摘要从芸香科植物柚(Citrus grandis(L.) Osbeck)的果皮的乙醇提取物中分离得到了7个香豆素类化学成分.经光谱数据及理化性质的分析，分别鉴定为葡萄内酯、异前胡素、marmin acetonide、pranferin、isomerancin、花椒毒酚和伞形花内酯．其中葡萄内酯、marmin acetonide、pranferin及isomerancin为首次从该种植物中分离得到.

分类号R932

Research on the Chemical Constituents of the Coumarins from Citrus grandis Osbeck

Feng Baomin,Pei Yuehu

（Department of Traditional Chinese Medicines, Shenyang Pharmaceutical University,Shenyang 110015）

Abstract7 coumarins were isolated from the ethanol extract of the peels of Citrus grandis Osbeck. The structures of these compounds were identified by the spectroscopic method and physicochemical evidence as aurepten，isoimperatorin，marmin acetonide，pranferin，isomerancin，xanthotoxol and umbelliferone,among which aurepten，marmin acetonide and pranferin were isolated from this plant for the first time.

Key wordsCitrus grandis Osbeck；coumarins；Citrus L.

芸香科植物柚(Citrus grandis(L.) Osbeck)广泛分布于我国广东、广西、福建、台湾、浙江、四川、江西等地．其性味辛、甘、苦、温，具有抗炎、解痉、抗高血压^〔1〕、抗菌^〔2〕等多种活性．由于其广泛而显著的生理活性，我们对其化学成分进行了系统的研究，并从中分离得到了7个香豆素类成分．其中葡萄内酯、marmin acetonide、pranferin及isomerancin首次从该种植物中分离得到．

1仪器与材料

Yanaco显微熔点测定仪（未校正）；Bruker ARX-300型核磁共振仪；所用药材由沈阳药科大学中药系孙启时教授鉴定；薄层色谱用硅胶（10～40 μ）与柱色谱用硅胶（200～300目）均为青岛海洋化工厂生产；试剂规格均为分析纯．

2提取与分离

取干燥柚皮10 kg，粉碎后用工业乙醇回流提取3次，每次3 h．回收乙醇浓缩得乙醇浸膏．将乙醇浸膏依次用石油醚、乙酸乙酯、丙酮超声提取，分为四部分．乙酸乙酯提取部分（50 g)硅胶柱层析以石油醚、丙酮梯度洗脱，重结晶得化合物Ⅰ(120 mg)、Ⅱ(50 mg)、Ⅲ(240 mg)、Ⅳ(160 mg)、Ⅴ(30 mg)、Ⅵ(50 mg)、Ⅶ(20 mg)．

3结果与讨论

化合物Ⅰ：无色针晶，mp 51～54℃(石油醚/丙酮），紫外灯（254 nm)下呈蓝色荧光．¹H-NMR中δ6.24（1H,d,J=9.5 Hz)与7.64（1H,d,J=9.5 Hz)为香豆素母核H-3，H-4的特征信号．¹H-NMR中δ1.60,1.67,1.76(均为3H，s)3个甲基及δ5.08(1H,brs),5.47(1H,brt,J=6.5 Hz)2个烯氢的信号为香叶醇基的特征信号．NOESY谱中δ1.76(9′-CH₃)与4.60(1′-CH₂)相关，说明2′双键为E构型．经与文献^〔3〕中的熔点及光谱数据对照，将化合物Ⅰ鉴定为葡萄内酯．¹H-NMR（CDCl₃,300 MHz)δ：1.60(3H,s,10′-CH₃),1.67(3H,s,8′-CH₃),1.76(3H,s,9′-CH₃),2.09(4H,brs,4′,5′-CH₂-),4.60(2H,d,J=6.5 Hz,1′-CH₂-),5.08(1H,brs,H-6′),5.47(1H,brt,J=6.5 Hz,H-2′),6.24(1H,d,J=9.5 Hz),6.81(1H,s,H-8),6.85(1H,d,J=8.5 Hz,H-6),7.37(1H,d,J=8.5 Hz,H-5),7.64(1H,d,J=9.5Hz).

