关键词： 肾虚；中医病机；脾虚；中医病机；脾脏；超微结构；胸腺；超微结构；肾上腺；超微结构；动物疾病模型

摘要：采用对比研究的方法，在相同实验条件下，观察和比较了肾阳虚证、脾虚证实验动物的免疫器官脾、胸腺、内分泌器官的超微结构改变，及补肾方药肾气汤、补脾方药四君子汤对它们的影响。结果显示：脾虚、肾阳虚证动物的脾脏、胸腺超微结构均有明显的破坏现象，肾阳虚证尤甚，且肾阳虚证动物的肾上腺超微结构也有明显的破坏现象。提示脾虚、肾阳虚证都有相应器官的超微病理学证据。补脾和补肾方药治疗可分别改善脾虚证、肾阳虚证动物已受破坏组织结构的实验结果，也佐证了上述的观点。

中图分类号：R284.5

文献标识码：A文章编号：1003-9783(1999)04-0208-03

A Comparative Study on the Ultrastructures of Immune and Endocrine Organs in Kidney－Deficiency and Spleen－Deficiency Model Rats

LEI Weiwei,HUANG Zhengyan,ZHENG Gaofei,et al.

(Laboratory of Electron Microscope,Guangzhou University of TCM,Guangz hou 510405)

Abstract:The ultrastructures of spleen,thymus and endocrine or gans in kidney－yan g deficiency and spleen－deficiency model ratswere compared,and the effects of Shengqi Tang and Si Junzi Tang on the above model rats were observed under the same experimental conditions.The results showed that the ultrastructures of spleen and thymus in spleen－deficiency and kidney－yang deficiency rats were obviously da maged,especially in the latter,and that of the adrenal gland in kidney－yang def iciency rats was also singnificantly damaged.These provide an ultrapathol ogical evidence of corresponding organs for spleen－deficiency and kidney－yang de ficiency syndromes.Furthermore,Shengqi Tang(a kidney－tonifying formula)and Si Junzi Tang(a spleen－tonifying formula)can reduce the ultrastructural dam ages in spleen－deficiency and kidney－yang deficiency rats respectively.

Keywords:kidney deficiency/pathogenesis(tcm);spleen deficiency /pathogenesis(tcm) ;spleen/ultrastruct;thymus gland/ultrastruct;adrenal grand/ultrastruct;animal disease model

为了探讨肾阳虚证、脾虚证的实质及补肾、补脾疗法的机理，采用对比研究的方法，在相同的实验条件下，观察和比较肾阳虚证、脾虚证模型动物免疫、内分泌器官的超微结构改变，及补肾、补脾疗法对它们的影响，为肾阳虚、脾虚证模型动物免疫、内分泌功能变化的研究提供形态学的依据。

1实验材料

1.1动物SD系健康大白鼠，由广东省医药实验动物场提供，每只体重约200g左右，雄性。

1.2药物醋酸氢化可的松注射液，上海第九制药厂制造，25mg/mL,批号950901。肾气汤，按《金匮要略》中肾气丸的配方，四君子汤根据《太平惠民和剂局方》配方，方剂和造型用大黄饮片，均由广州中医药大学第一临床医学院提供，煎制方法参见文献^［1］。

2实验方法

2.1动物分组取SD系大白鼠56只，随机分为7组，每组8只。Ⅰ组：正常对照组；Ⅱ组：肾阳虚证造型组；Ⅲ组：脾虚造型组；Ⅳ组：肾阳虚造型+肾气汤组；Ⅴ组：脾虚造型+肾气汤组；Ⅵ组：肾阳虚造型+四君子汤组；Ⅶ组：脾虚造型+四君子汤组。

2.2动物造型方法

2.2.1肾阳虚证模型：每天肌注醋酸氢化可的松0.3mL/只，两后肢交替注射，连续8d。

2.2.2脾虚证模型：每天胃饲100%大黄水煎剂2mL/只，连续8d。

2.3实验给药方法

第1～8天，Ⅱ～Ⅶ组每天按造型方法给药，Ⅰ组则每天肌注生理盐水0.3mL/只，两后肢交替注射；第6天开始，Ⅱ～Ⅶ组每天胃饲肾气汤或四君子汤2mL/只，Ⅰ～Ⅲ组胃饲等量干净水，连续8d。

2.4样本制备与观察

将经上述处理的各组动物断头处死，迅速暴露脾脏、胸腺与肾上腺，尽快在各脏器上取一小块组织，按电镜制样常规处理标本^［2］，AO超薄切片机切片，置JEM—1200EX透射电镜下观察拍片。

