【摘要】目的：研究硫代硫酸钠（STS）是否能在体内、外作为化疗药的辅药。方法：应用MTT法研究STS分别与ADM、MMC和CDDP等6种抗癌单药合用时对BEL－7402和MGc80－3细胞的细胞毒性作用；应用小鼠肝癌腹水瘤(H₂₂)模型判断STS与ADM等3种药合用时的抗癌疗效;20例人原发性肝癌病人肝动脉插管化疗（ADM、MMC和CDDP）前30min静脉推注STS(1.25～2.5g/m²)考察STS作为化疗药辅药的作用。结果：除了CDDP以外，STS(500μg/ml)与ADM等5种抗癌单药合用时对抗癌药的抗肿瘤细胞活性无明显影响(P＞0.05)。当不同剂量STS(350mg/kg、35mg/kg)分别与ADM(6mg/kg)、MMC(1.4mg/kg)和CDDP(45mg/kg)合用或仅这3种化疗药合用时，这3组腹水瘤小鼠的存活期比对照组者显著延长(P＜0.001)，但3组之间无明显区别（P＞0.05)。人肝癌肝动脉插管化疗时，STS与ADM、MMC和CDDP抗癌药合用,肝癌治疗总有效率达60％，且可减少70％病人的恶心、呕吐等副作用。结论：在体内，低浓度的STS(1.25～2.5g/m²)可与ADM，MMC，包括CDDP，等抗癌药合用起抗癌药辅剂作用,且能减轻恶心、呕吐等副作用，特别是采用经皮导管给予化疗药物的方法。

中图号：R969.2文献标识码：A文章编号：1000－467X(1999)03－0288－04

Preliminary pharmacodynamic study of STS as an adjuvant of

the chemotherapy drugs in Vitro and in Vivo

YANG Shan-min, CHEN Fu, ZHENG Yun，et alCancer Research Center, Xiamen University, Xiamen 361005, China

【Abstract】Objective：To study whether sodium thiosulfate (STS) can be used as an adjuvant of the chemotherapy drugs.Methods：The cytotoxicity of STS combined with ADM, MMC, cDDP, 5Fu, MTX and VCR (1× PPC/ml) respectively on the cells of BEL-7402 and mGc80-3 was studied by MTT test in vitro. The ascitic hepatoma (H₂₂) in mice were adopted to determine the anticancer effect of STS adjuvant of ADM、MMC and CDDP. Being treated with STS(1.25～2.5g/m²) 30 min before drug administration,20 patients of hepatocellular carcinoma (HCC) were carried on transcatheter arterial chemoembolization with ADM、MMC and CDDP to observe the adjuvant effect of STS.Results：The anticancer activity of aDM and the other agents respectively adjuvant with STS (500μg/ml) were not obviously influented (P ＞0.05), but that for CDDP was influented . It was proven that the survival time of ascitic hepatoma treated with ADM (6 mg/kg),MMC (1.4 mg/kg) and CDDP (45 mg/kg) alone or three drugs in addition to STS (350 mg/kg,35 mg/kg) respectively was not significantly different (P ＞0.05). The survival time of each groups was significantly longer than that of control group (P＜0.001). It have also been proven that STS adjuvant of ADM, MMC and CDDP was not decreased the chemotherapry effect (RR="60％" ) by transcatheter arterial chemoembolization in HCC, simultaneously it alleviated the nausea and vomiting in 70％ patients.Conclusion：The study provides evidence that in vivo, STS (1.25～2.5 g/m²) can be used as an adjuvant of chemotherapy drugs，such as ADM，MMC, including CDDP, and so on , for decreasing nausea and vomiting effects, espacially for transcatheter chemotherapy .

Key words：Tumor; Sodium thiosulfate; Transcatheter chemotherapy; Adjuvant; Pharmacodynamic; MTT method

采用导管经皮穿刺股动脉到肝固有动脉灌注大剂量化疗药，多以顺氯氨铂为首选药物^〔1〕,它已成为晚期肝癌患者非手术疗法的首选方案。大剂量、多种抗癌药的动脉导管介入可提高疗效,但也使患者产生严重的毒副作用。铂类抗癌药如顺氯氨铂（CDDP）与阿霉素(ADM)、丝裂霉素C(MMC)等药合用时,除引起心脏、肾脏和周围神经等毒性外,常引起胃肠道剧烈反应,如恶心、呕吐等^〔2〕。国外已报告动脉插管用大剂量CDDP，结合STS“双路化疗”1991年国内陈明津等^〔3〕报告治疗晚期肝癌亦取得较好疗效。硫代硫酸钠(STS)会拮抗CDDP抗肿瘤活性，但合理应用能减轻毒副反应。鉴于CDDP常与其他抗癌药联合应用,而STS与CDDP以外的其他抗癌药合用是否有拮抗作用国内外尚未见详细报告^〔4〕。我们应用细胞活性MTT检测法和小鼠肝癌（H₂₂)腹水瘤模型抑瘤实验，研究STS与ADM、MMC、CDDP等6种抗癌药合用的药效学,现报告如下。

