摘要目的：研究肾康片的质量标准并控制该制剂的质量。方法：用薄层色谱法鉴别了肾康片中的黄芪、山茱萸、桑寄生及丹参，用薄层色谱法限量检查了该制剂中的乌头碱，用双波长薄层扫描法测定了该制剂中黄芪甲苷的含量。结果：乌头碱限量符合中国药典规定，黄芪甲苷的平均回收率为97.5%，其RSD为1.43%(n=5)。结论：本文的结果显示出这些方法可用于控制该制剂的质量，方法灵敏、简便、专属、准确。

Study on quality standard for Shenkang tablets(Radix astragall,fructus corni,etc.)

Shi Juan(Shi J),Li Yan(Li Y),Chen Huijuan(Chen HJ),et al(Xian Medical University,School of Pharmacy,Xian 710061)

ABSTRACTOBJECTIVE：To study quality standard of shenkang tablets and to control its quality.METHODS:Radix Astragali、Fructus、Corni、Herba Taxilli and Radix Salviae Miltiorrhizae in Shenkang tablets were identified with TLC;The amount of aconitine in Radix Aconiti Lateralis Preparata was also limited with TLC;Astragaloside in Shenkang tablets was determined with Dual Wavelength TLCS.RESULTS:Limit of the amount of aconitine accorded with general rule of Chinese pharmacopoeia.The average recovery of astragaloside was 97.5% with RSD 1.43%(n=5).CONCLUSION:The results show that these methods could be used in controlling quality of Shenkang tablets and these methods are sensitive,simple,specific and accurate.

KEY WORDSShenkang tablets,quality standard,TLC,astragaloside

1仪器与试剂

CS-930薄层扫描仪(日本岛津)；紫外灯(上海顾村电光仪器厂)；微量进样器(上海安亭微量进样器厂)。

黄芪甲苷、熊果酸、槲皮素、原儿茶醛及乌头碱对照品(中国药品生物制品检定所)；肾康片(西安国药厂)；药材(西安市药材公司)。

薄层板制备：取青岛海洋化工厂生产的硅胶G+0.3%CMC-Na(或0.5% NaOH)按1∶3混合研匀，涂布成0.5mm厚的薄层板，阴干,105℃活化1h,置干燥器内备用。

实验所用试剂均为分析纯。

2定性鉴别

2.1黄芪的鉴别：取本品6片，剥去糖衣，研细。照含量测定供试品溶液制备方法制备供试品溶液。另取缺味配制的模拟制剂，同法制备，作为阴性对照溶液。精密称取黄芪甲苷对照品10.14mg,用甲醇溶解并定容至10ml量瓶中，制成每1ml中含1.014mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述溶液各5μl,分别点样于同一硅胶G-0.3% CMC-Na薄层板上，以氯仿-甲醇-水(13∶7∶2)(10℃以下放置过夜)的下层溶液为展开剂，展开，取出，凉干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃烘约5min,供试品色谱中在与对照品色谱相应位置上，日光下显相同的棕褐色斑点，紫外灯(365nm)下显相同的橙黄色荧光斑点，阴性对照无干扰，结果见图1。

图1黄芪TLC图谱

1-阴性对照；2-黄芪甲苷；3-样品

2.2山茱萸的鉴别：取本品6片，剥去糖衣，研细。加乙醚适量，置水浴上回流2h,提取液回收乙醚至干，残留物用石油醚(30～60℃)浸泡2次，每次15ml(约浸泡2min),倾去石油醚，残留物加无水乙醇-氯仿(3∶2)混合液微热使溶解，移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另取缺味配制的模拟制剂，同法制备，作为阴性对照溶液。再取熊果酸对照品，加无水乙醇制成每1ml中含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。吸取供试品溶液、阴性对照溶液各4μl，熊果酸对照品溶液3μl,分别点于同一硅胶G-0.3%CMC-Na薄层板上，以环己烷-氯仿-醋酸乙酯(20∶5∶8)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在110℃烘5～7min,供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上显相同的紫红色斑点，结果见图2

