第二军医大学学报1999年7月第20卷第7期

陈万生樊伟杨根金乔传卓陈海生原源

摘要目的：研究制首乌(Radix Polygonum multiflorum Preparata)的化学成分。方法：应用硅胶柱层析对制首乌氯仿萃取部分中化学成分进行分离纯化，应用理化常数测定和光谱(IR,FAB-MS,EI-MS,¹H-NMR,¹³C-NMR,HMQC,HMBC)分析技术鉴定结构。结果：得到12个单体化合物，确定了其中的7个，分别为大黄素(emodin，Ⅰ)、大黄素甲醚(physcion，Ⅱ)、大黄素-3-乙醚(emodin-3-ether，Ⅲ)、2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖甙(2,3,5,4′-tetrahydroxystilbene-2-O-β-D-glucoside，Ⅳ)、五味子素(schizandrin，Ⅴ)、β-谷甾醇(β-sitosterol，Ⅵ)、胡萝卜甙(β-sitosterol-3-O-β-D-glucopyranoside，Ⅶ)。结论：Ⅲ为新化合物，Ⅴ是首次从蓼属中药中分得。

关键词：制首乌化学成分大黄素-3-乙醚五味子素

何首乌为蓼科植物Polygonum multiflorum Thunb.的块根，因炮制方法不同，有生首乌与制首乌之分。制首乌是取何首乌干燥块根，按照蒸法，清蒸至内外均呈棕褐色，再切片干燥而成^［1］。它是乌须发、悦颜色、补肝肾、养精血、抗衰老的良药。它能保护超氧化物歧化酶，抑制脑中单胺氧化酶的活性，调节免疫系统的功能，并具有明显的降血脂、防治动脉粥样硬化、促进肾上腺皮质功能和保肝等作用^［2］。此外,制首乌尚具有显著改善小鼠学习记忆的功能。

何首乌化学成分主要为二苯乙烯甙类、聚合原花青素类和蒽醌成分等^［3～8］；首乌以制首乌入药，而制首乌化学成分的研究至今未见报道。为了探索加工炮制对首乌化学成分的影响，我们对制首乌的化学成分进行了研究。

1材料和方法

1.1仪器和试剂ZMD83-1型电热熔点测定仪(未校正)；日立275-50红外分析仪；Bruker-spectrospin AC-300P型核磁共振仪；Bruker AMX-400型核磁共振仪;Varian MAT-212型质谱仪；层析用硅胶：青岛海洋化工厂出品的硅胶H(60型)。

1.2提取和分离何首乌采自广东德庆，经本教研室乔传卓教授鉴定为蓼科植物何首乌Polygonum multiflorum Thunb.块根，炮制品按照《中华人民共和国药典》（1995版）一部附录蒸法制备成制首乌。取制首乌17.8 kg，用80%乙醇渗漉提取，浸出液减压浓缩得浸膏，以水混悬，依次用石油醚、氯仿、水饱和正丁醇萃取。氯仿浸膏经反复硅胶柱层析，以石油醚/EtOAc(不同比例)及CHCl₃/CH₃OH(不同比例) 溶剂系统洗脱，共分得12个化合物单体，鉴定了其中的7个，其余化合物正在鉴定之中。

2结果和讨论

2.1化合物Ⅰ的鉴定化合物Ⅰ为桔黄色针状结晶，mp.258～260℃；EI-MS提示相对分子质量为270。¹H-NMR(CDCl₃/d₆-DMSO,δ)：2.45(3H, s，ph-CH₃)； 6.63，7.06，7.26，7.60(4个蒽醌母核上的ph-H,)。¹³C-NMR(CDCl₃/d₆-DMSO,δ)：21.3(6位CH₃)；189.54(9位C=O)，181.16(10位C=O)；107.62，108.88，120.04，123.43(4个蒽醌母核的CH)。其¹H-NMR谱、¹³C-NMR谱、Rf值与大黄素标准品一致，确定为大黄素。

2.2化合物Ⅱ的鉴定化合物Ⅱ为黄色针状结晶，mp.202～204℃；EI-MS提示相对分子质量为284。¹H-NMR(CDCl₃,δ)：2.45(3H，s，ph-CH₃)，3.94(3H，s，OCH₃)，6.69，7.08，7.35，7.63(蒽醌母核上的4个ph-H)。¹³C-NMR(CDCl₃,δ)：21.3(6位CH₃)；55.62(CH₃O)；191.53(9位C=O)，181.08(10位C=O)；113.24，115.95，121.66，124.66(4个蒽醌母核的CH)。其¹H-NMR谱，Rf值与大黄素甲醚标准品一致，确定为大黄素甲醚。

2.3化合物Ⅲ的鉴定化合物Ⅲ为黄色针状结晶，mp.195～196℃。EI-MS提示相对分子质量为298。¹H-NMR(CDCl₃,δ)：2.45 (3H，s，ph-CH₃)，4.37(2H，q，J=10.14 Hz，CH₃CH_2O), 1.43(3H, t, J=10.14 Hz，CH₃CH₂O)，7.10，7.14，7.65，7.66均为间位偶合(蒽醌母核上的4个芳氢)；低场有两个缔合羟基信号: 11.96, 12.22。¹³C-NMR(CDCl₃,δ)：14.16(CH₃CH₂O)；21.3(6位CH₃)；65.58(CH₃CH₂O)；191.53(9位C=O)，181.08(10位C=O)；113.24，115.95，121.66，124.66(4个蒽醌母核的CH)；结合化合物Ⅱ的结构鉴定，确定为大黄素-3-乙醚，为新化合物(图1)。

