【摘要】 目的 探讨survivin在胃癌中的表达及与癌细胞增殖之间的关系。方法 采用免疫组化法检测survivin在胃癌组织中的表达及肿瘤细胞增殖情况（PCNA）。结果 Survivin表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小和是否有肝转移无关，而与肿瘤的浸润深度、肿瘤分期、有无血管侵犯和淋巴结转移有关。结论 Survivin与胃癌的临床病理生物学行为有关，可能在胃癌发生发展中发挥肿瘤细胞凋亡抑制作用有关。

【关键词】 Survivin基因 PCNA 胃癌

胃癌的发生和细胞增殖与凋亡失控密切相关，PCNA和survivin是近几年研究细胞增殖与凋亡的热点［1］。本研究从PCNA和survivin角度探讨胃癌的发生机制。

1 资料与方法

1.1 临床资料

2003年2月～2005年8月在我院经手术治疗的60例胃癌病人：男39例，女21例，年龄33～80岁；贲门癌10例，胃体部癌16例，胃窦部癌34例；肠型胃癌25例，弥漫型胃癌35例；TNM分期：Ⅰ期有9例，Ⅱ 期有18例，Ⅲ 期有22例，Ⅳ期有11例。

1.2 研究方法

采用免疫组化SP法进行Survivin基因、PCNA染色。每次染色以磷酸盐缓冲液代替一抗作阴性对照，以购买试剂盒阳性切片内阳性细胞染色为阳性对照。结果判断：survivin定位于细胞浆，细胞浆有棕黄色颗粒者为染色阳性。显微镜下计数5个视野，计算阳性细胞数，阳性细胞率＝阳性细胞数/总细胞数。阳性癌细胞率＞5%判为阳性病例，＜5%为表达阴性病例。PCNA表达于细胞核，细胞核染色呈棕黄色颗粒为阳性。PCNA表达采用计数标记指数。阳性细胞数占1%～20% 为低表达（+），21%-50%为中度表达（++），超过或等于51%为高度表达（+++）。

1.3 统计学方法

采用 SPSS10.0统计学软件。数据比较用χ2检验，P＜0.05具有统计学意义。

2 结果

2.1 Survivin定位于细胞浆，正常胃粘膜上皮无survivin蛋白阳性颗粒染色，阳性颗粒为细胞浆内棕黄色颗粒。60例胃癌组织中，survivin蛋白阳性表达27例（45.0%），阴性表达33例（55.0%)。

2.2 Survivin表达与胃癌临床病理因素的关系

见表1。表1 Survivin表达与胃癌浸润深度、TNM分期、血管浸润的关系（略）

结果表明，Survivin阳性表达与肿瘤的位置、肿瘤大小和性别无关（P＞0.05)；肠型胃癌表达率显著低于弥漫型胃癌（P＜0.01)；肿瘤浸润深度高者survivin表达率明显高于浸润深度浅者（P＜0.05)。肝转移、淋巴结转移和血管侵犯者survivin的阳性表达率显著高于无淋巴结转移和血管侵犯者（P＜0.05)。随肿瘤 TNM 分期的增加,survivin阳性表达率逐渐增加（P＜0.05)。

2.3 胃癌组织survivin蛋白表达与肿瘤细胞增殖的关系
PCNA阳性表达颗粒位于细胞核，细胞核内见棕黄色颗粒。阳性组患者的肿瘤细胞增殖水平PCNA LI(%)明显高于survivin阴性组(95.7±28.0vs47.2 ± 36.1)（P＜0.01)。

3 讨论

研究表明，胃癌细胞某些基因表达与细胞凋亡状况密切相关。survivin是迄今发现的最强的凋亡抑制因子［2］。survivin基因的表达与Bcl-2、p53基因表达有一定的相关性［3］。

survivin在常见恶性肿瘤组织中有不同程度的表达，其表达情况与肿瘤患者的临床病理因素可能有关［4］，与患者的预后相关［5-6］。但不同肿瘤组织survivin表达情况又不尽为高脂血症组。