化合物Ⅱ：无色针晶，mp 102～103℃(石油醚/丙酮）,紫外灯（254 nm)下呈暗斑.¹H-NMR中δ6.27(1H,d,J=9.8 Hz)与8.16(1H,d,J=9.8 Hz)为香豆素母核烯氢的特征信号．δ7.60(1H,d,J=2.3 Hz)与6.96（1H，d,J=2.3 Hz)为呋喃香豆素呋喃环的特征信号，所以推断该化合物为呋喃香豆素．δ1.70(3H,s),1.80(3H,s)两个甲基的信号与δ5.53（1H，t,J=7.0 Hz)的烯氢信号提示有异戊烯基存在．经与文献^〔4〕中异前胡素的熔点及光谱数据对照，基本一致，故鉴定其为异前胡素．¹H-NMR（CDCl₃,300 MHz):δ1.70(3H,s,CH₃),1.80(3H,s,CH₃),4.92(2H,d,J=7.0 Hz,1′—CH₂—),5.53(1H,t,J=7.0 Hz,H-2′),6.27(1H,d,J=9.8 Hz,H-6),6.96(1H,d,J=2.3 Hz,H-3),7.14(1H,s,H-9),7.60(1H,d,J=2.3 Hz,H-2),8.16(1H,d,J=9.8 Hz,H-5)．

化合物Ⅲ：无色针晶，mp 77～78℃(石油醚/丙酮），紫外灯（254 nm)下呈蓝色荧光．¹H-NMR中δ6.24(1H,d,J=9.5 Hz)与7.65(1H,d,J=9.5 Hz)为香豆素母核H-3，H-4的特征信号．δ5.52(1H,brt,J=6.5Hz)的存在说明结构中有单取代的双键，δ1.80(3H,s)为双键上取代的甲基的信号．¹³C-NMR中δ80.0(C-5″)与82.6(C-2″)为连氧碳的信号．δ106.6(C-2″)为缩酮的特征信号，由此推断该化合物中含有缩酮结构.经与文献^〔5〕对照熔点与光谱数据，将化合物Ⅲ鉴定为marmin acetonide．¹H-NMR(CDCl₃,300 MHz):δ1.11(3H,s,CH₃),1.24(3H,s,CH₃),1.31(3H,s,CH₃),1.42(3H,s,CH₃),1.80(3H,s,3′-CH₃)，1.41～1.74(2H,m,5′—CH₂—),2.0～2.38(2H,m,4′—CH₂—),3.66(1H,dd,J=9.5,3.3 Hz,H-2′),4.62(2H,d,J=6.5 Hz,1′—CH₂—),5.52(1H,brt,J=6.5 Hz,H-2′),6.24(1H,d,J=9.5 Hz,H-3),6.82(1H,dd,J=8.6,2.4 Hz,H-6),6.86(1H,d,J=2.4 Hz,H-8),7.37(1H,d,J=8.6 Hz,H-5),7.65(1H,d,J=9.5 Hz,H-4).¹³C-NMR（CDCl₃,75MHz):δ16.7,22.8,25.9,26.7,27.2,28.4,36.5(5个甲基及2个亚甲基），65.2(C-1′),80.0(C-5″),82.6(C-4″),101.4(C-8),106.5(C-2″),112.4(C-4 a),112.8(C-6),113.1(C-3),118.7(C-2′),128.6(C-5),141.5(C-3′),143.4(C-4),155.7(C-7),161.1(C-8 a),161.9(C-2).

