1实验材料
10μL点样器;硅胶G薄层板[取硅胶G 20g,加0.05%羧甲基纤维素钠水溶液48 mL,研匀铺板];所用试剂均为AR级,胆酸对照品由中国药品生物制品检定所提供,批号078- 9312。
感康片由吉林省江城制药有限责任公司提供,批号:970523,970352,970907,971043,98 1101。
薄层板:10 cm×20 cm硅胶G板,经105 ℃活化1 h备用。
展开剂:异辛烷-正丁醚-冰醋酸(8∶5∶5)。
显色剂:取磷钼酸适量,用乙醇溶解后,配成10%的磷钼酸乙醇溶液(临用前新鲜配制)。
供试品溶液:取感康片1片,研细,加5 mL乙醇溶解,滤过,制成2.0 mg·mL-1的溶 液。
对照品溶液:取胆酸对照品,加乙醇制成2.0 mg·mL-1的溶液。
空白对照品溶液:除去被检物质,以模拟处方,按样品溶液的制备方法制成空白对照品溶液 。
2实验方法
吸取上述供试品溶液、对照品溶液、空白对照品溶液各10μL,点于同一薄层板上,置预先 用展开剂饱和的层析缸中,展开约15cm时,取出,晾干,喷以10%磷钼酸乙醇溶液,于105 ℃干燥5min至斑点显色,清晰。结果,供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点,空白对照品色谱在与对照品色谱相应的位置上无斑点,见图1。
图1薄层色谱图
1.供试品2.对照品3.空白对照
3讨论
3.1展开剂与薄层板的选择在实验中曾选择硅胶GF254板,先用异辛烷-异丙醇-乙酸乙酯-醋酸(40∶20∶10∶10)展开13 cm,吹干,再用氯仿-甲醇-水(6 5∶35∶4)展开6cm,效果较好,但费时,又用硅胶G板,先用乙醚预展开1次,除去板上杂质,异丙醇-醋酸-水(18∶5∶3)作为展开剂,效果较好,这种条件作有关物质检查最佳,作一般鉴别不必要。另在硅胶G板上试展开剂,异辛烷-乙酸乙酯-醋酸(5∶5∶1)效果不佳,最后采用本法,所使用的展开系统得到最佳效果。Rf值也较理想。
3.2温度不同,湿度不同,在用混合溶剂为展开剂时,温度的变化影响到溶剂各成分的挥发性即影响到混合溶剂的组成,因而使Rf值发生改变。
3.3展开槽的形状大小和使用时的饱和程度也影响Rf值,不饱和槽中的Rf值比饱和槽中的大,还易产生边缘效应,因此在操作时应注意,展开槽的形状大小与薄层板的大小应相匹配。这样才不至于影响到展开剂的成分。
3.4经多次实验,本文拟订的薄层色谱方法均有较好的重现性。■
参考文献
1.吉卫药字(1997)号文附发质量标准
2.章育中,郭希圣主编.薄层层析法和薄层扫描法.北京:中国医药科技出版社 ,1990.461
3.中国药典.1995.二部:附录23
4.卫生部部颁标准.WS-132(Z-122)-93
(本文于2000年2月21日修改回)