2.4化合物Ⅳ的鉴定化合物Ⅳ为浅黄色无定形粉末，mp. 184～186℃。¹H-NMR(CD₃OD,δ)：3.24～3.82(6H，m，糖基上的6个H)，4.49(1H，d，J=7.89 Hz，糖上端基H，β构型)；6.24(1H，d，J=2.81 Hz，ph-4-H)，6.61(1H，d，J=2.81Hz，ph-6-H)；6.75(2H，d，J=8.63 Hz，ph-2′-H，ph-6′-H)，7.44(2H，d，J=8.63 Hz，ph-3′-H，ph-5′-H)；6.90(1H，d，J=16.46 Hz)，7.69(1H，d，J=16.46 Hz)为一组双键质子信号，且为反式，分别为β-H和α-H。¹³C-NMR(CD₃OD,δ)：62.1(糖上6位CH₂)，70.8，75.4，77.9，78.2(葡萄糖上2～5位的CH)；108.2(端基C)，116.4，129.2(4个CH，示对取代苯环)；152.0，155.9，158.3(苯环上连有羟基的C)。EI-MS提示甙元相对分子质量为244。结合文献^［3,4］确定该化合物结构为2, 3, 5, 4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖甙。

图 1化合物Ⅲ和Ⅴ的化学结构式

Fig 1The chemical structures of compounds Ⅲ and Ⅴ

2.5化合物Ⅴ的鉴定化合物Ⅴ白色结晶性粉末，mp. 118～119℃。EI-MS提示相对分子质量为432及分子离子脱水峰414。¹H-NMR(CD₃OD,δ)：1.02(3H, d, J=7.2 Hz，CH₃CH)；2.02(1H, m，CH₃CH)；1.42(3H, s，CH₃-C)；3.04（1H，dd，J=13.96, 6.92 Hz，8α-H），2.57（1H，d，J=13.96 Hz，8β-H），2.76（1H，d，J=13.51 Hz, 5α-H），2.61(1H,d,J=13.51 Hz, 5β-H)；3.66～4.07(6个OCH₃)；6.89(s，ph-4-H), 6.94(s，ph-9-H)。同核去偶谱：当照射14-CH₃ 时，7-H由m峰变为dd峰；当照射7-H时，14-CH₃由d峰变为s峰，8α-H 由dd峰变成d峰，说明8-CH₂与7位相连。进一步由¹³C-NMR(CD₃OD,δ)：112.1～153.4（12个C，其中含2个=CH-)，结合¹H-NMR确定为2个苯环上有6个OCH₃取代；73.6(1个C，季碳)；42.3(CH)；36.1，42.6(2个CH₂)。HMBC(CD₃OD,δ)：6.94(4-H)与C4a,C1a,C5相关，说明5-CH₂连于4a位；6.89(9-H)与C8a,C12a,C8相关，说明8-CH₂连于8a位；2.02（7-H）与C8,C6,C5,C8a,C12a相关，8-H与C7,C14,C6,C12a,C8a相关，5-H与C4a,C6,C7,C1a,C13相关，1.02（14-H）与C8,C6相关，1.42(13-H)与C6,C7,C8,C5相关。综合以上推测，结合文献^［9］确定了该化合物的结构，为五味子素。

2.6化合物Ⅵ的鉴定化合物Ⅵ为白色针状结晶，mp.140～142℃。EI-MS,Rf值与β-谷甾醇标准品一致，混合熔点不下降，确定为β-谷甾醇。

2.7化合物Ⅶ的鉴定化合物Ⅶ为白色粉末，mp.287～289℃。水解后检出β-D-葡萄糖和β-谷甾醇。IR(KBr，cm^-1)：3450(OH)；2950，2890(饱和CH)，1 380，1 390(异丙基)。其IR,Rf值与胡萝卜甙标准品一致，与胡萝卜甙标准品混合熔点不下降，确定为胡萝卜甙。

作者从广东德庆产制首乌的氯仿部分中分离得到12个单体化合物，鉴定了其中7个化合物。分别为大黄素(emodin，Ⅰ)、大黄素甲醚(physcion，Ⅱ)、大黄素-3-乙醚(emodin-3-ether，Ⅲ)、2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖甙(2,3,5,4′-tetrahydroxystilbene-2-O-β-D-glucoside，Ⅳ)、五味子素(schizandrin，Ⅴ)、β-谷甾醇(β-sitosterol，Ⅵ)、胡萝卜甙(β-sitosterol-3-O-β-D-glucopyranoside，Ⅶ)。其中，Ⅲ为新化合物，命名为大黄素-3-乙醚;Ⅴ是首次从蓼属中药中分得,为首乌保肝活性成分之一。

参 考 文 献

1中华人民共和国卫生部药典委员会编.《中华人民共和国药典》（1995版）一部，广州：广东科技出版社；北京：化学工业出版社. 1995.150

2邓文龙，龚世蓉. 何首乌研究进展. 中草药, 1987, 18(3):138

3严秀珍. 何首乌中二苯乙烯甙的分离与鉴定. 上海第一医学院学报, 1981, 8(2):123

4Nonaka GI, Miwa N, Nishioka I. Stilbene glycoside gallates and proanthocyanidins from Polygonum multiflorum. Phytochemistry, 1982, 21(2):429