the lymph nodes. Conclusion: It plays a role in the determination of chemotherapy and its prognostic by detecting the expression of GST_π, P_gP and C_erbB_2 in gastric cancer.

［Key Words］gastric cancer;GST_π; P_gP; C_erbB_2;immunohistochemistry

胃癌是高发的恶性肿瘤之一，且有上升趋势。手术与化疗仍是治疗胃癌的主要手段。但肿瘤的耐药问题常导致胃癌术后化疗失败。这可能与肿瘤耐药发生机制的复杂性有关。因此，全面了解肿瘤细胞耐药发生机制，开展和普及肿瘤患者的耐药基因常规检测己成为临床制定个体化治疗方案的关键。2002_04～2006_03我们选取我院外科手术切除并有完整病历的胃癌标本262例(未化疗)，检测其胃癌组织中GST_π、P_gP及C_erbB_2的蛋白表达情况，结合临床病理特征进行分析，现报道如下。

1 资料与方法

11一般资料本组男性204例，女性58例。年龄31～83岁，平均59岁。肿瘤≥4cm 200例，＜4cm 62例。标本均经体积分数10%的福尔马林液固定，石蜡包埋，做4μm厚的连续切片。管状腺癌227例(高、中分化腺癌113例，低分化114例)，粘液腺癌32例，印戒细胞癌3例；有淋巴结转移169例，无淋巴结转移93例；按临床TNM分为T1(肿瘤浸润至黏膜或下层)22例，T2(肿瘤浸润至肌层或浆膜)49例，T3(肿瘤穿透浆膜而未侵及邻近结构)149例，T4(肿瘤侵及邻近结构)42例。

12 试剂与方法免疫组化染色采用S_P法，抗GST_π、P_gP、C_erbB_2蛋白均采用鼠抗人的单克隆抗体，浓缩型，工作液1∶50稀释，其他染色步骤按说明书进行，其中P_gP、C_erbB_2在加入一抗前用柠檬酸盐缓冲液(pH 60)进行微波抗原修复，用PBS代替一抗作阴性对照，用福州迈新试剂公司提供的阳性对照片作阳性对照，DAB显色，苏木精对比染色，中性树胶封固，GST_π、P_gP、C_erbB_2抗体、S_P试剂盒、DAB显色剂均购自福州迈新试剂公司(中国)。苏木精_伊红染色，镜下观察，按WHO组织学分类。

13 判定标准细胞质中有GST_π蛋白的阳性棕黄色颗粒，细胞膜和细胞质中有P_gP、C_erbB_2蛋白的阳性棕黄色颗粒。本实验判断标准为阳性细胞占肿瘤细胞＜25%为阴性，≥25%为阳性。

14统计学处理应用简明统计(1034)软件包进行χ2检验和Pearsonχ2检验。

2 结果

21GST_π、P_gP蛋白表达与肿瘤大小、组织类型、分化程度、淋巴结转移、临床分期无关，其间比无统计学意义(P＞005，表1)。细胞质中可见GST_π蛋白的阳性棕黄色颗粒(图1，封2)，细胞膜和细胞质中可见P_gP蛋白的阳性棕黄色颗粒(图2，封2)。表1 GST_π、P_gP及C_erbB_2蛋白表达与胃癌病理特征的关系

22 C_erbB_2蛋白表达与肿瘤大小、组织类型、分化程度、临床分期有关，其间比有统计学意义(P＜005)。而与有无淋巴结的转移无关(P＞005，表1)。其C_erbB_2蛋白的阳性棕黄色颗粒在细胞膜和细胞质中可见(图3，封2)。

23

本组GST_π、P_gP蛋白表达同时阳性和同时阴性有163例(622%),其相关性比较有统计学意义(P＜005，表2) 表2 胃癌中GST_π、P_gP蛋白表达的相互关系

