nm23基因是首先作为肿瘤转移抑制基因而被发现，是当今肿瘤侵袭转移研究领域的一个热点。本文着重对nm23在消化道肿瘤转移及预后中的作用进行综述。

1nm23基因的实质及作用机制

nm23为人类正常基因，定位于17号染色体长臂，1988年由美国国立癌症研究所Steeg等采用差别克隆杂交技术从鼠K-1735黑色素瘤细胞系cDNA文库中分离出来的。Leone和Stahi等发现了两个独立存在的人nm23 cDNA克隆，nm23-H₁和nm23-H₂，两者具有88%的同源性。nm23 RNA在低转移潜力的细胞系中的表达强度是在高转移潜力的细胞系中的10倍。转染鼠nm23 cDNA到K-1735黑色素瘤的细胞克隆的表型研究中发现nm23明显抑制了黑色素瘤细胞的癌变过程，包括抑制细胞活性，抑制原位肿瘤的发生，抑制肿瘤转移。这一实验表明，nm23不但有抑制肿瘤转移的作用，也可能部分抑制肿瘤形成过程。nm23基因在进化上非常保守，与国蝇的awd基因高度同源。人类nm23-H₁、nm23-H₂基因分别编码二磷酸核苷激酶(NDPK)的A、B二条链，分子量约为17000kD。

nm23的作用机制包括：①nm23基因通过其蛋白产物NDP激酶在体内参与高能磷酸键的转移，调节细胞内NDP能量池的大小和细胞分裂。②nm23的同源基因awd参与CTP激活蛋白(GTP)的作用，awd的突变或表达下降可导致异常分化、形态异常、广泛畸形及癌变，甚至在前蛹期死亡。③nm23是一种分泌蛋白，具有细胞因子样功能，介导细胞吞噬功能及运动活性，并调节细胞正常发育、分化。④nm23基因蛋白产物含有2～3个亮氨酸拉链样结构，这种拉链样结构引起蛋白质二聚体形成，通过碱性氨基酸的作用，二聚体与DNA结合，进而影响转录过程。

2nm23基因与消化道肿瘤转移、预后的关系

2.1胃癌Ura等^［1］运用免疫组化方法对110例胃癌患者的转移、预后与nm23的相关性进行了研究。结果发现，淋巴结或肝转移的胃癌患者nm23表达水平与无转移的患者相比明显降低，这种情况在分化良好与分化不良的患者之间差异更为显著，但nm23与浸润深度、生长方式或大体类型无相关性；在nm23表达水平增高组，5年累计生存率为72%，降低组仅为45%；通过多变量分析发现，nm23、浸润深度和其他临床病理学指标对患者预后有重要影响。作者等认为，nm23表达程度与胃癌患者转移潜能密切相关，是一个独立的预后指标。Kedera等^［2］运用Northern blot技术，对31例胃癌患者的nm23-H₁mRNA水平测定，结果表明T3、T4期胃癌(TNM分期)的nm23-H₁ mRNA水平较T1、T2期胃癌显著降低(P＜0.01)；有淋巴结转移组的mRNA水平低于无淋巴结转移组(P＜0.05)；分化好的胃癌mRNA水平高于分化差的胃癌；nm23-H₁ mRNA水平低的患者总生存时间缩短，但nm23-H₁ mRNA水平与肝转移和腹膜转移无明显相关性。由此可见，nm23低调节可能在胃癌转移和浸润方面有一定的促进作用，并引起较差的预后。然而，非所有的研究报告均发现了nm23表达与胃癌转移的相关性。Yeung等^［3］运用免疫组化技术对胃癌组织原发灶与转移灶、原发灶与正常胃粘膜的nm23表达水平进行研究发现，nm23表达在胃癌原发灶与正常胃粘膜之间有统计学意义(P=0.024)，而在原发灶与转移灶之间(P=0.25)或转移灶与分化程度之间(P=0.51)并无统计学意义。作者认为，nm23在胃癌的发生发展中起一定的作用，但与转移并无明显相关性。Wang等^［4］应用Wester blot技术对胃癌新鲜切除标本进行研究，发现nm23表达水平高组与nm23表达正常组相比，nm23表达水平高组的远处血行转移发生率高(P=0.0023)，而2年无病生存率较低(P=0.033)，否认nm23在胃癌转移中起抑制作用。