1材料和方法

1.1药品与试剂

阿霉素为意大利FarmitaliaCarloErba,丝裂霉素C为日本KYOWA公司,顺氯氨铂为云南个旧生物制药厂,5-氟尿嘧啶(5-FU）为广州明兴制药厂,甲氨喋呤（MTX）为上海第十二制药厂,长春新碱(VCR）为天津和平制药厂，平阳霉素（PYM）为江苏海门制药厂产品。这7种抗癌药均为临床上注射用的针剂,母液按各药血浆峰值浓度的一千倍配制(1000×PPC/ml),-20℃储存备用(保存一周或现配现用)。硫代硫酸钠为上海新亚制药厂产品。3-(4,5)－二甲基-2-唑噻(2.5)-苯基溴化四唑氮蓝(MTT)为Sigma产品,二甲基亚砜(DMSO)为上海金山化工厂产品，RPMI1640为Gibco产品,其他试剂均为分析纯。

1.2方法

1.2.1药物对瘤细胞生长作用的MTT法测定：

按前文献^〔5〕方法培养人肝癌BEL－7402和人胃癌MGc80－3细胞。细胞消化后,活细胞计数以1×10⁴/孔(180μl)接种于96孔培养板,5％CO₂常规细胞培养,次日加入不同浓度STS,终浓度分别为10μg～20000μg/ml,每个浓度设3个样品孔,3天后用光密度比色法(570nm)于DG3022(南京电子管厂)酶标仪上计读^〔5〕。取不同浓度STS分别加入10倍血浆峰值浓度(10×PPC/ml)和1倍血浆峰值浓度(1×PPC/ml)的ADM、MMC、CDDP抗癌单药,作用于培养的两种癌细胞,3天后用MTT法检测。从实验中找出STS与ADM、MMC，特别是CDDP合用后仍有一定（40％）抑癌作用的最佳STS药物浓度(≤500μg/ml)。取STS（终浓度500μg/ml）分别与ADM、MMC、CDDP、5－FU、MTX和VCR(药物终浓度分别为1×PPC/ml)合用,作用于肝癌和胃癌2种癌细胞,依上述法测定OD值,实验各重复三次。

1.2.2小鼠肝癌腹水瘤模型：小鼠腹水型肝癌(H₂₂)(上海药物研究所引进)以1.2×10⁷量接种于5～6周龄BALB/C小鼠(清洁Ⅰ级,抗癌中心医学实验动物室提供)。实验分6组(7只/组,见表1)。次日,抗癌药组按小鼠体重分别从腹腔注入ADM(6mg/kg)、MMC(1.4mg/kg)和CDDP(4.5mg/kg)或卡铂（CAP）(12.5mg/kg);抗癌药与STS合用组的小鼠则提前45分钟从腹腔内分别注射不同浓度的STS(35mg/kg或350mg/kg)后再按上述抗癌药剂量给药,观察计算小鼠存活期。实验重复两次。实验结果和数据采用均数抽样误差t检验处理。

1.2.3肝癌肝动脉栓塞化疗：本组病例共40例性别：男38例,女2例。年龄29～85岁。所有病例经临床生化,B超和CT诊断为无手术指征的中晚期肝癌,其中Ⅱ期27例、Ⅲ期13例。病人肝动脉灌注化疗(部分病例加明胶海棉栓塞)前经肝、肾功能,血像检查,正常者才进行化疗。采用Seldinger技术,经皮股动脉穿刺插管,选择性进入肝固有动脉,碘油造影证实肝肿块充盈,灌注ADM50mg/m²、MMC5mg/m²和CDDP50mg/m²。40例病人随机分成两组：一组在介入化疗前30分钟从静脉推注1.25～2.5g/m2STS;另一组在介入化疗前30分钟肌注灭吐灵(0.4mg/kg)。治疗疗效评判标准参照文献^〔3〕进行。病人发生恶心、呕吐程度的评判标准参照1979年世界卫生组织WHO关于抗癌药毒副反应的分级标准^〔4〕进行。

2结果

2.1瘤细胞数与MTT法测定OD值的关系

BEL-7402和MGc80-3癌细胞在7×10³/孔～5×10⁴/孔时与所测得OD值呈较好得线性关系(资料未显示)。

2.2STS对癌细胞活性的影响

人肝癌BEL－7402和人胃癌MGc80－3细胞以7×10³/孔接种于96孔板培养，次日加入不同浓度STS再培养3天。当STS浓度≤500μg/ml时，STS对两种癌细胞的生长无明显抑制(P＞0.05)（图1）。

图1不同浓度STS对BEL－7402和MGc80－3癌细胞生长的影响

2.3STS与ADM、MMC和CDDP等药合用时对癌细胞的影响

不同浓度STS（1μg/ml～10000μg/ml）分别与ADM、MMC和CDDP(1×PPC/ml、10×PPC/ml)合用对MGc80－3和BEL－7402细胞（7×10³/孔）作用3天后,显示不同程度的生长抑制作用(图2)。在体外,当STS(500μg/ml)，除与CDDP合用<