图2山茱萸TLC图谱

1-阴性对照；2-熊果酸；3-样品

2.3桑寄生的鉴别：取本品20片，剥去糖衣，研细。加甲醇-水(1∶1)60ml,加热回流1h,趁热过滤，滤液浓缩至约20ml后，加水10ml稀释，再加稀硫酸约0.5ml,煮沸回流1h后，用醋酸乙酯振摇提取2次，每次30ml,合并乙酸乙酯液，浓缩至约1ml,作为供试品溶液。另取缺味配制的模拟制剂，同法制备，作为阴性对照溶液。再取槲皮素对照品，加醋酸乙酯溶解，制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照溶液。吸取供试品溶液、阴性对照品溶液各6μl,槲皮素对照品溶液5μl,分别点于同一用0.5%NaOH制成的硅胶G薄层板上，以甲苯(水饱和)-醋酸乙酯-甲酸(5∶4∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5% alCl₃乙醇溶液，置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中在与对照品色谱相应位置上显相同的荧光斑点，阴性对照无干扰，结果见图3。

图3桑寄生TLC图谱

1-阴性对照；2-槲皮素；3-样品

2.4丹参的鉴别：取本品30片，剥去糖衣，研细。加70%乙醇60ml,振摇溶解，放置12h,过滤，滤液挥去乙醇，加水适量，用稀HCl调pH为2,用乙酸乙酯萃取4次(15,15,10,10ml),将乙酸乙酯提取液合并，蒸干，残渣用乙醇溶解并定容至2ml,作为供试品溶液。另取缺味配制的模拟制剂，同法制备，作为阴性对照溶液。再取原儿茶醛对照品，用乙醇制成每1ml含1.5mg的溶液作为对照品溶液。吸取供试品溶液、阴性对照溶液各5μl,原儿茶醛对照品溶液1μl，分别点于同一硅胶G-0.3%CMC-Na薄层板上，以氯仿-丙酮-甲酸(8∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2% feCl₃乙醇溶液，热风吹至显色清晰。供试品色谱中在与对照品色谱相应位置上显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰，结果见图4。

3限量检查附子中乌头碱

取本品111片，研细，置具塞锥形瓶中，加乙醚150ml,振摇10min,加氨试液10ml,振摇30min,放置2h,分取醚层，蒸干，加无水乙醇2ml溶解，作为供试品溶液。另取缺味配制的模拟制剂，同法制备，作为阴性对照溶液。再取乌头碱对照品，加无水乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。吸取供试品溶液、阴性对照溶液各6μl,乌头碱对照品溶液5μl,分别点于同一硅胶G-0.3%CMC-Na薄层板上，以苯-醋酸乙酯-二乙胺(7∶2∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾溶液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置显相同颜色的斑点，斑点颜色应浅于对照品斑点，阴性对照无干扰，结果见图5。

图4丹参TLC图谱

1-阴性对照；2-原儿茶醛；3-样品

图5附子TLC图谱

1-阴性对照；2-乌头碱；3-样品

4黄芪甲苷含量测定

4.1色谱条件：硅胶G-0.3% CMC-Na薄层板，展开剂：氯仿-甲醇-水(13∶7∶2)(10℃以下放置过夜)的下层溶液,λ_S=530nm,λ_R=700nm,S_X=3,狭缝宽度1.2×1.2mm²,双波长反射法锯齿扫描。

4.2供试品溶液及对照品溶液的制备：取本品10片，剥去糖衣，精密称定，研匀。取约6片重，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇适量，冷浸过夜，再加适量甲醇，回流4h,提取液浓缩至干，残渣加水10ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇提取3次(20,20,20ml),合并正丁醇提取液，用氨试液提取2次(20,20ml),弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加5ml水使溶解，放冷，通过D₁₀₁型大孔吸附树脂柱(内径1.5cm,长12cm),以水50ml洗脱，弃去水液，再用40%乙醇30ml洗脱，弃去40%乙醇洗脱液，用70%乙醇60ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至2ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。精密称取黄芪甲苷对照品10.14mg,用甲醇溶解并定容至10ml量瓶中，制成每1ml中含1.014mg的溶液，作为对照品溶液。

4.3线性关系考察：精密吸取黄芪甲苷对照品溶液(1.014mg/ml),在同一薄层板上分别点1,2,3,5,7μl,照黄芪鉴别条件展开，显色后，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，照扫描条件扫描测定，以峰面积积分值为纵坐标，以点样量为横坐标绘制标准曲线，得到直线回归方程为:A=5660.99+1918.17c,r=0.9988(n=3)。结果表明：黄芪甲苷在1.014～7.098μg范围内线性关系良好。因线性方程不过原点，故采用外标两点法测定。

4.4精密度试验：在同一块薄层