3讨论

GST_π在人体内参与烷化剂、脂过氧化物、DNA过氧化物以及细胞毒物质产生的自由基的解毒过程，许多毒性很大的亲电性抗肿瘤药物(如烷化剂、蒽环类或重金属药物等)可诱导癌细胞GST_π的表达增加，使得这些进入细胞内的有毒物质迅速与谷胱甘肽结合，形成无毒物质被排出细胞。GST_π阳性表达的肿瘤，其主要的耐药药物有顺铂、阿霉素、5_Fu、丝裂霉素等［1，9］。P_gP是一种能量依赖性跨膜蛋白，具有“药泵”的作用，能将细胞内的药物转运到细胞外，使细胞内药物的浓度下降或定量丧失而产生耐药。其所介导的抗癌药主要是植物碱类、阿霉素、紫杉醇和泰素帝等［9］。对于P_gP高表达的病人，确实要用上述药物，有必要给予MDR增敏剂或逆转药物(异搏定、硝苯吡啶、环胞素A等)有助于提高肿瘤的化疗效果。本实验结果中GST_π、P_gP的表达与肿瘤大小、组织类型、淋巴结转移及临床分期无关，这与文献的研究结果相同［1,2,5］。两者在胃癌的表达具有较强的一致性，与文献报道的一致［9］。GST_π、P_gP在肿瘤细胞产生耐药过程可能存在某种水平的共调节机制，是多因素参与的结果。也有学者认为两者各成系统，相互独立。至于哪个才是耐药的重要机制现在尚不明了［3］。C_erbB_2与胃癌的预后有明显关系,该基因过度表达的病人其术后病死率高,生存期短,预后差［4,6,8］。本实验结果也表明C_erbB_2的过度表达与肿瘤的发展、侵袭、组织类型、临床分期有密切的正相关。在乳腺癌中，C_erbB_2阳性的病人对经典的CMF(环磷酰胺、氨甲喋呤、氟尿嘧啶)化疗方案不敏感，必须用阿霉素或紫杉醇类药。1998年美国FDA批准上市了一种新药(Herceptin)，它是一种单克隆抗体，能特异性与C_erbB_2结合，抑制癌细胞的生长，经临床实践已取得公认疗效，这些药物用在治疗C_erbB_2过表达的胃癌病人是否有这样的效果，有待我们进一步的研究与探讨。总之，对临床上需要化疗的胃癌患者，进行肿瘤耐药的检测，可为其选用化疗方案提供了理论依据，使患者能选择到最优化的化疗组合方案，避免盲目用药，减轻患者的痛苦和经济负担，提高疗效。

【参考文献】
［1］王岩， 刘晓霞, 张少华, 等. P_gP、GST_π与P53在胃癌组织中表达及相关性研究［J］. 宁夏医学杂志， 2005， 11， 27(11)： 734-736.

［2］郑义同， 吉亚君， 杨成喜, 等.胃癌组织中P_gP、GST_π和ToPoⅡ的表达及临床意义［J］. 实用癌症杂志， 2002， 11， 12(6)： 608-610.

［3］杨纯正， 许元富， 齐静. 应重视肿瘤耐药机制和耐药基因检测研究及应用［J］. 中华检验医学杂志， 2005， 12， 28(12)： 1221-1224.

［4］陈斌， 罗荣城， 催斐, 等. 胃癌Her_2/neu基因表达与预后的相关性［J］. 南方医科大学学报， 2006, 6(3)： 344-345.

［5］刘连新， 姜洪池， 朱安龙, 等. GST_π、P_gP蛋白在胃癌中的表达［J］. 中国肿瘤临床与康复， 2000, 7(6)： 23-24.

［6］李秋元， 祝森志， 陈素钻, 等. C_erbB_2及GST_π基因在汕头地区胃癌患者的表达特点［J］. 广东医学杂志， 2006, 27(6)882-883.

［7］于冬青， 易永芬. MDR、GST_π、ToPoⅡ和LRP在胃癌组织中的表达及意义［J］. 癌症， 2003, 22(5)： 496-499.

［8］张杰， 舒维清， 朱卫, 等. 胃癌中Her_2/neu过表达与基因扩增及其意义［J］. 中华病理学杂志， 2003, 32(1)： 52-53.

［9］余震， 龚建平. 肿瘤抑制基因和耐药基因在肿瘤化疗中的应用进展［J］. 浙江临床医学， 2004, 6(8)： 732-733.