摘要目的：研究普罗帕酮与美托洛尔两药的相互作用，为临床合理联用提供依据；建立简便、准确的检测方法。方法：采用日本Shimadzu公司的HPLC系统。结果：① 线性范围普罗帕酮和美托洛尔回归方程分别为Y=-1.1242+2.0950X(r=0.9918)，Y=-0.0064+0.2726X(r=0.9978)；② 方法回收率普罗帕酮和美托洛尔日内回收率分别为(99.2±5.6)%和(100.0±1.2)%，日间回收率分别为(97.8±4.7)%和(97.8±4.1)；③ 专一性潘生丁、消心痛、维生素C、维生素E、氮化钾、地高辛、地塞米松等的出峰时间与两药的出峰时间均不重叠。结论：可以用HPLC法简便、准确测定普罗帕酮与美托洛尔的血药浓度，同时处理样本，同一流动相中分离。

SIMUTANEOUS DETERMINATION OF PROPAFENONE

AND METOPROLOL PLAZMA BY HPLC

Wu Youping,Luo Wei

(Department of Cardiology,The first Hospital Affliated

to Jiangxi Medical College, Nanchang 330006)

ABSTRACTOBJECTIVE:A simple and rapid HPLC method for simutaneous determination of propafenone and netoprolol in plazma was established for studying intereactions of the two agents.METHODS:In the study a Shimadzu HPLC is adopted and propanolol is used as internal standard.RESULTS:① The linear limit:The regression equation for propafenone and metoprolo was Y=-1.1242+2.0950X(r=0.9918)and Y=-0.0064+0.2726X(r=0.9978)respectively;② The recovery:The recovery within day for propafenone and metoprolol was (99.2±5.6)% and(100.0±1.2)% respectively;the tecovery between day for propafenone and metoprolol was (97.8±4.7)% and (97.8±4.1)% repectively;③ The sepecificity: The peaks of dipyidamloe,nifedipine, vitamin C and E, KCl,digoxin,and dexamethasone did not overlaped each other.CONCLUSIONS:Plazma level propafenone and metoprolol can be simply, accurately and simutameously determined by the HPLC method established by the authors.

KEY WORDSPropafenone; Metoprolol

美托洛尔与普罗帕酮常合用治疗快速性心律失常。两药的代谢均呈现异喹胍型遗传多戊性分布，体内过程个体差异大，并有相互影响^［1］，故有必要监测血药浓度。以往临床上监测两药浓度及进行药代动力学研究时，需要换流动相及色谱柱，检测过程较繁琐^［2］。本文参照文献3，4，根据本实验室条件，建立了HPLC法用同一流动相分离并测定两药的血药浓度，其检测简捷、准确，减少了两药联合应用时药代动力学测定中的影响因素。

1材料与方法

1.1药品与试剂美托洛尔供试品(阿斯特拉公司)，普罗帕酮及内标普萘洛尔供试品(上海瑞金医院色谱室)。甲醇(分析纯)，乙腈(色谱纯)，三乙胺(分析纯)，磷酸(分析纯)。提取试剂：乙醚、二氯甲烷、氢氧化钠、磷酸均为分析纯。

1.2仪器日本Shimadzu HPLC系统，包括LC-10A泵，SPD-10A紫外检测器，CR-6A数据处理仪，CTO-10A柱温箱等。

1.3色谱条件C₁₈(5μm)150mm×4.6 mm色谱柱，C₁₈保护柱。流动相：甲醇-乙腈-1%三乙胺(50∶7.5∶42.5 )，磷酸调pH至3.2，流速为1.0 ml/min，柱温40℃；普罗帕酮和内标紫外吸收波长为250 nm，美托洛尔的紫外吸收波长为282 nm；普罗帕酮、美托洛尔和内标普萘洛尔保留时间分别为(11.57±0.02)，(4.00±0.02)和(6.10±0.30)min；有效理论塔板数1.0×10⁴，普罗帕酮和美托洛尔血清最低检测限分别为50和10 μg/L。

