已知EB病毒感染与类风湿性关节炎和SLE等自身免疫病的发生有关^[1]。为探讨EB病毒与皮肌炎(DM)/多发性肌炎(PM)的关系，我们应用PCR技术对DM/PM患者外周血白细胞中的EB病毒进行了检测，现报道如下。

一、资料和方法

(一)病例：DM和PM共40例，男8例，女32例；年龄18～65岁，平均39.61±12.86岁。其中DM18例，PM 22例。均符合Bohan等^[2]的诊断标准，且均无并发恶性肿瘤。正常对照组选自健康志愿者40例，年龄和性别与患者组匹配。

(二)试剂：采用上海复生生物工程研究所生产的PCR检测EB病毒试剂盒，成分：EB病毒-PCR反应液(含4种脱氧核苷三磷酸及标准PCR缓冲液)，Taq酶(1μL/μL)，EB病毒-DNA裂解液，EB病毒阳性模板。

(三)方法：

1.标本处理：肝素抗凝血200μL，加1mL 0.83％ NH4Cl，37℃水浴20min，8000r/min3min离心，弃上清液及压积于白细胞表面的红细胞碎片，并尽量吸去。在得到的白细胞中加入40μL裂解液和2μL(10mg/mL)蛋白酶K，搅匀后45℃水浴1h，稍加离心，100℃水浴5min，10000r/min 2min离心，取上清液待检。

2.加样及PCR扩增：加EB病毒-PCR反应液20μL、Taq酶1μL(1U/μL)、阳性模板/待检样本3μL，混匀后稍加离心，滴2滴消毒液体石蜡油，置94℃预变性2min，再94℃30s、55℃ 30s、72℃ 60s扩增35个循环。

3.电泳与结果判定：取15μL反应液，2％琼脂糖凝胶电泳(5V/cm)30min后，紫外灯下观察结果。若在154bp处出现橙黄色条带，则为EB病毒阳性。

4.统计分析：χ²检验。

二、结果

40例DM/PM中EB病毒阳性者16例，阳性率为40％；18例DM中EB病毒阳性者8例，阳性率为44％；22例PM中EB病毒阳性者8例，阳性率为36％。40例对照组中EB病毒阳性者3例，阳性率7.5％。统计分析表明，DM/PM与对照组比较，χ²=11.66,P＜0.01；DM与PM比较，χ²=0.27,P ＞0.05；DM与对照组比较，χ²=11.02,P＜0.01；PM与对照组比较，χ²=8.10,P＜ 0.01。

三、讨论

DM/PM是一种自身免疫性疾病，其外周血中存在多种自身抗体，如抗Jo-1抗体等。研究表明，EB病毒在体外与DM外周血B淋巴细胞作用后，B淋巴细胞在短时间内即可合成和分泌大量的抗体，包括抗核抗体等^[3]。本研究表明，DM和PM的EB病毒感染率显著高于正常对照组，表明EB病毒感染可能与DM/PM中B淋巴细胞活化、增殖、转化和自身抗体产生有关，即可能是DM/PM的发病诱因。另外，也不排除由于DM/PM自身免疫功能紊乱，从而有利于EB病毒感染或携带，导致EB病毒高感染率。目前尚无定论，有待进一步研究。

参考文献

[1] Petersen J, Rhodes G, Roudier J, et al. altered immune response to glycinerich sequences of Epstein-Barr nuclear antigen-1 in patients with rheumatoid arthritis and systemic lupus erythematosus. Arthritis Rheum, 1990, 33: 993-1000.

[2] Bohan A, Peter JB. Polymyositis and dermatomyositis. N Engl J Med,1975,292:403-407.

[3] 李文全, 畅继武. 皮肌炎患者B淋巴细胞分泌免疫球蛋白的检测.中华皮肤科杂志, 1994,27:364-365.

(收稿：1997－12－01 修回：1998－03－16)