化合物Ⅳ：无色针晶，mp 170～172℃(石油醚/丙酮），紫外灯（254 nm）下呈蓝色荧光．¹H-NMR中δ6.25（1H,d,J=9.5Hz）与7.63（1H,d,J=9.5 Hz)为香豆素母核H-3，H-4的特征信号．δ3.94(3H,s)为苯环上取代的甲氧基的信号．δ3.22(1H,dd,J=13.6,8.0 Hz)与2.94(1H,dd,J=13.6,4.7 Hz)为与手性碳相连的亚甲基上偕偶氢的信号，这个亚甲基又与δ4.10(1H,dd,J=8.0,4.7 Hz)偶合，说明结构中存在相连的1个亚甲基和次甲基．¹³C-NMR中δ80.5与81.9为连氧碳，δ106.6为缩酮的特征信号．与文献^〔6〕中熔点数据及光谱数据对照，鉴定该化合物为pranferin．¹H-NMR（CDCl₃,300MHz):δ1.21(3H,s,CH₃),1.27(3H,s,CH₃),1.31(3H,s,CH₃)，1.44(3H,s,CH₃),2.94(1H,dd,J=13.6,4.7 Hz,1′—CH₂—),3.22(1H,dd,J=13.6,8.0 Hz,1′—CH₂—),4.10(1H,dd,J=8.0,4.7 Hz,H-4″),3.94(3H,s,—OCH₃),6.25(1H,d,J=9.5 Hz,H-3),6.87(1H,d,J=8.6 Hz,H-6),7.35(1H,d,J=8.6 Hz,H-5),7.63(1H,d,J=9.5 Hz,H-4)．¹³C-NMR(CDCl₃,75 MHz):δ22.9,23.2,26.1,27.1,28.7(4个甲基及1个亚甲基），56.2(—OCH₃),80.5(C-5″),81.9(C-4″),106.6(C-2″),107.6(C-6),113.0(C-4 a),113.1(C-3),114.9(C-8),127.1(C-5),143.8(C-4),153.3(C-7),160.7(C-8 a),161.0(C-2)．

化合物Ⅴ：无色针晶，mp 60～61℃(石油醚/丙酮），紫外灯（254 nm)下呈蓝色荧光．¹H-NMR中δ6.17(1H,d,J=9.5 Hz)与7.62（1H，d,J=9.5 Hz)为香豆素母核H-3，H-4的特征信号．δ3.85（3H,s)为苯环上取代的甲氧基的信号．δ1.21(6H,d,J=6.9 Hz)与2.82(1H,m,J=6.9 Hz)偶合，说明结构中存在偕二甲基．经与文献^〔7〕对照，鉴定其为isomerancin．¹H-NMR(CDCl₃,300 MHz):δ1.21(6H,d,J=6.9Hz,4′,5′-CH₃),2.82(1H,m,J=6.9 Hz,H-3′),3.83(3H,s,—OCH₃),3.99(2H,s,1′—CH₂—),6.17(1H,d,J=9.5 Hz,H-3),6.83(1H,d,J=8.6 Hz,H-6),7.35(1H,d,J=8.6 Hz,H-5),7.62(1H,d,J=9.5 Hz,H-4)．

化合物Ⅵ：无色针晶，mp 191～192℃(石油醚/丙酮），紫外灯（254 nm)下呈暗斑．FeCl₃反应阳性，说明结构中存在酚羟基．¹H-NMR中δ6.36(1H,d,J=9.6 Hz)与8.06(1 H,d,J=9.6 Hz)为香豆素母核烯氢的特征信号．δ7.01（1H，d,J=2.1 Hz)和7.96(1H,d,J=2.1 Hz)为呋喃香豆素呋喃环上氢的特征信号．经与文献^〔8〕中花椒毒酚的熔点及光谱数据对照，基本一致，故将化合物Ⅵ鉴定为花椒毒酚．¹H-NMR(CDCl₃,300 MHz):6.36(1H,d,J=9.6 Hz,H-6),7.01(1H,d,J=2.1 Hz,H-3),7.96(1H,d,J=2.1 Hz,H-2),7.47(1H,s,H-4),8.06(1H,d,J=9.6 Hz,H-5)．

化合物Ⅶ：无色针晶，mp 225～227℃(水），日光及紫外灯（254 nm)下均呈蓝色荧光．FeCl₃反应阳性，说明结构中有酚羟基存在．¹H-NMR中δ6.15(1H,d,J=9.5 Hz)与7.85(1H,d,J=9.5 Hz)为香豆素母核H-3，H-4的特征信号．δ6.74(1H,d,J=2.3 Hz),6.83(1H,dd,J=8.5,2.3 Hz)和7.50(1H,d,J=8.5 Hz)为苯环上ABX系统，说明羟基可能取代<