设为首页
加入收藏
求医中医药网
www.qe.cn
站内搜索
1 仪器与方法
仪器：带有紫外检测器的Waters高效液相色谱仪；固定相：Nucl cosil G8 5m g200mm×4mm。流动相：乙腈的pH值为3的0.005M酒石酸盐缓冲溶液。酒石酸盐缓冲溶液由0.01M的1-J基磺酸钠和0.1M的硫酸钠按29:71的比例组成。对照品：单组份胰岛素。流速：1ml/min，进样后，在220nm处，用紫外分光检测器检测20min的液相色谱图。
2 结果
色谱图见图1～4。
图1 牛胰腺提取的胰岛素
图2 单组份胰岛素对照品
图3 猪胰腺提取的胰岛素
图4 猪牛胰岛素混合品
3 讨论
从色谱图上看，牛胰岛素比猪胰岛素的洗脱时间稍短些，这是由于两种胰岛素的结构略有不同，牛胰岛素肽链的8，10位上的氨基酸是丙氨酸和缬氨酸，而猪胰岛素这两位置上的氨基酸是苏氨酸和异亮氨酸，异亮氨酸因为多了一个五甲基，疏水性比缬氨酸稍强些，因此，猪胰岛素在疏水性吸附柱中保留的时间稍长些，苏氨酸除多一个五甲基之外还有一个羟基，疏水性同丙氨酸相近。通过色谱图上出峰时间先后可以判断胰岛素的类型。从色谱图中还可以看到，牛和猪胰腺提取的胰岛素在0～5min之间有一串复杂的吸收峰，这是因为提取出的胰岛素含有一定的杂质所致，这些杂质可导致胰岛素的活性和稳定性的降低，所以，单组份胰岛素的峰值，要比其它三种胰岛素的稍高些。此外，杂质还可引起糖尿病患者的过敏反应，因此在生产过程中要设法尽量减少杂质的含量，以提高药物的疗效。
(2000-03-21收稿)