1.2 方法

患者检查前1周内避免应用抑制血小板药物，前一日禁油腻饮食，当日晨禁食、水，静脉取血8ml，肝素抗凝，按血流变血检测技术方法做流变学检查。

1.2.1 全血高切、低切粘度测定采用BME-1型生物医学处理计算机粘度计和显微镜红细胞电泳仪(型号RA-50，产地：美国)。

1.2.2 红细胞沉降率（erythrocyte Sedimentation rate，ESR）和血细胞压积（packed cell volum,PCV）：将肝素抗凝血，置于温氏管25℃恒温1小时，记录红细胞沉降率，然后3000转/分离心30分钟记录PCV数。

1.2.3 血浆纤维蛋白原（fibrinogen,FG）：采用凝块分离双缩脲比色测定法。设备：全自动血凝分析仪 （型号：RA-50，产地：美国）。

1.2.4 总胆固醇,甘油三脂：采用酶法，设备：全自动生化分析仪（型号：7020，产地：日本）。

1.3 统计学分析

计量资料以（x±SD）表示，两组间比较用t检验。

2 结果

见表1～2。表1 高脂血症组与健康组血流变学指标血脂测定比较（略）表2 中风预测结果（略）

3 讨论

从表1看出84例高脂血症患者的血液流变学结果表明，大多数指标异常，与健康组比较均有明显差异（P＜0.01）。血液中胆固醇带有正电荷，能中和红细胞、血小板表面的负电荷。使红细胞及血小板聚集性增强，电泳率变慢，导致血沉增快、血粘度增高。甘油三脂的乳糜微粒和前脂蛋白为脂蛋中分子量最大高分子有机化合物，对提高全血粘度有较大的影响。从表1表明，大部分冠心病患者伴有血脂和粘度增高。主要表现为RBC聚集性增强，低切粘度明显增高，PCV增高，使血液有形成份改变。冠状动脉之所易发生粥样硬化，可能是该动脉与主动脉几乎成直角，其近端及主要分支受到血流冲击力大，因而易受损。血脂增高脂质易透入，所以易发生粥样硬化，表明血脂增高对于冠状动脉粥样硬化性心脏病发生有密切关系。据有关资料报道，冠状动脉粥样硬化性心脏病，主要的易患因素为：高血脂、高血压、肥胖、吸烟、饮酒等。有关资料调查报道，高血脂症占34%，均有不同程度的冠状动脉粥样硬化。我们对84例高血脂症用BDSIC型中风预测计算分析，从表2结果分析：SAFE（安全的）占10.71%，PARTIALLY SAFE（部分安全的）占34.52%，WAENING占30.95%，DANGER（危险的）占23.81%，血流变检测表明，高血脂症和冠心病密切相关，和有关报道基本相同（参考文献）。所以降低血脂，是预防冠状动脉粥样硬化性心脏病有效措施之一。

近几年来随着血液流变学的检测指标的不断增多和仪器更新，血液流变学理论及血液流变学疗法，正逐步广泛地应用于临床的更多领域，以往某些不能解释的发病机理，可以用流变学理论进行探讨。在临床上对疾病的诊断和预测有非常重要的意义。

【参考文献】
［1］黄翠珍，胡卓娅，陈福光，等.珠海地区健康人群血清TG、CHO参考范围的调查［J］．实用医技杂志，2005，12（3）：718-358

［2］王群，李萍.邢台市郊区村民血脂水平分类分析［J］.中国民康医学杂志，2005，17（7）：356-358

［3］吴月技.心脑血管病与高脂血症关系的探讨［J］.公企医刊，2006，19（2）：11-12

［4］赵洪泉，郭玉娥，赵志明.山东省惠民地区成人血脂四项参考值水平调查［J］.中原医刊，2004，31（5）：56-57