为了解引起Vero细胞病变的毒素（VT）的大肠埃希菌（VTEC)。在我国人群中的感染状况，我们对1997年1 512例急性腹泻患者进行了VTEC的检测及流行病学分析，现报道如下。

一、材料与方法

1.标本来源：我院门诊患者的急性腹泻粪便标本。

2.培养基：SS琼脂本室自制，山梨醇麦康凯(SMAC)、伊红美蓝(EMB)琼脂购自上海市卫生防疫站，胰酶大豆肉汤培基为法国梅里埃公司产品。

3.诊断试剂：SPA-抗O157试剂本室制备，抗O157乳胶试剂Oxoid公司生产。

4.Vero细胞：从我院病毒室引进。

5.分离鉴定方法：将患者粪便分别接种SS、SMAC、EMB琼脂平板，同时置37℃18～24小时培养后，先按常规法对腹泻病原菌进行检测，检测阴性者再做如下试验。

EHEC O157血清型的鉴定：从SMAC琼脂平板上挑选不发酵山梨醇的菌落，用抗O157的SPA及乳胶试剂做玻片法凝集试验，如为阳性再做生化、PCR、Vero细胞毒等试验进一步鉴定。

Vero细胞毒测定：将从EMB平板分离的大肠埃希菌接种于20 ml胰酶大豆肉汤中，37℃振荡培养16～18小时，离心弃上清液，将沉淀物用pH 7.2 PBS洗两遍，将沉淀物悬浮于1 ml(0.1 mg/ml)的多粘菌素B溶液中，放37℃水浴作用30分钟，离心，取上清液通过0.22 μm滤膜过滤除菌后，将此无菌滤液按常规法做Vero细胞毒的定性及定量试验，并用O157∶H7 91-29-81(由日本国大阪市公共卫生和环境科学研究所西川桢一先生提供)，标准大肠埃希菌ATCC 25922分别作阳性和阴性对照。

二、结果与讨论

VTEC是近些年确认的一组重要的致泻病原菌，也是出血性结肠炎和溶血性尿毒综合征的重要病因，我们从1 512例腹泻患者粪便中虽未分离到EHEC O157∶H7，但从分离到的483株大肠埃希菌中，经Vero细胞毒测定，有57株在37℃ 5% CO₂环境中72小时内能使Vero细胞发生溶解、变性、坏死等病变，其多粘菌素细胞裂解物的CD50在4×10²～5×10³/ml之间，故将此57株大肠埃希菌定为VTEC，检出率为3.7%，与国外报道^［1］3.1%相近似，显示非出血性肠炎，且也无HUS的散发VTEC感染是十分常见的，因此应在腹泻病原菌培养阴性病例中注意VTEC的分离鉴定。

我国目前还未见有EHEC O157∶H7暴发感染报道，但从世界流行情况^［2］分析基本上是先散发病例，继而小型暴发，然后才有可能暴发流行，日本和美国的情况就是典型例子，因此我们对EHEC O157∶H7应给予足够的重视加强监测力度，另外结果显示VTEC在急性腹泻患者中也占有一定比例，因此不可忽视对VTEC感染问题的研究。

本研究课题为国家自然科学基金资助项目(编号：39670563)

参考文献

[1]Pai CH, Ahmed N, Lior H, et al. Epidemiology of sporadic diarrhea due to verocytotoxin-producing escherichia coli: A two-year prospective study. J Infect Dis, 1998,157:1054.

[2]Fcng P. Escherichia coli serotype O157:H7. Em Inf Dis, 1995,1:47.

(收稿：1999-04-21修回：1999-07-20)