2.2大肠癌Martinez等^［5］应用免疫组化和RT-PCR技术对35例大肠癌患者分别从蛋白质和mRNA水平研究nm23-H₁和nm23-H₂表达。结果表明，肿瘤与相应邻近正常粘膜相比，nm23-H₁和nm23-H₂过度表达，但在进展期大肠癌患者这种过度表达丧失；Ⅰ～Ⅱ期患者nm23-H₁和nm23-H₂表达活性明显高于Ⅲ～Ⅳ期患者。nm23-H₁ mRNA也显示了同样的结果。nm23-H₁和nm23-H₂的过度表达与早期大肠癌相关，而nm23-H₁过度表达的丧失更多见于进展期大肠癌。因此，作者认为，nm23-H₁和nm23-H₂过度表达与大肠癌形成和发展有关，而nm23-H₁的表达下降则是大肠癌的晚期事件。Paluszkiewic等^［6］应用免疫组化对80例结直肠癌的nm23表达进行研究，发现80例结直肠癌患者中58例(72.50%)表达降低，Dukes分期A、B期较C、D期的nm23表达阳性率高，分别为72.50%和15.63%；分化良好者nm23表达阳性率为85.71%，而分化中等及不良者为12.93%。认为nm23在评价结直肠癌转移潜能方面具有一定的价值。Tannapfel等^［7］用同样方法对结直肠癌nm23-H₁蛋白质进行检测，结果nm23-H₁蛋白免疫活性弱、中、强分别占41%、24%和35%，晚期患者nm23-H₁蛋白阳性表达显著降低(P＜0.001)，nm23-H₁免疫活性弱或低的肿瘤较活性强者更易发生淋巴结转移(P＜0.001)，表明nm23-H₁基因表达产物可作为评价和预测结直肠癌分期和淋巴结转移的指标。Berney等^［8］为探讨大肠癌患者nm23的表达与肝转移的关系，对30例大肠癌肝转移患者原发灶和肝转移灶的nm23的表达进行研究，同时测定20例没有转移的大肠癌、20例腺瘤、20例正常结肠粘膜。结果发现，具有转移组结直肠癌患者的原发灶和肝转移灶的nm23的表达与其他组，特别是没有转移组相比明显过度表达(P＜0.001)，nm23免疫活性过度表达与大肠癌患者死亡的高危险有关(P=0.002)。Berney等认为，nm23过度表达与大肠癌患者肝转移和降低的生存率显著相关。但Cheah^［9］和Heys^［10］等研究并没有发现nm23的表达与结直肠癌转移和预后的关系，认为nm23不能作为判断结直肠癌复发、转移和预后的指标。

2.3肝细胞癌Iizuka等^［11］应用定量RT-PCR方法研究了30例肝癌患者的nm23-H₁和nm23-H₂ mRNA水平的变化，结果发现，nm23-H₁ mRNA表达水平与肝内转移和TNM分期呈显著负相关，且nm23-H₁ mRNA的低表达与nm23-H₁蛋白降低的量相一致；nm23-H₂ mRNA与肝内转移无明显相关。Iizuka等认为，nm23-H₁在肝细胞癌肝内转移中比nm23-H₂起着更为重要的作用，可作为预测肝内转移的指标。Boix等^［12］用Northern技术研究nm23-H₁ mRNA表达与单发小肝癌术后肝内复发间关系时发现，10例手术切除后无复发患者(平均随访30个月)中8例nm23-H₁ mRNA水平比正常组织高3～4.5倍，7例复发患者(平均随访2个月)中仅1例高于正常组织(P=0.013)，提示nm23-H₁ mRNA过表达与单发小肝癌术后低复发率相关，nm23可能参与抑制该肿瘤转移扩散。对肝癌组织的免疫组化分析发现，MABnm23-H₁-229和MABnm23-H₂-206在邻近非癌组织及无肝内转移的肿瘤组织中nm23蛋白反应阳性率分别为60%、68%，而伴有肝内转移的MABnm23-H₁-229为阴性。由此得出一个侵袭相关关系，nm23-H₁的免疫活性与肝癌肝内转移相关。NDPK的表达高低与远处器官转移有明显相关性。临床随访nm23-H₁、nm23-H₂蛋白阴性的肝癌患者，生存期均较短，预后差。因此，nm23-H₁、nm23-H₂合并表达可能是肝癌重要的预后指标。

2.4胆囊癌Fujii等^［13］应用免疫组化方法对107例胆囊癌患者nm23蛋白表达进行研究，结果表明：①有、无淋巴结转移的患者nm23表达无明显差异；②nm23蛋白的表达与肿瘤分级或浸润深度无明显相关性；③与位于肿瘤中央的癌细胞相比，癌巢边缘侵犯基质的肿瘤细胞中，58% nm23表达降低，仅有7% nm23免疫活性提高。说明nm23表达可能在抑制胆囊癌局部侵犯起一定作用，但与肿瘤转移能力的丧失无关。

2.5胰腺癌Ohshio等^［14］运用免疫组化分析了73例胰腺导管癌、15例壶腹癌nm23的表达，发现胰腺导管癌的原发灶与区域淋巴结转移灶之间nm23表达无明显差异；nm23表达与55例施行肿瘤切除患者的预后无明显相关性。15例壶腹癌患者nm23表达与区域淋巴结转移无关。作者认为nm23作为肿瘤转移抑制基因在胰腺癌转移过程中并未起重要作用。

3结语

nm23作为一种潜在的肿瘤转移抑制基因，在人类不同肿瘤、不同水平的研究存在差异，其作用有一定程度的组织特异性。nm23的非均一性表达，是否野生型或异构体，还是该基因发生了改变(突变或丢失)，作用机制仍在探讨之中。但无疑对消化道肿瘤nm23基因进行DNA、mRNA及蛋白质水平的研究，不仅有助于肿瘤的诊断及预后判断，而且对肿瘤的转移和侵袭机制及肿瘤基因治疗的研究均有重要意义。

参 考 文 献

1Ura H,Denno R,Hirata K.The significance of nm23 protein expression in human gastric carcinomas.Surg Today,1996,26(12):957.

2Kodera Y,Isobe KI,Yamauchi,et al.Expression of nm23-HIRNA levels in human gastric cancer tissue.Cancer,1994,73(2):259.

3Yeung P,Lee CS,Marr P,Sarris M,et al.Nm23 gene expression in ga