CSCO2000年第四届学术年会

贾廷珍 严智昌 刘长安 陈旭芳 马力文 张淑兰 李惠平

摘要 目的探讨脐带血临床应用治疗粒细胞减少的可行性。材料和方法 利用流式细胞术检测脐带血中CD34＋细胞和其亚群。利用MTT法检测脐带血中GM-CSF和IL-3水平。通过APAAP方法测定T细胞表型和NK细胞活性。通过双抗夹心酶联免疫吸附实验测定脐带血清中IL-2、SIL-2和TNF。结果 脐血清中IL-2和TNF表达水平低于外周血，SIL-2水平高于外周血。临床配合化疗，41例患者治疗后WBC和ANC水平低于正常值的持续时间明显缩短，感染率低于对照组，生活质量高于对照组。结论 脐带血富含造血干细胞，临床应用有利于骨髓造血功能恢复。

关键词：化疗；放疗；脐带血；CD34；GM-CSF；WBC；ANC

自70年代以来，国外学者对脐血造血干/祖细胞进行了大量的基础与临床研究，已取得丰硕成果。自90年代初，国内学者亦开展了系统研究并显现出其广阔的应用前景。

现将近几年来，我科在脐血方面的基础和临床研究结果做概要汇报，以期得到同道的指教。

一、 脐血造血干/祖细胞量与质的研究

为进一步探讨脐血中造血干/祖细胞生物学特点，为临床应用提供实验依据，本研究采用单克隆抗体技术和流式细胞术检测脐血CD３4＋细胞及其亚群分布。

结果显示，脐血、骨髓和成人外周血中CD３4＋的含量分别为1.44±0.66%；3.50±0.77%；0.179±0.116%。CD３4＋中早期阶段的CD３4＋CD38-亚群脐血为8.34±1.13%，骨髓4.01±0.16%，外周血3.93±0.82%。从而看出，脐血富含造血干/祖细胞，是造血干细胞的一个重要来源。

二、 脐血中造血因子及其活性的研究

采用TF-1细胞的MTT法测定脐血中GM-CSF和IL-3水平并与成人外周血中的GM-CSF和IL-3水平进行比较。

结果表明，脐血清对体外培养的脐血干/祖细胞有促增殖作用；脐血中的造血活性物质主要为IL-3，GM-CSF含量极少。这为临床综合应用脐血提供了重要的科学基础。

三、 脐血中T淋巴细胞表型和NK细胞活性研究

本研究采用APAAP方法和效靶细胞反应测定T细胞表型和NK细胞活性。

结果发现，T细胞中以CD４＋亚群为主，而CD4+/CD45RA+组分占优势，其生物活性低下。CD4+/CD8+比值明显高于成人外周血；脐血中NK细胞数量高于成人外周血，但其活性较低。

上述结果说明，脐血中细胞免疫活性低。这是脐血造血干细胞移植成功的一个重要原因。

四、 脐血清中IL-2，SIL-2R，TNF表达水平的研究

为进一步探讨脐血的某些免疫学特征，采用双抗夹心酶联免疫吸附实验方法测定了脐血清中IL-2、SIL-2R和TNF的表达水平。

结果说明，脐血清中IL-2、TNF表达水平低于成人外周血，而SIL-2R表达水平却高于成人外周血，进而证明脐血细胞的免疫活性低下。这为临床应用脐血提供更多的基础材料。

五、 脐血在肿瘤临床应用的研究

为预防化疗诱发的粒细胞减少症，本研究设立脐血输注组和服用利血生对照组。输注组41名经病理学确诊的肿瘤患者，于化疗末次用药后24~72小时输注脐血，份额不等。对照组在化疗中服用利血生20mg，每日3次。结果令人鼓舞，输注组化疗后WBC、ANC水平低于正常值的持续时间比对照组明显缩短，ANC最低值亦高于对照组，感染率低于对照组，而生活质量优于对照组。

六、 小结

1、 脐血富含造血干/祖细胞，是造血干细胞的一个重要来源；

2、 脐血中富含造血活性物质，其中IL-3水平最高；

3、 脐血中T细胞和NK细胞免疫活性低，这是脐血造血干细胞移植成功的重要原因；

4、 脐血的临床应用说明，脐血输注有利于骨髓造血损伤修复。

综上看来，脐血在临床应用的前景将十分广阔，亦十分诱人。

作者单位：北京大学第三医院肿瘤内科，100083