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我们比较了国产化学纯、分析纯、进口分析纯等三种二甲基亚砜(DMSO)作为噻唑蓝(MTT)比色中甲(formazan)溶解剂的实验结果，以探讨DMSO制剂的纯度对MTT比色分析的影响。
1材料与方法
1.1试剂MTT(Sigma)，用PBS配成浓度5 g/L；国产化学纯DMSO(广州新港化工厂产品)，国产分析纯DMSO(成都化学试剂厂产品)，进口分析纯DMSO(Fluka产品)。
1.2MTT与DMSO制剂的反应在96孔板中，将DMSO原液(150μl/孔)与不同体积MTT混合，37℃温育3 h，于490 nm波长处测各孔吸光度(A)。
1.3MTT比色分析在96孔板中加入小鼠骨髓瘤SP2/0细胞(4×104/孔)，然后加入不同体积MTT，37℃，5%CO2下温育4 h，吸弃上清，同上加入DMSO原液测各孔A值。
2结果
2.1DMSO制剂与MTT的反应化学纯DMSO(无色)与MTT(淡黄色)混合后会出现红褐色，且颜色深浅与MTT量成正相关；分析纯DMSO(国产，进口)与MTT混合后无其它颜色出现，仍为MTT本身颜色，表明化学纯DMSO会与MTT发生副反应，该副反应不是DMSO本身而可能为化学纯DMSO中的杂质与MTT作用所致。
2.2三种DMSO溶解甲所测A值的比较两种分析纯DMSO作为甲溶剂获得的MTT浓度曲线重合性好且较平坦；化学纯DMSO作为溶剂所测A值明显高于分析纯，与MTT量成明显正相关(图1)。增加的A值可能是化学纯DMSO与残存MTT反应所致。
图1SP2/O细胞的MTT比色分析中，三种DMSO作为甲溶剂的MTT吸光度
3小结
DMSO纯度对MTT比色有影响。化学纯DMSO会与MTT发生副反应，该反应不是DMSO本身而可能为化学纯中的杂质所为。在MTT比色中，化学纯DMSO会与孔中残存MTT产生颜色反应，增加本底A值，从而干扰比色结果［1］。因此在MTT比色分析中应采用分析纯DMSO作为甲溶解液。
参考文献
[1]边兴艳，陈洁.MTT比色法中五种甲月替溶解液的比较.临床检验杂志，1998，16(1)：34
(1998-06-19收稿，1998-11-23修回)
