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人血液不同成份吸收光谱探讨

2022-07-29
来源:求医网
摘要目的人血液不同成份的吸收光谱不一。在激光照射血液疗法中,选择最佳波长进行研究。方法用752C紫外可见分光光度计进行人血液不同成份吸收光谱的测试。结果

血清、血浆、血红蛋白、白蛋白、红细胞、淋巴细胞、血小板的吸收光谱各有差异,吸收峰值位置亦不一致。 各成份在200~300 nm的紫外部分吸收率最高,在红外部份吸收率最低,并逐渐下降。结论为激光照射血液治疗疾病提供激光波长选择的依据。

中图号R318.03;R331.11

Absorption Spectrum of Blood components in Man Lin Shangzhong,Chen Rong,Xu Shaofeng.Fujian

people's Hosptal,Fuzhou,350004

AbstractObjectiveAbsorption spectrum of human blood components is distinctive.In the blood irradiation

therapy,the study aimed at appropriate wavelength.MethodsThe absorption spectrum in different components

of human beings were measured by 752C UV-VIS spectrophotometer.ResultsAbsorption spectrum of serum,

plasma, hemoglobin, albumin,erythrocytes,lymphocytes,platelet were different, and so were the stations of their

peak absorption value.All the maximal absorption was in the range of 200~300nm by ultraviolet wavelength,

and all the absorbances fell down to the minimum within infrared range.ConclusionThe findings will provide

helpful bases for the blood irradiation wavelength in treatment of human diseases.

Key wordsblood;lasers/ther use;spectrum analysis;spectrophotometry,infrared;spectrophotometry,

ultraviolet

近年来,激光照射血液治疗方法在国内外逐步应用于临床,对治疗疾病具有一定效果〔1〕

但国内外学术界认为对其基础性研究感有不足,应予加强〔2〕。据此作者针对人血液不同成份对不同波长光的吸收特性这一重要问题进行了探讨。

材 料 与 方 法

一、材料

1.标本来源 ①正常人的血液。②福州市中心血站分离的血小板悬液。

2.试剂①260 g/L Na2SO4:无水Na2SO426 g加适量蒸馏水溶解后再加蒸馏水至100 ml。

②Hank's液。③淋巴细胞分离液(上海荣盛生物试剂厂)。④血小板分离液(上海血液中心)。

⑤肝素抗凝剂。

3.仪器 752C紫外可见分光光度计(上海第三分析仪器厂。光源:12V30W钨卤素灯、氘灯。有关参数:波长精度±1 nm,波长重复性0.5 nm,吸光度精度±0.0004 nm,光度范围-0.03~0.3 nm,最小分辨率0.0001 nm)。仪器经国家法定计量单位确认合格。

二、方法

1.分离血清,用生理盐水稀释。

2.血液加少量肝素抗凝,分离血浆,用生理盐水稀释。

3.从肝素抗凝血中取红细胞少许加到5 g/L盐水溶液中溶血,离心,吸取上层液,即为血红蛋白溶液。

4.吸取血清0.6 ml,加260 g/L Na2SO4 5.4 ml,混匀,加乙醚2.0 ml,颠倒40次,低速离心

3分钟,吸取下层清晰的白蛋白液。

5.将肝素抗凝血离心,吸取管底红细胞,用生理盐水洗涤3次,制成红细胞生理盐水悬液。

6.Hank's液2份,加入肝素抗凝血液1份,混匀,用淋巴细胞分离液以密度梯度离心法,分离出淋巴细胞,用生理盐水洗涤3次。

7.血小板悬液,用血小板分离液稀释。

血清、血浆、红细胞悬液、淋巴细胞悬液以生理盐水调零;血红蛋白液以5 g/L盐水溶液调零;白蛋白溶液以260 g/L Na2SO4溶液调零;血小板悬液以血小板分离液调零;用10 mm光径石英比色杯,在波长200 nm至800 nm之间,每隔5 nm读取吸光度。分别绘制吸收光谱曲线。

结 果

经测试获得七条吸收光谱曲线,分别对应血清、血浆、血红蛋白、白蛋白、红细胞、淋巴细胞、血小板的吸收光谱(见附图)。从①~⑦的光谱曲线可知,血清吸收峰在220nm、

300 nm、415 nm处;血浆吸收峰在220 nm、300 nm、425 nm处;血红蛋白的吸收峰在215nm、

275 nm、350 nm、415 nm、540 nm处;白蛋白的吸收峰在210 nm、232 nm、280 nm处;在波长大于350 nm处吸收率很低;红细胞的吸收峰在210 nm、275 nm、340 nm、415 nm、540nm、

575nm处;淋巴细胞的吸收峰在215 nm处;血小板的吸收峰在240 nm、290 nm处,各组份吸收率在紫外部分200 nm~300 nm处最高,在红外部分最低,并逐渐下降。

附图血清①、血浆②、血红蛋白③、白蛋白④、红细胞⑤、淋巴细胞⑥、血小板⑦的吸收光谱曲线

讨 论

一、有报道〔1〕激光照射血液治疗可抗缺氧,纠正脂代谢异常,对血液流变学性质、血液的力学和微循环有改善作用,对机体免疫功能有调节作用等。上述变化应与血液中红细胞、血红蛋白、血小板、淋巴细胞等成份吸收激光照射的能量有关。人血液中不同成份的吸收光谱曲线有差异,吸收峰位置亦不同;因此在激光照射血液疗法时,选择不同波长的激光治疗不同类型的疾病,使相应的细胞或生物分子活化,对提高疗效应是有利的。

二、测定结果显示血液中不同成份均在紫外部分200 nm~300 nm处吸收率最高,在红外部分吸收率最低,并呈现逐渐下降趋势。据此可见如激光波长在上述紫外部分时,则可同时活化血液中多种成份,且其吸收率强,故所给的激光剂量应减小,选择应慎重。

三、根据获得的人血液不同成份的吸收光谱不一,因之在光照射血液疗法选择最佳波长的研究中,设想应对下述具有不同波长的激光器的作用进行探索以有利于该疗法的提高和发展。

如:铜蒸气激光器(578 nm),He-Ne激光器(543 nm),He-Cd激光器(537 nm、325 nm),Nd: YAG激光器倍频输出(532 nm),Kr+激光器(406.7 nm、413 nm、415 nm),N2激光器(337.1 nm),准分子激光器KrF(248 nm)、KrF(193 nm)等。

四、实验过程使用肝素为抗凝剂,有报道〔3〕肝素抗凝剂基本不影响血液成份对激光的吸收特性。

五、激光照射血液疗法在医学上的应用已获可喜结果,但激光照射血液疗法的研究则处于初始阶段。上述实验与讨论,为激光照射人体血液疗法的研究提供了有益的参考。

本文为福建省自然科学基金资助项目

参 考 文 献

1 董为人,王东海.低能量激光血管内照射复合治疗糖尿病性血管病变.应用激光,

1992,12(5):234-236.

2全国激光医学会低强度激光血管内照射治疗专题研讨会会议记要.中国激光医学杂志,

1995,4(2):68-70.

3 Rong C,Shaofeng X,Liting L,et al.Study on the blood absorption spectrum of human beings and animals

sPIE,1996, 2887:133-139.

(收稿 1997-07-17 修回 1997-12-18)