一、材料与方法
1.菌株:62株致病性弧菌分离于本院1997年5月至10月肠道门诊176例急性腹泻患者粪便中。质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922和金黄色葡萄球菌ATCC29213。
2.培养基:Mueller-Hinton肉汤、碱性蛋白胨水、TCBS琼脂、4号琼脂和麦康凯琼脂等,由浙江省军区后勤部卫生防疫检验所生产。
3.抗生素:庆大霉素、阿米卡星、氯霉素、头孢噻肟、氨苄西林、头孢唑啉、头孢哌酮等为中国药品生物制品检定所生产的标准品或对照品;头孢三嗪、头孢唑肟、拉氧头孢、氨曲南以及亚胺配能分别为英国葛兰素制药厂、日本藤泽药品工业株式会社、中国海南省海灵制药厂、中美上海施贵宝制药有限公司和美国默沙东药厂产品;诺氟沙星、氧氟沙星和环丙沙星分别为浙江新昌制药厂、上海昆山制药厂和徐州制药厂提供的纯品。
4.最低抑菌浓度测定板:本室自制[1]。
5.菌株分离鉴定:将碱性蛋白胨水和分离培养基(4号琼脂、TCBS琼脂和麦康凯琼脂)接种标本后,置37℃孵育18~24小时。挑选可疑菌落做氧化酶试验和OF试验,并与O1群霍乱弧菌多价血清做凝集试验,排除O1群霍乱弧菌后,挑选可疑菌落传种到营养琼脂上,37℃孵育18~24小时,按文献[2]进行系统生化鉴定。
6.最抵抑菌浓度(MIC)测定:采用微量肉汤稀释法。根据测定结果分别计算各种抗生素对致病性弧菌的MIC50和MIC90值,并根据临界浓度计算敏感率。
二、结果
1.致病性弧菌检出情况:从176份肠道门诊急性腹泻患者粪便中共检出致病性弧菌11种,计62株。检出的62株弧菌中,以弧菌属最多,7种44株,占71%,其次为气单胞菌属17株,占27.4%,邻单胞菌属1株,占1.6%。44株弧菌属菌包括副溶血弧菌23株、海鱼弧菌8株、非O1群霍乱弧菌4株、霍利斯弧菌4株、河弧菌3株、溶藻弧菌1株、致伤弧菌1株。17株气单胞菌属菌包括温和气单胞菌12株、嗜水气单胞菌4株、豚鼠气单胞菌1株。
2.对抗生素敏感性:62株致病性弧菌对氨苄西林和头孢唑啉敏感率较低,分别为8.1%和37.1%,对氨曲南、庆大霉素、阿米卡星、头孢唑肟、头孢哌酮、头孢三嗪、头孢噻肟、拉氧头孢等敏感率在85.5%~88.7%之间。亚胺配能、氧氟沙星、环丙沙星、诺氟沙星、氯霉素等对受试弧菌抗菌活性强,敏感率大于91%。其中环丙沙星抗菌活性最强,90%受试菌MIC为0.5μg/ml。嗜水气单胞菌较其他弧菌对试验抗生素敏感率低。除温和气单菌有5株(41.7%)对氨苄西林敏感外,其余菌株对氨苄西林均不敏感。3株河弧菌和4株嗜水气单胞菌对头孢唑啉全部耐药。分离率最高的副溶血弧菌对头孢唑啉敏感率为17.4%,而对其余抗生素敏感率均大于87%。
三、小结
15种常用抗生素对62株致病性弧菌体外抗菌活性测定结果表明:氨苄西林和头孢唑啉对受试菌抗菌活性差,敏感率分别仅为8.1%和37.1%。受试菌对亚胺配能、氯霉素、氧氟沙星、环丙沙星、诺氟沙星等药物的敏感率高,大于91%;对其他β-内酰胺类和氨基糖甙类抗生素敏感率相近,在85.5%~88.7%之间。提示肠道门诊医生对怀疑由这类菌引起感染的病人进行经验治疗时,不应首选氨苄西林和头孢唑啉,可选择抗菌活性好、敏感率高的氟喹诺酮类及氯霉素等药物。
参考文献
1陈秀枢,屠涌涛.微量肉汤稀释法测定MIC的评价.中华医学检验杂志,1993,17:95-98.
2李仲兴,郑家齐,李家宏,主编.诊断细菌学.香港:黄河文化出版社,1992.354-372.
(收稿:1998-04-27修回:1998-07-24)
