【中图分类号】R969.4【文献标识码】C【文章编号】1003-3734(2000)08-0530-03

3临床药代动力学研究

3.1研究目的和一般要求研究的目的是了解新药在人体内的吸收、分布与消除的规律，为制定合理的给药方案提供依据。一般要求作单剂给药的药代动力学。应尽量采用灵敏、专一的检测技术测定药物的血（或尿）浓度。

按给药途径，选择推荐临床治疗用的剂量,确定用药后12～72h内(视具体药物而定)的血药浓度，并计算药代动力学参数。有条件时可研究多次给药后的药代动力学。

对于可供静脉与肌肉两种途径注射的制剂，应分别作两种给药途径的研究。单供肌内注射的制剂，最好能与国外的相同品种药物进行比较，并求出试验药品的相对生物利用度。

对健康受试者的药代动力学研究，需提供以下研究资料：详细的药代动力学研究方法，受试者观察记录表（包括体检表），血（或尿）药浓度测定原始数据及结果，药代动力学计算公式，药代动力学参数（包括C_max，T_max，t_1/2，Vd，K，Cl和AUC）^［3］和对Ⅱ期临床试验给药方案的建议等。

3.2药代动力学研究的实施药代动力学研究的实施，包括生物样本的分析方法，研究设计及具体的规范要求等，与生物利用度研究多有类似之处。

3.2.1受试者的选择一般选择19～40岁的健康志愿者男性，同一批试验受试者的年龄不宜相差10岁。体重为标准体重±10%。标准体重可查表，或用公式计算。标准体重(kg)=：［身高(cm)-80］×0.7或［身高(cm)-170］×0.6+62。

3.2.2取样点取样点的设计对实验结果的可靠性起着十分重要的作用。服药前应取空白血样。一个完整的药-时曲线应包括吸收相、平衡相和消除相。一般在吸收相及平衡相应各有2～3个取样点，消除相内有5～6个以上取样点。整个采样时间至少应为3～5个半衰期，或采样持续到血药浓度为Cmax的1/10～1/20以后。所采血样应尽快分析或立即冷冻、冷藏至分析。 取血期间应充分保证受试者的休息。总取血量不超过300ml。

3.2.3研究过程受试者禁食过夜(10h以上)，于次日早晨空腹服药(用150～250ml温开水送服)。服药1～2h后可定时定量饮水，4h后方允许进统一饮食。受试者服药后，按要求于不同时间取静脉血。服药后应避免剧烈活动，不取卧位（特殊情况除外，如眩晕等）。取血应在有临床监护条件的室内进行。

关于服药后饮水、进餐的时间、量、种类等问题，各试验单位在实际操作中的做法不完全一致，总的原则是：尽可能保持试验条件的均衡性。

我们认为，服药时的饮水量宜相对固定。服药以后的饮水时间可在1h后进行。强调定时定量饮水(如每小时饮水100或200ml)，每一受试者的饮水量可有少量差别，但饮水次数、量应接近。试验期间，不得服用茶、咖啡及饮料等。对口服药物的体内过程有显著影响的果汁饮料如葡萄柚汁(grapefruit juice)，也不得饮用。

进统一饮食问题(主要指试验日的中餐或中、晚餐)，暂时还不太可能做到精确计算食物中各种营养素和热卡等。但应注意，进食的量要适中，宜荤、素搭配，宁清淡而不油腻。进餐的时间，最好在给药后4h(如药物半衰期短，也可在给药后3h)。在用微生物法测定抗菌药物血浓度的试验中，进餐的菜肴中应避免含有大蒜、洋葱、蒜苗等蔬菜，否则可能会改变进餐后所采血样的药物抑菌圈的大小，进而影响试验结果的准确性。

3.2.4临床观察观察受试者用药后发生的不良反应；出现异常情况或不良反应时应采取相应的措施，有关的观察应予以记录。

4生物样品的测定方法

应建立生物样品中药物及其代谢产物的分离方法和灵敏专一的测试技术，同时提供不同的生物样品测定的标准曲线及制备方法，高、中、低3个剂量的回收率，日间、日内变异系数。

4.1灵敏度 用最低限量(limit of quantitation, LOQ)表示。LOQ是标准曲线上的最低浓度，要求至少能检测出3～5个半衰期或能检出C_max的1/10～1/20浓度。

4.2特异性必须证明所测的物质为原型药物或需测的代谢物，内源性物质和相应的代谢物应不得干扰样品的测定。对于色谱法至少要提供空白样本图和用药后的样本图。要做到所测物质与杂质及代谢物基线分离。

