关键词： 控释制剂；缓释制剂；生物等效性；生物利用度

摘要本文介绍了控/缓释制剂生物等效性评价的方法、规范和研究进展，重点介绍试验设计、结果表达、统计学处理等方面；讨论了个体生物等效性、药品上市后生物等效性评价等目前尚未解决的问题。

中图分类号R943

控释制剂(controlled-release preparations)和缓释制剂(sustained-release preparations)均属口服长效制剂。近十几年来，控/缓释制剂由于具有给药次数少(方便使用，增加病人依从性)、峰谷浓度波动小(减低毒副作用，改善疗效)越来越引起医药界的重视，其开发研究工作比较活跃。本文作者根据近年来的实际工作，并参考国内外有关文献资料，就药物控/缓释药物制剂生物等效性评价的有关问题作一综述。

1观察对象与方法

1.1受试者受试者一般选用18岁～40岁具有标准身高、体重(±10%)的健康男性，经病史调查，生化、血液、尿液常规检验，胸透、心电图等检查合格，无药物依赖及药物过敏史，无烟酒嗜好。抗肿瘤药及免疫抑制剂等毒副作用较大者，可以动物或相应的病人为受试对象。受试者人数国内规定18～24例，国外多为24例。有人提出确定受试者人数应考虑受试者的个体差异及试验结果统计判断标准，并据此编制成查算表^［1］，可供参考。所有正常受试者均需亲自签署知情同意书，并保证无特殊原因不随意退出试验。知情同意书和试验方案等报医学伦理委员会审批。

单剂量与多剂量试验最好为同一批受试者，以便研究单剂量与多剂量试验中药物体内过程的差别。FDA并不限制健康妇女参加试验。 妇女作为受试者，有助于考察药物体内过程性别上的差别，但同时会给试验带来麻烦，如妇女经期有代谢能力和体液平衡方面的变化，可引起较大的个体差异。

1.2药品与给药剂量通常选择已批准在国内上市的控/缓释制剂作参比药品。若国内外尚无相应的控/缓释制剂，应进行临床验证。参比药品以通过GMP认证、技术力量雄厚、信誉高的大药厂的产品为主。

受试药品必须是中试以上规模生产出来的，国外规定为大于生产批量的10%或10万片(粒) 以上规模的产品，并应附有国家药品检验部门的检验合格报告书。

服药方法及剂量，一般应与推荐到临床上的一致，受试药品与参比药品的使用剂量一般应相等。

如果药物的血药浓度很低，无法找到合适的分析方法，可适当加大剂量，但不应超过临床剂量的高限；如果药物有较明显的不良反应，尤其是胃肠反应影响了口服药物的服用时，应适当减小剂量，或延长多剂量试验时的给药间隔，充分保护受试者的健康。

1.3试验条件设计受试者在试验二周前未使用任何药物。试验期间以及试验开始前、结束后的一定时间内，应限制在Ⅰ期临床试验病房内。医护人员应密切关注受试者的各种反应并详细记录，遇有严重药物不良反应,应按规定报告。试验前1d吃清淡晚餐后禁食12h，于次日早晨7～8时服药，150ml温开水送服，2h后方可统一进标准餐；在连续取血日，4h后统一进标准餐。试验期间内禁止剧烈活动，但也不宜长时间卧床。

试验采用标准的双交叉试验(standard two-treatment,two-peroid,two-sequence crossover design,2×2crossover design)。随机分组应按体重或体表面积等影响较大的因素，将受试者排队编号，然后依据编号分成N/2层次组，然后在每一个层次内随机确定给药序列，并将给药序列相同的受试者归并成一组^［2］。

药物的清洗期(washout period)至少为药物的7个半衰期，以排除交互影响(carry-over effect)。

1.4血样采集参考文献资料，并需要作预试验来确定，其目的是得到一条完整的药-时曲线。

单剂量试验服药前采样一次，服药后取一系列样，一般吸收相和分布相不少于3个点，消除相不少于5个点,整个采样时间不少于药品半衰期的4～6倍，且持续到血药峰浓度的1/10～1/20，AUC_t-∝在AUC_0-∝的20%以下。

多剂量试验参考单剂量的试验结果，必要时可适当调整。在连续服药7个半衰期后，开始取样测定谷浓度，至少3次，判断是否达到了稳态。达稳态后，于末次给药后取一系列样，其中应包括一个相当于给药间隔(τ)时间的样品，便于求算AUC_0-τ 。

