第三军医大学学报1999年第21卷第12期

于冬梅梁智勇柳凤轩闫晓初刘丽梅

提要目的：检测膀胱移行细胞癌中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达，探讨与膀胱移行细胞癌预后的关系。方法：应用免疫组织化学技术，检测55例膀胱移行细胞癌PCNA的表达。结果：55例膀胱移行细胞癌中，PCNA标记指数随病理分级增高和肿瘤体积增大而增高，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级间均有非常显著差异(P＜0.01)。PCNA标记指数高表达者死亡率明显高于低表达者(P＜0.01)。结论：PCNA是判断膀胱移行细胞癌恶性程度和预后的一个重要标志。

关键词：膀胱移行细胞癌增殖细胞核抗原免疫组织化学

增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)是一个分子量为36×10³u非组蛋白肽，主要在S期合成表达，其表达状况和肿瘤细胞增殖活性相关^［1］。我们应用免疫组织化学技术检测膀胱移行细胞癌PCNA的表达，旨在探讨PCNA在膀胱移行细胞癌中的表达及其与分级及预后关系。

1材料与方法

1.1材料

收集我院1978～1992年间，手术切除膀胱移行细胞癌55例，男44例，女11例，平均年龄54.85岁，随访时间术后1～15年，组织学分级Ⅰ级16例，Ⅱ级20例，Ⅲ级19例。膀胱正常粘膜6例作为对照，标本均经10%福尔马林固定，石蜡包埋，连续切片。

PC10鼠抗人PCNA单克隆抗体及S-P免疫组化染色试剂盒均购自福州迈新公司。

1.2免疫组化染色

采用S-P法，一抗PCNA为即用型，染色设阴性对照，以PBS代替第一抗体，染色阴性，以已知阳性切片作阳性对照。结果判定：连续观察10个高倍视野，统计每个高倍视野100个瘤细胞中的阳性细胞数，取其平均值作为PCNA标记指数(Labeling index,LI)。

1.3统计学分析

所有数据采用单因素方差分析。

2结果

2.1免疫组化结果

PCNA阳性定位于细胞核，阳性显色为棕黄色，见图1、2。6例正常对照组PCNA标记指数为7.5±1.1,55例膀胱移行细胞癌中，Ⅰ级16例，PCNA标记指数为12±2.8，Ⅱ级20例，PCNA标记指数为27±9.9,Ⅲ级19例，PCNA标记指数为52±12，高分化癌的PCNA标记指数明显低于低分化癌(P＜0.01)。

图1膀胱移行细胞癌Ⅱ级PCNA染色阳性(S-P×360)

fig 1Positive expression of PCNA in urinary bladder

transitional cell carcinoma grade Ⅱ(S-P×360)

图2膀胱移行细胞癌Ⅲ级PCNA染色阳性(S-P×360)

fig 2Positive expression of PCNA in urinary bladder

transitional cell carcinoma grade Ⅲ(S-P×360)

2.2PCNA表达与肿瘤大小的关系

55例膀胱移行细胞癌中，肿瘤大于3cm者33例，PCNA标记指数38±19；小于3cm者22例，PCNA标记指数22±16，PCNA标记指数与肿瘤大小呈正相关(P＜0.01)。

2.3PCNA表达与预后的关系

本组55例获得随访结果的膀胱移行细胞癌中，PCNA标记指数复发组与原发组之间比较，复发13例，PCNA标记指数35±21；无复发组42例，PCNA标记指数29±18。统计学处理，无显著差异(P＞0.05)。

PCNA标记指数死亡组与生存组之间比较，死亡组11例，3年以内死亡9例，5年及5～10年以内，死亡各1例，PCNA标记指数为47±18；生存组44例，1年以内1例，1～2年8例，2～3年3例，3～4年7例，4～5年3例，5～10年15例，10年以上健在者7例，PCNA标记指数为27±17。两组间比较有非常显著差异(P＜0.01)。

3讨论

PCNA是近年新出现一种常见的用于病理研究细胞增殖状态的标志物，可作为肿瘤恶性程度和预后的指标^［2］，其合成与表达和细胞增殖周期有密切关系，G₁期PCNA表达逐渐增加，S期达高峰，而G₂期减少^［3］。这表明它的出现与细胞增殖有明显关系，可准确反应细胞增殖状况，预示细胞生物学行为^［4］，目前已广泛用于肿瘤和非肿瘤细胞增殖活性研究。

Waldman等^［5］报道PCNA在估价膀胱移行细胞癌细胞增殖中，其低级、低期时，标记指数也往往是低的。我们对膀胱移行细胞癌55例PCNA表达情况进行研究，结果表明PCNA表达与细胞分化程度及组织学分级相关，显示分化好的膀胱移行细胞癌标记指数明显低于分化差的膀胱移行细胞癌，PCNA表达随组织学分级增高呈上升趋势，膀胱移行细胞癌分级越高，其PCNA标记指数越高，标记指数在病理分级中有非常显著差异(P＜0.01)。

膀胱移行细胞癌的肿瘤大小与PCNA标记指数相关性尚未查到有关报道。本组对肿瘤体积大小进行比较中，我们发现肿瘤体积大的PCNA标记指数明显高于肿瘤体积小的。PCNA标记指数与肿瘤大小呈正相关(P＜0.01)，可用于评估预后。

文献报道^［6］，PCNA对判断膀胱癌预后有重要意义，PCNA增殖程度高者，预后差。我们随访结果表明，PCNA表达与预后相关，PCNA标记指数高者，预后差，死亡率高，而标记指数低者，则预后好，死亡率低，可作为临床判断膀胱移行细胞癌生物学行为及预后参考指标。

作者简介：于冬梅，女，1950.11.18生，山东省青岛市人，硕士，主任医师，主要从事膀胱癌方面的研究，发表论文7篇。电话：(023)68754212

作者单位：第三军医大学附属西南医院病理科，重庆 400038

参考文献

［1］Takanshi H,Strutton G M,Parsons P G.Determination of proliferating fractions in malignant melanomas by anti-PCNA/cyclin monoclonal antibody［J］.Histopatholoy,1991,18(3):221-227.

［2］Mayer A,Takimoto M,Fritz E,et al.The prognostic significance of proliferating cell nuclear antigen,epidermal growth factor receptor,and mdr gene expression in colorectal cancer［J］.Cancer,1993,71(8):2454-2460.

［3］彭万岭，曲孟泰.PCNA在膀胱移行细胞癌的应用意义［J］.国外医学:泌尿系统分册，1995，15(6)：254-257.

［4］Belloso L,Zugasti A,Urkia M,et al.The proliferating unclear fraction as a prognostic factor in superficial bladder carcinomas［J］.Arch ESP Urol,1997,50(8):831-836.

［5］Waldman F M,Carroll P R,Cohen M B,et al.5-Bromodeoxyuridine incorporation and PCNA expression as measures of cell proliferation in transitional cell carcinoma of the urinary bladder［J］.Mod Pathol,1993,6(1):20-24.

［6］徐燕生，王一平，张玉芝，等.膀胱移行细胞癌增殖细胞核抗原(PCNA)的初步研究［J］.中华泌尿外科杂志，1993，14(1)：21-23.