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膀胱癌患者外周血树突状细胞的体外培养扩增和鉴定

2022-07-28
来源:求医网
(武汉)为了研究膀胱癌患者外周血树突状细胞(DC)的体外培养扩增和鉴定。研究者应用Ficoll-Hypaque离心获得界面细胞,贴壁培养2 h,获得单个核细胞,体外以重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF,50 ng/ml)+重组人白细胞介素4(rhIL-4,10 ng/ml)+人肿瘤坏死因子-α(hTNF-α,50 ng/ml)诱导培养.倒置相差显微镜及扫描电镜下观察DC生长情况,流式细胞仪检测DC表型,MTT法检测DC活化的T细胞对肿瘤细胞BIU87的杀伤率。结果第6天体外培养的DC由贴壁状态变为悬浮毛刺状细胞,第8天为形态不规则的毛刺状,为典型DC形态。流式细胞仪检测表明,成熟DC高水平表达CD1a、CD83、CD86及HLA-DR等。被DC激活的T细胞对膀胱癌细胞株BIU87的杀伤率为(48.8±3.7)%,未经DC激活的T细胞的杀伤率为(25.7±1.5)%,2组比较差异有统计学意义(P<0.01)。可见膀胱癌患者外周血经rhGM-CSF+rhIL-4+hTNF-α体外诱导培养能诱导出DC。