1.5药物定量分析药物定量分析方法的建立和认证主要应考虑以下几个问题：选择性、标准曲线与线性范围、灵敏度、回收率、精密度、稳定性等，测定过程中应经常进行质量控制(quality control)。详细内容请见前文^［3］。

对于非单一立体异构体的手性药物，如果异构体之间具有明显的药代动力学或药效学立体选择性，或药代动力学呈非线性动力学过程，则其控/缓释制剂生物等效性评价应采用立体选择性的分析方法，即同时测定各异构体^［4］。

1.6体内外相关性国内要求控/缓释制剂需做体内外相关性研究。体外溶出试验按《中国药典》1995年版方法进行，取样时间应与单剂量体内试验的取血点一致，计算出不同时间的体外溶出百分数。单剂量试验数据如符合或接近一房室模型，用Wagner-Nelson方程计算体内吸收百分数；如符合或接近二房室模型，则用Loo-Reigelman方程计算体内吸收百分数。体外溶出百分数与体内吸收百分数进行最小二乘法线性回归，求得回归系数需经F-检验或t-检验，具有显著性(P＜0.05)说明具有体内外相关性。但是，体内外相关性并不代表体外溶出试验能代替体内吸收试验来评估药品的生物利用度。

1.7试验数据整理^［5］每例受试者的全部体检结果，组间、周期间、序列间身高、体重等方面个体差异分析结果。每例受试者服用受试药品与参比药品后不同时间的血药浓度数据，平均数以几何平均数或中位数表示为好。每例受试者服用受试药品与参比药品后不同时间的血药浓度-时间曲线。所有受试者服用受试药品的血药浓度-时间曲线，服用参比药品的血药浓度-时间曲线(以利于观察个体差异)及相应的平均血药浓度-时间曲线。体内外相关性研究有关的图、表。

1.8药代动力学参数计算一般情况下，控/缓释制剂的体内过程并不符合某种简单的药代动力学模型，使用现有药代动力学程序往往拟合失败，或难以得到有意义的参数；美国药典明确规定直接计算药代动力学参数。T_max、C_max取实测值；C_min一般取最后一次服药前与服药后τ时的血药浓度的平均值;ln C-t最小二乘法直线回归求斜率(即消除速度常数λ_Z)，梯形法或对数梯形法求AUC₀-t；另外：

T_1/2=0.693/λ_Z；AUC_t-∝=C_t/λ_Z；AUC_0-∝=AUC_0-t+AUC_t-∝；C_av=AUC_0-τ/τ

其他参数应尽可能提供。T_max、T_75%Cmax、T_{above Cav}等时间参数分布符合加法模型，平均数用中位数表示为好；C_max、C_min、C_max/AUC、AUC、MAT、MRT等参数分布符合乘法模型，平均数用几何平均数表示为好^［5］。

1.9统计学处理主要药代动力学参数AUC、C_max、T_max、T_1/2等需做三因素方差分析检验，证明两药各参数间差异无显著性(P＞0.05)；AUC还应进行双向单侧t-检验(two one-sided t-tests)，证明受试药品相对参比药品的生物利用度有95%的可信限落在(80%～120%)之间。国外多要求可信限为90%。对治疗指数较小者，应从严掌握。

生物等效性统计方法的最基本假设是实验数据服从或近似服从正态分布，这也是方差分析的前提条件。当AUC、C_max等数据不服从正态分布时，应先做对数变换，再做方差分析和生物等效性检验，此时等效标准为（80%～125%）。双向单侧t-检验为美国FDA推荐的方法，具有计算简便、功效高等优点；另外还可根据第一阶段的试验结果，在考虑试验误差及检验标准的基础上，以试差方法可求得应补充受试者的例数^［1］。当数据偏离严重时，应采用非参数法-双向单侧wilcoxon检验(two one-sided wilcoxon tests)^［5］，其它检验方法参见有关文献^［6］。

2结论与讨论

实验所得参比药品的药代动力学参数与文献报道相比较，有差别应考虑其原因。生物等效的条件：受试药品与参比药品的吸收速度与程度应没有明显差别。如果仅T_max有差别，但没有临床意义，也可以认为具有生物等效性；如果受试品的C_max或C_min与参比药品的相应值差别较大，C_max超过MTC(最小毒性浓度)或C_min低于MEC(最小有效浓度)，则两药不具有生物等效性。

3生物等效