血管内皮生长因子（VascularEndothelialGrowthFactor,VEGF）是新近发现的一种内皮 细胞分裂素，具有诱导血管形成和提高微血管渗透力的作用，是重要的肿瘤血管发生调节因 子。我们采用免疫组化ABC方法对食管癌高发区食管癌组织中的VEGF蛋白表达进行研究，探 讨其与食管鳞癌临床病理的关系。

1材料与方法

1.1实验材料

74例食管癌患者来自食管癌高发区河南林州市。男47例，女27例。年龄42～77岁（平均6 1.3岁）。手术切除组织经常规病理学处理。

1.2试剂

Ab－1为兔多克隆抗人VEGF165蛋白抗体，Ab－1为鼠单克隆抗人PCNA蛋白抗体，均为美国 Oncogene公司产品。

1.3免疫组化方法

采用卵白素－生物素－辣根过氧化氢酶复合物（ABC）法。主要步骤见以往报道。VEGF蛋 白阳性表达细胞数大于总细胞数5％时为VEGF阳性表达。用细胞增殖核抗原（PCNA）反映其 增殖状态，当PCNA阳性染色细胞小于总细胞数的25％时定为Ⅰ级，26％～50％定为Ⅱ级，51 ％～75％定为Ⅲ级，＞76％为Ⅳ级。数据结果的统计采用χ2检验。

2结果

2.1VEGF蛋白表达

VEGF蛋白阳性显色为棕黄色，主要为胞浆着色。VEGF阳性细胞分布形式有弥散型、局灶 型、镶嵌型三种，以局灶型为主。强染色的癌细胞多位于癌巢的中央。

2.2VEGF蛋白表达与食管鳞癌临床病理的关系

74例食管鳞癌组织中，VEGF阳性表达为60.8％(45/74)，其中40例食管鳞癌转移组织中阳 性表达率为75％(30/40)，在34例非转移组织中阳性表达率为44.1％(15/34)，两者差异有显 著性意义（P＜0.05）。VEGF阳性表达率与食管鳞癌组织的浸润深度有关，并且随着PCNA标记 指数的增加，VEGF阳性表达率升高明显(P＜0.05)。

2.3VEGF表达的异质性

VEGF在食管鳞癌中的表达存在异质性。在不同标本之间，原发和转移病灶之间以及同一 标本中不同的癌巢内，可出现表达的有和无或强与弱以及分布的差异。

3小结

VEGF是一个分子量为34～45KD的同源双聚体的碱性糖蛋白，由二硫键相连。由于VEGFmRN A不同剪切方式可使其有4种形式，即VEGF121,VEGF165,VEGF189，VEGF206，并在诱导有丝分 裂、增加血管通透性和与肝素的亲合力等方面有差异，但仍然具有相似的生物学功能，即体 外试验可促进内皮细胞增殖和迁移，体内具有血管渗透性。

Maeda等对胃癌中VEGF的研究证实，VEGF阳性表达与胃癌的血管密度、淋巴结转移和肝转 移有关，而且VEGF阳性胃癌患者的预后比VEGF阴性胃癌患者差。Takahashi等研究表明，VEG F是促进结肠癌生长和转移的重要血管源性因子。我们的研究发现，74例食管鳞癌组织中VEG F阳性表达率为60.8％(45/74)，VEGF蛋白阳性表达与食管鳞癌组织的淋巴结转移和浸润有关 ，并且随着PCNA标记指数的增加，VEGF阳性表达率升高明显，这一结果揭示VEGF蛋白参与食 管癌肿瘤细胞的增殖、浸润和转移过程。

现代肿瘤生物学认为，肿瘤生长加快、浸润周围组织和远处转移等生物学现象的出现与 肿瘤细胞的不同亚克隆在侵袭能力、生长速度、对激素的反应、对抗癌药的敏感性等方面的差异—肿瘤异质性（Heterogeneity）有关。产生这种现象的原因是在肿瘤的生长过程中，可能有附加的 基因突变作用于不同的肿瘤细胞，使得肿瘤细胞的亚克隆获得不同的特性。本研究通过对食 管癌高发区食管鳞癌组织中VEGF的研究证实了食管癌肿瘤细胞的异质性。这种现象的本质是 基因的异质性而决定，并受细胞外微环境的影响。了解肿瘤细胞的异质性，对于肿瘤的生物 学研究、病理诊断和临床治疗有很重要的意义。

本文课题受国家自然科学基金资助

收稿1999－03－02