人端粒酶逆转录酶基因siRNA表达框架的构建和体外表达研究
2022-07-28
来源：求医网
（广州）为了探讨靶向小干扰RNA表达框架(SEC)对舌癌细胞内源性人端粒酶逆转录酶基因(hTERT)的特异性抑制作用。研究者利用两步法PCR技术构建多条SEC，采用第5代聚酰胺-胺型树枝状高聚物(G5 PAMAM-D)纳米微球介导SEC转染Tca8113细胞，应用实时荧光定量RT-PCR技术和Western-blot等检测内源性hTERT的表达水平，并进一步筛选出最有效的小干扰RNA靶序列。结果针对不同靶位点设计的SEC干扰效果有显著差异，SEC-A的干扰效果最强，并且能以高度序列特异性方式沉默hTERT基因的表达；此外，转染次数与载体理化特性亦可影响SEC的干扰效应(P＜0.05)。可见RNA干扰效应主要取决于靶序列；G5 PAMAM-D纳米载体能够介导SEC-A高效抑制内源性hTERT基因的表达；hTERT基因有望成为舌癌基因治疗的理想靶点。
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