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材料和方法1.Ro13-7410和RA处理HL-60细胞：Ro13-7410及RA(all-trans-retinoic acid)分别用无水乙醇配成储液，药物组加入不同浓度的Ro13-7410及
RA，对照组加入等体积的溶剂，于给药后不同时间收集细胞测端粒酶活性。
2.端粒酶PCR-ELISA检测：端粒酶PCR-ELISA检测试剂盒购自Boehringer mannheim公司。先将各组细胞制备端粒酶提取液，经逆转录、端粒酶灭活、PCR扩增和Elisa检测，后根据A=1.5A450-A690计算酶活性(A曾称光密度OD)。
3.端粒酶PCR-PAGE检测：采用Onco公司的PCR-PAGE端粒酶检测试剂盒(香港大学医学院生物化学系谭荣安教授惠赠)。各组细胞制备端粒酶提取液，经逆转录、端粒酶灭活、PCR扩增，后将扩增产物行15%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)，EB(溴乙锭)染色，在紫外光下观察相差6bp的阶梯片段。
结果与讨论10-6mol/L Ro13-7410作用HL-60细胞1，3，5天时，用端粒酶PCR-ELISA检测的端粒酶活性分别为0.504，0.392，0.250(A值)，同等浓度的RA作用HL-60细胞5天时，检测的端粒酶活性为0.104(A值)。对照HL-60细胞为0.606(A值)。端粒酶PCR-PAGE检测结果同此结果一致。
端粒酶活性的下降不是Ro13-7410对HL-60细胞产生的直接抑制作用，而是诱导细胞凋亡和分化后自身调控网络变化的结果。在细胞调控网络中，有人认为端粒酶与细胞周期有共同的调节因素，Ro13-7410主要将细胞阻止在G2/M期，且伴有端粒酶活性明显下降，RA在诱导细胞分化时主要将细胞阻止在G0/G1期，也明显抑制了端粒酶活性。这是否是由于细胞受到的调控因素不同而引起的不同变化，还需要进一步研究。
(收稿：1997-10-07修回：1997-11-18)
