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两株人结直肠癌SCID鼠裸鼠原位移植模型的建立

2022-07-29
来源:求医网
我们在建立了人结肠、直肠癌裸鼠原位移植肝转移模型的基础上,又于1995年10月和12月,分别将1例32岁女性右半结肠鳞状细胞癌和1例47岁男性直肠鳞腺癌手术标本移植于SCID鼠裸鼠结直肠(粘膜层)内,肿瘤原位异体移植和连续传代获得成功,分别命名为HCA-HMN-3和HRA-HMN-4。目前HCA-HMN-3已传至19代,HRA-HMN-4已传至第23代,平均潜伏期为7天,共移植裸鼠147/147只。SCID鼠20只,传代的成活率及液氮冻存复苏成活率均为100%(31/31),两株模型均完整地重现了人结直肠癌患者的临床过程。不仅表现在移植瘤在动物的结直肠粘膜层呈广泛侵袭性原位生长,而且具有血道、淋巴道和种植转移。尸检发现,HCA-HMN-3

移植瘤主要向肠壁深层侵袭性生长,且中央形成溃疡。病理检查证实:该瘤株为一例临床罕见的鳞状细胞癌。HRA-HMN-4移植瘤在直肠粘膜层可见广泛侵袭性局部生长,并可侵透肌层和浆膜,伴有腹部转移、局部淋巴结和肝脏的转移。镜下结构为1例典型的直肠鳞腺癌。淋巴结转移可见结肠上、旁、中间和终末淋巴结、直肠上动脉、肠系膜下动脉及腹主动脉淋巴结。血行转移、肝转移多见于肝右叶,多数动物为肝右叶结节型,少数动物左右肝叶见到多发性转移瘤,有的动物出现肺转移瘤。SCID鼠肿瘤不仅在结直肠粘膜呈广泛的原位生长,还可见淋巴结转移、肝转移,伴有广泛腹腔种植的全腹腔癌病。

超微结构观察HCA-HMN-3癌细胞呈多边形巢状分布,核大,核膜不规则,胞质内可见中等量散在分布的张力原纤维,细胞膜平直,细胞间有少量桥粒,具有典型低分化鳞癌特点。HRA-HMN-4大部分癌组织由鳞癌成分构成,胞质内有丰富的张力原纤维,细胞间可见桥粒,部分癌组织由腺癌成分构成,可见微小腺腔,表面有微绒毛。超微结构观察结果支持病理诊断,并证明原位移植瘤的形态学特点与原始肿瘤完全一致。

流式细胞术检测进一步证明,两株移植瘤和瘤源标本DNA倍性均为超二倍体,染色体分析两株移植瘤亦均为超二倍体,显示人类肿瘤细胞核型,没有鼠染色体混杂。经免疫组化检查分析,移植瘤抗原表型与患者肿瘤抗原表型完全相同,CEA在原位移植瘤、瘤源标本细胞呈全胞浆型阳性。肿瘤相关抗原CEA、CA-50测定,发现两株移植瘤组织CEA平均值为38.6 μg/ml,CA-50平均值为37.4 U/ml;外周血CEA平均值为21.4 μg/ml,CA-50平均值为23.6 U/ml。

研究结果表明,我们所建立的两株人结直肠癌SCID鼠裸鼠原位移植模型,其形态学、生物化学、免疫学及遗传学均保持了人结直肠癌的生物学特性,为进一步开展人结直肠癌的基础研究和实验治疗研究提供了良好动物模型。

本课题受“九五”国家重点攻关项目资助(No.96A230603)

(收稿:1997-11-26)