中华耳鼻咽喉科杂志1999年第34卷第5期

郭敏

关键词： 喉癌免疫癌基因抑癌基因生物学行为分期基因治疗

50年来医疗卫生事业的发展,特别是改革开放20年来与国外先进医学接轨后,推动了我国喉癌基础科研的进程。现就喉癌与免疫、喉癌与癌基因和抑癌基因、喉癌的生物学行为以及有关喉癌的基因治疗研究进展情况综合如下。

喉癌与免疫

喉癌患者肿瘤局部和外周血的细胞免疫功能低下。T淋巴细胞及其亚群以及IL-2受体的测定不仅反映机体的免疫状态,也可预测治疗效果和估计预后。喉癌肿瘤组织中经rIL-2激活的肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte,TIL)较末梢血中的淋巴因子激活的杀伤细胞(lymphokine activated killer cell,LAK细胞)具有明显的自体肿瘤杀伤活性。但TIL不易获得,采用TIL/IL-2的过继免疫疗法不但在技术上较困难,费用也昂贵。而区域性非转移淋巴结淋巴细胞(tumor draining lymph node lymphocyte,TdLNL)可自颈廓清手术中获得,易于扩增和保存,经IL-2激活后具有抗肿瘤活性。经动物实验表明,与对照组人喉鳞癌荷瘤裸鼠相比,具有抑瘤作用。实验还证明TdLNL经IL-2激活后,注射于肿瘤局部可抑制裸鼠皮下移植瘤生长,为肿瘤局部进行过继免疫治疗提供了实验研究的依据。

癌基因抑癌基因及HPV与喉癌

已证实喉癌的发生发展与Ha-ras、myc、C-erbB-2基因的扩增和过度表达以及抑癌基因p53、p16的失活有关。喉癌组织ras基因产物P21表达水平较癌旁正常组织及喉乳头状瘤显著增高。对喉癌行DNA pCR产物斑点杂交实验表明,Ha-ras基因第12密码子G-T突变率为30%,均为Jakobsson恶性分级高分组的患者。p16基因定位人染色体9p21上,是一种细胞周期调控蛋白,能抑制CDK4/Cyclin d复合物的活性,从而抑制细胞进入S期,为细胞周期阴性调节因子,在晚期喉癌中发生突变而过量表达。在一组声门上喉癌的检测结果中发现,癌原发灶P16蛋白表达阳性率为54.9%(45/82),无淋巴结转移者P16蛋白阳性表达率明显高于有淋巴结转移者。另一组喉癌组织中P16阳性表达率为48%,其中Ⅰ、Ⅱ期喉癌P16阳性表达率高于Ⅲ、Ⅳ期喉癌患者;分化好的肿瘤P16蛋白表达率高于分化差的肿瘤。

C-myc基因定位于人染色体8q24上,具有DNA结合能力,能诱导细胞的长期存活。对喉鳞癌组织的检测结果表明:C-myc蛋白阳性表达率为57.4%,且临床分期越晚，肿瘤分化程度越差,患者伴有颈淋巴结转移者,其C-myc阳性表达率越高,提示C-myc癌基因的扩增与p16抑癌基因的失活与喉鳞癌的发生发展有关。p53为恶性肿瘤中常见的畸变型抑癌基因,与细胞周期调控、DNA修复和细胞编码程序死亡有关。仅从1996年全国耳鼻咽喉科学术会议中交流的10余篇论文中所报道的总数为367例喉鳞癌组织中检测出突变型p53表达的阳性率为52%～73%,其表达水平与增殖细胞核抗原(PCNA)的表达呈明显正相关,且随临床分期的增加、肿瘤分化程度的降低、颈淋巴结转移的出现而呈现出升高的趋势。喉乳头状瘤、喉部非典型增生病变以及原位癌也出现的P53过度表达,表明抑癌基因P53突变在喉组织癌变中的作用。

采用免疫组化、分子杂交技术对转化生长因子α(TGF-α)、表皮生长因子(EGF)及表皮生长因子受体(EGFR)的检测也证实在喉癌组织中有TGF-α及EGF mRNA的表达。

对人乳头状瘤病毒(HPV16，18)与喉癌发生有关,也有多篇报道,且与C-myc扩增有一定相关性。

喉癌的生物学行为与生物学分期

对喉癌切除的标本进行病理组织学连续切片的研究总数已超过500例,发现了不同类型喉癌的局部扩散特点,并结合临床长期随访发现了影响喉癌患者生存期的因素,除患者接受治疗时病变为早期或晚期以外,尚有下列因素,即:①患者有淋巴结转移,转移淋巴结有被膜外扩散者,预后较差;②肿瘤呈浸润性生长及大体标本为溃疡型者,预后较差;③流式细胞仪检测肿瘤细胞核DNA, d1值高者属多倍体肿瘤,其预后较二倍体肿瘤的患者为差，但复发癌有反常的表现;④喉癌雌激素受体阴性者，预后较差;⑤属同一分期、同一病理分化程度,临床转归并不相同,在Ⅳ期病例中p53表达增高者、EGFR阳性表达和高表达者、CD44H低表达者,预后较差,且Cyclin d1过度表达可能是易于复发的信号;⑥第二重复癌的发生及远隔转移影响喉癌患者的长期存活。

目前的研究还表明,采用PCR方法对肿瘤切缘进行p53、PCNA等的检测,较病理切片检查更精确确定安全切缘。虽然喉癌患者UICC分期和肿瘤组织中p53、EGFR的表达与预后相关,Cyclin d1与肿瘤复发有关,在一定程度上反映了喉癌的生物学行为,但仍需进一步研究以确定其在喉癌生物学分期中的意义。

喉癌与基因治疗

虽然采用外科手术、放射治疗可以治愈一些喉癌患者,采用同期放射和化学治疗可使一小部分晚期或复发病例延长存活期或挽救生命,但仍有30%～40%的喉癌患者死于复发或远处转移。我国在喉癌的基因治疗方面尚处于萌芽状态,进行了用反转录病毒介导生型p53基因诱发人喉癌细胞凋亡的实验研究,并成功的建立了人喉鳞癌裸鼠移植瘤系,这些均有助于进一步推动喉癌基因治疗的研究,并将为开辟新的治疗喉癌的方法提供实验室的依据。

回顾我国有关喉癌基础研究的进展,应当指出的是:由于条件限制等尚不能满足喉癌基础科研的需要,创新性和指导临床治疗的基础科研亦不多,这是需要继续努力加以充实的领域。

作者单位:100034北京医科大学第一临床学院耳鼻咽喉科