针对Her-2基因的小分子干扰RNA对卵巢上皮性癌细胞生物学
2022-07-28
来源:求医网
(合肥)为了通过小分子干扰RNA(siRNA)对Her-2基因表达的影响,探讨其对卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞生物学行为的影响。研究者针对Her-2基因的siRNA质粒和阴性对照质粒在脂质体介导下转染到包装病毒细胞株PT67中,嘌呤霉素筛选细胞克隆,收集其上清液并感染SKOV3细胞,经过嘌呤霉素筛选得到稳定转染的细胞株SKOV3/siRNA、SKOV3/siRNA-negative,并通过RT-PCR和免疫组化方法鉴定Her-2基因表达的抑制效果。用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖并绘制生长曲线,通过流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡,并将稳定转染的细胞株接种到裸鼠皮下检测成瘤情况。结果 (1)SKOV3/siRNA细胞Her-2基因的表达明显减弱。(2)SKOV3/siRNA细胞的G0/G1期细胞占68.6%,S期细胞占15.1%,SKOV3/siRNA-negative细胞的G0/G1期占55.8%,S期占23.3%。(3)SKOV3/siRNA细胞的早期凋亡率为(10.500±0.250)%,而SKOV3/siRNA-negative细胞为(0.340±0.010)%,两者比较,差异有统计学意义(P<0.01)。(4)与SKOV3/siRNA-negative细胞比较,SKOV3/siRNA细胞的生长速度减慢(P<0.05),接种于裸鼠皮下的肿瘤生长速度明显减慢(P<0.01)。可见 siRNA可以有效抑制Her-2基因的表达,抑制卵巢癌细胞的生物学行为。