4.3精密度用日间和日内相对标准差RSD(即变异系数CV)表示。要求在标准曲线范围内至少选高、中、低3种浓度水平进行方法学精密度研究，并分别接近标准曲线的上限、LOQ附近，另一个为中间浓度。每种浓度水平至少要重复5次以上。

关于RSD，有关的《指导原则》中要求＜10%，但在实际工作中有时不易做到，尤其是浓度在LOQ附近时。可以考虑参照欧美等国的做法，即RSD＜15%，在LOQ附近RSD＜20%。

4.4准确度 用回收率表示。要求用高、中、低3个浓度，每个浓度至少要重复5次。浓度的选择参照生物样品测定方法的精密度项下要求。要求回收率大于70%，达不到要求应说明原因。

4.5标准曲线由5～8个浓度水平组成，应覆盖整个待测的血药浓度范围，不得向两端外推，但也无必要过宽。标准曲线需经统计学分析，如进行相关与回归分析。相关系数要求：色谱法大于0.99，生物法大于0.98。

4.6稳定性应考核药物在标准溶液和生物样品中的稳定性，包括：①在室温中的稳定性，考察的时间应超过采样至冷冻所需要的时间；②样品若需低温贮存，需考察冷冻条件下的稳定性，可将样品分成小份冷冻，每隔一定时间取样分析，确定可保存时间。同一样品需多次分析时，还应考察反复冷冻-融化后的稳定性(至少考察2个周期)。有时还需考察加入稳定剂后药物的稳定性，以及考察样品提取物的稳定性等。

4.7其他指标对免疫分析方法还应着重考察结构相近化合物(如内源性物质、结构相近药物与药物代谢物)的交叉免疫干扰，并尽可能用色谱法核对结果。

5求算药动学参数

将所得的各受试者的血药浓度-时间数据用3P87(或新版3P97)软件在微机上求算药动学参数。t_1/2，C_max，T_max可用模型法求算，对于某些制剂或药物若无合适模型选择，则宜进行非房室模型分析。AUC常采用线性梯形面积法求算，因单剂量给药后无法得到末端t_n～∞的药时曲线，因此需把该曲线的末端外推至时间为∞， 以便计算药-时曲线下总面积，即：

AUC_0～tn＝∑(C_i+C_i-1)(t_i-t_i-1)/2

AUC_tn～∞＝C_n/λ_z

AUC＝AUC_0～tn + AUC_tn～∞

式中C_n和t_n分别为最后一个可测量点的浓度及时间，λ_z为末端相消除速率，通常用末端相血药浓度-时间半对数回归求得。AUC_tn～∞为校正面积，要求(AUC_tn～∞/AUC)×100%＜20%，t_1/2=0.693/λ_z。T_max和C_max则用实测值表示。

6药代动力学研究设计的注意事项

6.1排除影响因素年龄、性别、体重、体表面积、健康状况、活动情况、饮食、环境及遗传因素、昼夜节律等诸多因素都会影响药物的吸收、分布和消除，致药物的体内过程有明显的个体差异。在实验设计和选择受试者时应尽量排除那些可能引起结果明显不同的对象(如年龄差别悬殊，身长过高或过矮，体重过轻或过重等)参加药代动力学试验。

6.2重视预试验在正式试验开始前应在少数对象中进行预试验，对试验条件、剂量大小、试验观察时间、取样频度等作出选择，所绘药-时曲线可作正式试验的参考，在此基础上修改后作为正式试验方案。

6.3试验条件所有受试者应遵循相同的试验条件。如口服给药前的禁食时间、试验期间的进食时间、食物类型、饮水、体力活动程度等均能影响药物的吸收等过程，试验中应对这些影响因素有严格控制。

6.4测定方法在选择测定方法前，必须了解药物的理化性质，如亲脂性或亲水性(以便选择有机溶剂或极性溶剂作提取)，酸碱性(以便在提取前调节到适宜的pH)，挥发性及热稳定性(以便选择测定方法和条件、储存温度及时间等，或判断是否可以用气相或液相色谱法分离测定)，吸收光谱、荧光和电化学性质(以便选择测定方法和高效液相色谱仪上所用的检验手段)等。

6.5统计分析在药代动力学参数计算中，模型的选择是否恰当直接影响结果的准确性。如果把三室模型用二室处理，或把二室模型用一室处理，所求的药物消除半衰期可能明显偏低。但也非房室越多、计算越复杂，所得结果的临床实践意义也越大。虽然药物作为外来化合物很少是单室分布的，但在给出某些特定假设的前提下，用一室模型求得的药动学参数对于估算给药方案、预测人体内血浓变化情况仍有很大参考价值。模型的选择还与取样时间、频度、时间长短等因素有关。同一药物在取样频率高时可表现为<