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【关键词】 淋巴滤泡
【关键词】胃肿瘤 细胞凋亡 毛细血管 淋巴滤泡
有人提出，是低度凋亡和高度增殖相结合的病理过程促进了胃癌的发生和发展［1、2］。我们设想，除了癌细胞的增殖，作为其血供直接来源的瘤体内微血管以及邻近免疫组织特别是淋巴滤泡的增殖情况应该与肿瘤的发生具有某种相关性。为此我们观察了胃癌细胞凋亡指数和病变区域微血管密度、淋巴滤泡均数之间的关系。
1 材料和方法
1.1 材料
胜利油田石油管理局中心医院1993年1月~1994年11月临床及病理资料比较完整的胃癌手术切除标本81例，男69例，女12例，年龄29~83岁。所有病例手术前均未接受化疗、放疗或免疫疗法。标本经10%福尔马林固定，石蜡包埋，制成4μm厚连续切片。
1.2 方法
1.2.1 TUNEL染色显示凋亡细胞
细胞凋亡原位检测试剂盒为德国Boehringer Mannheim公司产品。染色步骤：①切片经二甲苯脱蜡，梯度乙醇水化；②3mL/L H2O2封闭30min；③20mg/L蛋白酶K消化20min;④TUNEL反应液，37℃孵育60min；⑤过氧化物酶连接的抗荧光素抗体，37℃孵育30min；②~⑤后均以10mmol/L PBS（pH7.4）振洗3次，每次5min；⑥DAB显色，苏木素复染，脱水透明，封片。以PBS替代TUNEL反应液作阴性对照，阳性对照切片经DnaseⅠ预处理10min，再接TUNEL染色步骤。凋亡细胞核呈蓝黑色，背景细胞核为红色。见图1（略）。
凋亡指数（apoptosis index,AI）：光镜下选凋亡细胞最多的5个高倍视野，每个视野计数100个细胞中凋亡细胞数，取其平均值为AI。（-）：AI
