摘要目的：采用HPLC法测定氯地滴眼液中氯霉素和地塞米松磷酸钠的含量。方法：色谱分析条件：ODS柱作分析柱，流动相为甲醇/水体系，0～8min使用40%甲醇,8～16min使用60%甲醇，流速1ml/min。0～9min 240nm紫外检测,9～18min 278nm紫外检测。结果：二组分分离良好。各组分线性关系良好，平均回收率氯霉素99.8%(RSD=1.2%,n=5),地塞米松磷酸钠99.4%(RSD=0.7%,n=5)。结论：该法用于氯地滴眼剂含量测定准确、精密、可行。

Simultaneous determination of the contents of chloromycetin and dexamethasone sodium phospate in compound ludi eye drops by HPLC

Huang Chunming(Huang CM),Chen Aihua(Chen AH),Li Puqing(Li PQ)(Changzheng Hospital,the Second Military Medical University,Shanghai 200003)

ABSTRACTOBJECTIVE：To establish a method for the simultaneous determination of chloromycetin and dexamethasone sadium phosphate in compound Ludi eye drops by HPLC.METHODS:The mobile phase consisted of methanol and water 40∶60 for 0～8min and 60∶40 for 8～16min.The flow rate was 1ml/min.An ultraviolet detector was emploged(0～9min,λ=240nm;9～16min,λ=278nm).RESULTS:Both components have good linear relationship.The absolute recovery of chloromycetin and dexamethasone sodium phosphate was 99.8%±1.2% and 99.4%±0.7% respectively.CONCLUSION:This method was accurate for the simultaneous determination of both constituents in compound ludi eye drops.

KEY WORDSHPLC,chloromycetin,dexamethasone sodium phosphate

氯地滴眼剂是我院配制的院内制剂，其含氯霉素0.25%，地塞米松磷酸钠0.05%，具消炎、抗过敏作用。本文以HPLC法同时测定二组分含量。

1仪器与试药

1.1仪器

美国SP8800高效液相色谱仪，UV2000紫外检测器，SP4600积分仪。

1.2药品与试剂

对照品氯霉素、地塞米松磷酸钠(含量99.5%以上)。氯地滴眼液(本院制剂室配制)。甲醇为色谱纯，水为本院制剂室注射用水。

2色谱条件与色谱参数

2.1色谱条件

色谱柱：Lichrosob C₁₈(250mm×4.6mm,5μm);流动相:0～8min,40%甲醇，自8～9min甲醇浓度逐渐升至60%,维持8min,流速1.0ml/min;紫外检测波长:0～8min,240nm,9～16min,278nm。进样10μl。

2.2色谱参数

此条件下，地塞米松磷酸钠塔板数1 000,氯霉素塔板数5 000,二组分分离度＞2。地塞米松磷酸钠保留时间5.5min,氯霉素保留时间13.5min。色谱图见图1。

图1HPLC测定氯地眼药水色谱图

a-地塞米松磷酸钠；b-氯霉素

3方法与结果

3.1线性关系

以50%甲醇制备样品，使样品分别含氯霉素150,200,250,300和350μg/ml,地塞米松磷酸钠30,40,50,60和70μg/ml,10μl进样。峰面积与药物浓度回归得线性方程。氯霉素、地塞米松磷酸钠线性方程分别为：Y₁(μg/ml)=-0.3728+2.490×10^-5X,r=0.9999;Y₂(μg/ml)=0.1896+3.272×10^-5X,r=0.9999。结果表明，氯霉素在150～350μg/ml、地塞米松磷酸钠在30～70μg/ml范围内线性关系良好。

3.2精密度实验

在上述色谱条件下取样品溶液重复进样，测定二组分RSD。氯霉素RSD0.8%(n=5),地塞米松磷酸钠RSD0.7%(n=5)。结果表明本法精密度较好。

3.3回收率实验

精密称取氯霉素、地塞米松磷酸钠，以处方量配制样品，进样测定。得氯霉素、地塞米松磷酸钠回收率分别为99.8%,99.4%,RSD分别为1.2%,0.7%,n=5。

3.4样品测定

精密量取氯地眼药水样品1.0ml于10ml量瓶，以流动相稀释至刻度,10μl进样，测定氯地眼药水中氯霉素，地塞米松磷酸钠含量。批号为970710的氯地眼药水含量测定结果为，氯霉素含量为标示量的95.7%,地塞米松磷酸钠含量为标示量的101.2%。

4讨论

4.1氯地眼药水处方比较简单，仅含氯霉素和地塞米松磷酸钠。曾试用紫外双波长法测定地塞米松磷酸钠含量，地塞米松磷酸钠最大吸收波长240nm,因240nm处氯霉素的吸收很大，而处方中地塞米松磷酸钠量仅为氯霉素量的1/5，故测定的误差很大，放弃了双波长法。

4.2流动相甲醇浓度中途提高，目的是兼顾氯霉素，地塞米松磷酸钠，使二者都有较适合保留时间，较好峰形。不改变甲醇浓度，一直使用40%甲醇为流动相，氯霉素t_R 15.2min,稍长，但峰形尚可，也可接受。对于不能进行梯度洗脱的机器，可以使用40%甲醇为流动相。

4.3地塞米松与地塞米松磷酸钠，因水溶性差别很大，保留时间相去甚远［袁建平，李文德.HPLC法测定眼药水中地塞米松磷酸钠及分解产物.现代应用药学杂志，1995，12(3)∶35.］。本实验中地塞米松磷酸钠出峰在氯霉素之前，而地塞米松出峰远在氯霉素之后，测定中要注意不要混淆了二者。

收稿日期：1998-04-06