1仪器与试药
UV-260紫外分光光度计,叶酸片(北京医科大学实验厂 批号990502 990105 990601),叶酸对照品(中国药品生物制品检定所)
2部标准鉴别方法的改进
取本品细粉适量(约相当于叶酸0.4 mg),加0.4%氢氧化钠溶液5 ml,振摇使叶酸溶解,滤过,取滤液3 ml,用0.4%氢氧化钠溶液稀释成25 ml,自“照叶酸相下”起按部标准鉴别(2)法操作。测定上述3批样品的A256 nm与A365 nm的比值,结果分别为2.9、2.9、2.9。
3部标准法与本法的紫外图谱中辅料影响比较
配制以下3份溶液:(1)取叶酸对照品约4 mg,加20 ml 0.4%氢氧化钠溶液使溶解,吸1 ml加0.4%氢氧化钠溶液稀释至20 ml,待测。(2)取叶酸空白片1片,加20 ml 0.4%氢氧化钠溶液使溶解,过滤,吸取10 ml加0.4%氢氧化钠溶液10 ml稀释,待测。(3)取叶酸空白片1片,加0.4%氢氧化钠溶液10 ml振摇使溶解,滤过,取滤液5 ml,用0.4%氢氧化钠溶液稀释成20 ml,待测。将上述3份溶液分别于250 nm~400 nm范围内进行紫外扫描,结果(见图1)。
图1紫外吸收光谱图
中1,2,3分别代表第一份,第二份,第三份溶液紫外扫描图
4讨论
由于小剂量叶酸片(0.4 mg/片)中辅料所占比例较大,而辅料的A256 nm比A365 nm大,影响了叶酸本身在此处的比值。因此在小剂量叶酸片的鉴别中,套用中国药典中叶酸片(5 mg/片)的标准测定A256 nm与A365 nm的比值,会导致结果偏高,故小剂量叶酸片的鉴别标准不宜完全照搬叶酸片的标准。
参考文献
1中国药典1995年版二部:1995:129
2卫生部部标准(试行)WS-611(X-486)-98
