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一、材料与方法
1.菌株来源：均为我院1997年3月～8月份分离菌株。其中尿3株、痰1株、脓1株。
2.菌株鉴定，采用API 20E系统。
3.ESBL的确定：采用浓度梯度法中Etest法(AB Biodisk公司产品，购自倍肯科技集团)，严格按说明书操作。头孢噻甲羧肟/头孢噻甲羧肟加棒酸(TZ/TZL)＞4为阳性，≤4为阴性。
4.β-内酰胺酶的测定：采用Nitrocefin法在M-H琼脂平板上蘸取菌苔，放在平皿盖上，在1分钟内出现红色者为阳性，否则为阴性。
5.方法：将标本接种血平板、中国蓝平板，35℃孵箱培养24小时，选择可疑菌落做氧化酶试验，阴性者用API 20E系统鉴定。药敏试验采用纸片扩散法，抗生素购自浙江军区后勤部卫生防疫检验所，按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)标准判定R、I、S，每周做标准菌株的药敏质控，发现含棒酸的药敏纸片与TGC药敏纸片之间有协同作用，再用Etest法测定ESBL。
二、结果
1.在临床标本中，分离出肠杆菌科细菌124株，棒酸与TGC有协同作用的5株，用Etest法测定5株均产生ESBL(TZ/TZL＞4)，经用API 20E系统鉴定，大肠埃希菌2株、阴沟肠杆菌2株、产气肠杆菌1株。
2.在124株肠杆菌科细菌中，β-内酰胺酶阳性的48株，阳性率38.7%，产ESBL的5株全部阳性，且颜色比一般的深，呈紫红色。
3.分离的5株产ESBL药敏结果：对所测定的β-内酰胺类抗生素几乎全部耐药，氨基糖甙类抗生素大部分耐药，喹诺酮类、复方磺胺、利福平全部耐药，但对亚胺硫霉素均敏感，此酶可被棒酸所抑制。
三、讨论
1.从药敏结果可以看出，5株产ESBL细菌交叉耐药现象非常严重，已有研究指出：ESBL是β-内酰胺酶(TEM、SHV类)个别氨基酸的点突变形成的，因此对几乎所有的β-内酰胺类抗生素耐药。现已发现ESBL至少57种，其中TEM族40种、SHV族5种，其他12种［1］。
2.分离的5株产ESBL细菌多重耐药现象也比较严重，对庆大霉素、链霉素、妥布霉素均耐药，仅2株对阿米卡星敏感；对喹诺酮类、复方磺胺、利福平均耐药；四环素类处于中介度或耐药。
3.在实际应用中，每株细菌用Etest法检测ESBL是不现实的，按1997年NCCLS药敏法规介绍［2］，我们把含棒酸药敏纸片与TGC相邻，产生协同作用再用Etest法证实，结果两者完全符合。
参考文献
1陈民钧.临床细菌耐药性现状.中华医学检验杂志，1993，16：371-373.
2潘云华，葛平，徐蓉，等.1997年美国NCCLS药敏试验(纸片法)法规介绍——抗生素的选择与报告.上海医学检验杂志，1997，12：51-52.
(收稿：1997-09-09修回：1998-02-05)