3实验结果

3.1脾脏

3.1.1Ⅰ组：脾小体中淋巴细胞密集，界膜清楚；核(N)大，核内异染色质多，可见核仁(Nu)；胞质少，内有为数不多的线粒体(Mi)与内质网，丰富的核糖体(图1)。

3.1.2Ⅱ组：多数淋巴细胞溶解消失，残存的淋巴细胞稀少，边界不清；核(N)内异染色质少，核膜下异染色质变薄，核周间隙增宽(▲)；胞质中细胞器明显减少(图2)。

3.1.3Ⅲ组：淋巴细胞较正常组稀少；核(N)内异染色质有轻度减少，个别细胞的核周间隙增大(▲)；胞质中细胞器数量不多(图3)。

3.1.4Ⅳ～Ⅶ均接近正常组，仅见个别淋巴细胞核周间隙轻度增宽(▲)，细胞器仍少于正常组，其中以Ⅳ与Ⅶ组更接近正常组，并在淋巴细胞中出现浆细胞(PC)(图4)。

3.2胸腺

3.2.1Ⅰ组：胸腺皮质淋巴细胞排列紧密，细胞界限清楚，核(N)大，核仁(Nu)明显，异染色质边集成块；胞质少，线粒体(Mi)与粗面内质网(RER)很少；核糖体多，且分布均匀(图5)。

3.2.2Ⅱ与Ⅲ组淋巴细胞超微结构改变相近似：细胞排列松散，形状不规则，界限不清或有突出形成微绒毛，细胞核固缩或变性，核周间隙大(▲)；胞质和细胞器减少，细胞间可见巨噬细胞(图6)。

3.2.3Ⅳ～Ⅶ组均接近正常组，细胞超微结构明显改善，个别细胞核周间隙仍有扩张，并有少数小空泡，或细胞间可见明显的间隙(△)存在。并有较多的母细胞化的细胞与浆细胞出现(图7)。

3.3肾上腺

3.3.1Ⅰ组：皮质囊状束带细胞为多边形；核(N)圆居中；胞质中线粒体(Mi)多，嵴呈管状，可见类脂质颗粒(L)与核糖体；细胞界面有的平整并紧密相连，有的形成微绒毛(Vi)突入细胞间隙中，并与毛细血管间隙相通(图8)。

3.3.2Ⅱ肾阳虚组细胞质和线粒体均较少，其嵴模糊；细胞间隙中可见微绒毛缺乏(▲)(图9)。

3.3.3Ⅲ～Ⅶ组与正常组细胞的超微结构相类似(图10)。

4讨论

4.1本文采用的醋酸氢化可的松肾阳虚证模型，是参照上海第一医学院所创的氢考Ⅱ型模型而建立的^［3］。这种模型是根据临床肾阳虚病人呈肾上腺皮质功能低下，以及临床因治疗需长期大量使用皮质激素的病人，停用激素后表现为肾阳虚等研究结果而设计的，该模型是目前国内使用最多且较为公认的肾阳虚证动物模型。本实验所选用的脾虚证模型，是使用中医大黄以其苦寒泻下，能耗伤元气、亏损阴血、损伤脾胃，使脾失健运、泄泻而致虚，这种方法，是脾虚证模型中研究时间较长，研究者较多，且较为常用的一种造型方法^［4］。

4.2现代免疫学认为，人体免疫功能包括非特异性免疫和特异性免疫，后者又分为细胞免疫和体液免疫。脾脏和胸腺是重要的淋巴器官，是细胞免疫的重要组织结构，其中淋巴组织的正常与否，可直接影响细胞免疫功能。国内外的研究也表明，免疫系统受中枢神经和内分泌系统的调节。中医的“肾”本质上包括了下丘脑-垂体-肾上腺皮质、甲状腺、性腺体功能。组织形态与功能是有相关性的，其中肾上腺皮质的超微结构改变，也能反映肾虚及免疫功能的状况。本实验正是从脾、胸腺与肾上腺等组织形态学的角度，探索其改变与脾虚、肾阳虚及免疫功能的关系。

4.3研究结果表明，肾阳虚、脾虚动物的主要免疫器官脾和胸腺的超微结构均有明显的破坏，尤以肾阳虚证为甚。同步的实验也显示，脾、肾阳虚动物的淋巴细胞转化能力、溶血素生成能力、NK细胞活性，T₃、T₄含量均下降，肾阳虚证动物的血浆皮质酮，睾丸酮含量下降，E₂/T比值升高^［5］。反映了免疫器官和内分泌器官的组织<