Study on Chemical Composition of Catechu (Ⅰ)--
Distinction Between Catechin and Epicatechin by TLC
Yu Jiandong, Wang Gangli, Gao Tianbing, Tian Jingai
(National Institute for the Control of Pharmaceutical and Biological Products, Beijing 100050, P.R.China)
ABSTRACTBoth compositions catechin and epicatechin in Catechu were distinguished by TLC. The mobile phase was n-butanol-acetate acid-water(3∶2∶1). Under above-mentioned condition, catechin and epicatechin could be seperated satisfactorily.
KEY WORDSCatechu; Catechin; Epicatechin; TLC▲
儿茶(Catechu)为传统药物,《中国药典》1995年版一部收载了儿茶为豆科金合欢属植物儿茶树Acaciacatechu(L.)Willd去皮后的枝干煎汁浓缩而成的干燥浸膏[1],《进口药材质量标准》收载的除豆科儿茶外,还有茜草科钩藤属植物儿茶钩藤UncariagambierRoxb.带叶嫩枝煎汁浓缩而成的干燥浸膏,商品称前者为儿茶膏,后者为棕儿茶[2]。其主要成分为儿茶素、表儿茶素和鞣质等。药理研究表明,儿茶素类化合物具有明显的清除体内自由基、阻断N-亚硝基化合物形成、抑制脂氧化酶活性和脂质过氧化物作用,并有防突变、防癌等药理活性。本文采用薄层色谱法,按选定的色谱条件,对儿茶药材中儿茶素(catechin)及表儿茶素(epicatechin)进行了定性鉴别,该法操作简便,分离效果好。
1仪器、试药
纤维素预制板(Merck);儿茶素对照品(纯度>98%)及表儿茶素对照品(纯度96%)(德国Sigma公司);所用试剂均为分析纯。
2实验方法及结果
2.1对照品溶液的制备
取儿茶素和表儿茶素对照品,加甲醇溶解制成0.2mg·ml-1的溶液。
2.2供试品溶液的制备
取儿茶粉末0.5g,加乙醚30ml超声提取10min,滤过,滤液蒸干,残渣用甲醇5ml溶解作为供试品溶液。
2.3薄层色谱
用定量毛细管吸取样品溶液5μl,对照品溶液2μl,分别点于同一纤维素预制板上,以正丁醇-醋酸-水(3∶2∶1)上层液为展开剂,展开,展距为8cm,取出,晾干,用5%硫酸乙醇溶液显色,105℃烘至显色清晰。
2.4结果
在样品与对照品色谱相应的位置上显相同的红色斑点,Rf分别为儿茶素0.62,表儿茶素0.53,对照品与样品色谱图见图1。
图1儿茶薄层色谱图
a供试品溶液b儿茶素对照品c表儿茶素对照品
3讨论
3.1儿茶素、表儿茶素在儿茶中同时存在,而且是同分异构体,很难将二者分离。经查阅多种文献资料,虽然有关于儿茶的薄层色谱方法的报道[3],但都不能将儿茶素和表儿茶素分开,《中国药典》1995年版一部及《进口药质量标准》均未收载儿茶的薄层鉴别方法。现有的药材质量标准中鉴别项为理化反应鉴别儿茶中的鞣质,不能很好地控制药材质量。本文实验中先后采用了硅胶、聚酰胺、纤维素为层析板,并经过多次实验,选定了最佳展开剂配比,使儿茶素、表儿茶素能够得到很好地分离。以纤维素预制板为层析板,对20批儿茶药材(豆科,茜草科)进行薄层层析,表明本方法重现性好,灵敏度高。
3.2供试品溶液制备曾用甲醇直接超声提取,但由于儿茶样品中含有大量鞣质,影响样品的分离,故采用本文提取方法,可排除其它成分的干扰,得到良好的提取效果。
3.3展开剂曾选用氯仿-甲醇(9∶1)、氯仿-甲醇-甲酸(8∶2∶0.08)、氯仿-醋酸乙酯(8∶2)、丙酮-水(7∶3)、正丁醇-醋酸-水(4∶2∶0.5)等,但均不能将儿茶素和表儿茶素斑点分开或斑点拖尾,后采用正丁醇-醋酸-水(3∶2∶1)展开剂可以使儿茶素及表儿茶素得到较好的分离效果,且斑点边缘清晰,无杂质成分干扰。
本项研究由九五国家重点科技攻关项目资助
参考文献
[1]中国药典. 95版. 一部. 1995. 6
[2]陆蕴如. 中药化学. 北京: 学苑出版社. 1997. 135
(19990913收稿)