1.4样本处理取待测血清1.0 ml+内标2 μg+0.5 mol/L NaOH 100 μl，混合后加乙醚与三氯甲烷

(3∶2)的混合液5 ml，旋涡振荡10 min，2000 r/min离心10 min，分取有机层4.5 ml,60℃水浴蒸发至1.0左右，加入0.5 mol/L H₃PO₄ 100 μl，再次振荡10 min反提，蒸发去掉有机层，2000 r/min离心10min，取20 μl H₃PO₄溶液进样。

2分析方法评价

2.1线性范围取6根试管，分别加入混合人血清1.0 ml，普罗帕酮供试液0.05，0.1，0.2，0.5，1.0，2.0 μg，美托洛尔供试液0.01，0.02，0.04，0.08，0.16，0.32 μg及内样液2.0 μg。按上述方法处理样本并依法测定，色谱图见图1。

图1血样本的色谱图

1 美托洛尔2 内标物3普罗帕酮

结果表明，血清样品中普罗帕酮浓度为0.05～2.0 mg/L范围内与供试品对内标物峰面积比值呈良好的线性关系，回归方程为Y=-1.1242+2.0950X,r=0.9918；血清样品美托洛尔浓度在0.01～0.32 mg/L范围内与供试品对内标物峰面积比值普呈良好的线性关系，回归方程为Y=-0.0064+0.2726X,r=0.9979。

2.2回收率的测定

2.2.1日内回收率每管取1.0 ml混合人血清，配成含美托洛尔0.02和0.08 mg/L，含心律平0.2和1.0 mg/L及内标普萘尔2.0 mg/L两种浓度的含药血清各6份，按上法测定，普罗帕酮和美托洛尔的RSD分别为5.6%和1.2%。

2.2.2日间回收率每管取1.0 ml混合人血清，配成含药血清(浓度同日内)各5份，放置于-20℃以下的低温冰箱中，5d内每天提取测定1份，共5次。普罗帕酮和美托洛尔的RSD分别为4.7%和4.1%。

2.3专一性试验将同时服用潘生丁、消心痛、维生素C、维生素E、氯化钾、地高辛、地塞米松等心血管病常用药物的患者血清在同样条件下测定，其出峰时间与美托洛尔、普罗帕酮及内标物的出峰时间不重叠，不干扰美托洛尔与普罗帕酮的测定。

3讨论

本法可减少单测两药时必须更换流动相和色谱柱的操作，并可同时处理样本，便于研究两药合用时的相互作用及临床监测。但浓度较低时，美托洛尔须用荧光检测器检测。

以往单测普罗帕酮时用乙醚提取，本法改用3∶2的乙醚与二氯甲烷混合液提取，不影响普罗帕酮的回收率，因普罗帕酮在乙醚和二氯甲烷中均微溶，且有利于美托洛尔的提取(因美托洛尔溶于二氯甲烷而不于乙醚)。单用二氯甲烷提取时，因二氯甲烷在底层，不便于吸取，而用3∶2乙醚与二氯甲烷混合液时，有机相在上层，便于吸取。

参考文献

1，Wagner F, Kalusche D, Trenk D, et al. Drug interaction between propafenone and metoprotol. Br J Chin Pharmacol, 1987,24 ∶213

2，何国平，黄元铸，马文珠.异丙肾上腺素逆转普罗帕酮的抗室上性心动过速效应.临床心电学杂志，1993，2(2)∶49

3，何洁英，赵香兰.美多心安及α-羟美多心安的药代动力学及在不同肾功能状态下人体的消除.中国临床药理学杂志，1990，6(3)∶165

4，梁民琦，郝久民，夏波杨，等.胺碘酮和心律平的高效液相色谱法分离与测定及其单用与合用时的药代动力学研究.中国临床药理学杂志，1992，8(1)∶19

(收稿：1998-12-08修回：1999-10-15)