国外医学临床生物锴学与检验学分册1999年第20卷第2期

福建省医学科学研究所（福州 350001）金晓明（综述）

摘要新蝶呤是一种早期、专一的细胞介导免疫激活的敏感标志。临床上，新蝶呤与诸多种类的疾病有着密切的关系。如病毒感染、细菌感染、移植并发症、恶性肿瘤和自身免疫性病症等。本文就新蝶呤的检测在恶性肿瘤疾病中的应用及临床意义作一概述。

关键词：新蝶呤 恶性肿瘤

新蝶呤（Neopterin，Npt）是生物蝶呤合成途径中的一种蝶啶中间代谢产物，生物学上稳定^[1,2]。化学名为[2氨基-4羟基-6-(D赤藓糖基-1',2',3'三羟丙基)]蝶呤，分子式为C₉H₁₁N₅O₄，分子量为253.2。人体液中含有多种蝶呤物质，早先采用高效液相色谱荧光检测法测得健康人尿中含有8种蝶呤物质，它们是黄蝶呤、次黄蝶呤、生物蝶呤、Npt和6-羟甲蝶呤等，其中Npt景要的荧光带，占据了蝶呤类物质总荧光量的20％以上。研究亦表明，健康人与各种疾病患者血表及尿液蝶呤物质水平的差异主要是由Npt所致，因此对Npt的研究引起了人们的重视，并得以迅速发展。近年来将指标用于各类、各系统疾病研究，探讨其临床意义的报道多见，本文择其肿瘤相关部分，就近5年来的文献报道作一简要综述。

1Npt升高机下及检测方法

自1979年人们发现肿瘤等疾病患者体液Npt水平升高以来，曾设计了不同的体外实验以探讨Npt产生的机制：在对体外培养的各种人类肿瘤细胞株组织液进行的检测中未发现有Npt释放，说明Npt并非由肿瘤细胞所分泌；在纯化混合淋巴细胞培养物和浓缩的外周血核细胞检测到了Npt。进一步的研究证实了人单核和巨噬细胞在γ-干扰素的刺激、控制下可产生并释放大量的Npt^[2,3]。因此，有作者认为Npt是γ-干扰素诱导单核和巨噬细胞活性增强的一个特定标志^[4]。反映了体内细胞介导的免疫反应^[5]。Iwagaki等^[6]等认为肿瘤患者体液Npt水平的增加估计可能是对肿瘤敏感的T淋巴细胞激活产生的γ-干扰素刺激并活化巨噬细胞而引起。即它的增高可能是T淋巴细胞经肿瘤细胞刺激后形成的一种应激性反应。因此，Npt显然不是一项典型或单一的肿瘤标志。它的出现也应是一种细胞免疫学反应的指标^[2]。

目前用于体液Npt检测的方法有高效液相色谱荧光法、放射免疫分析法（RIA）和酶联免疫吸附法（ELISA）。Mayersach等^[7]应用这三种方法测定了一组健康供血者血表Npt含量并对结果作比较分析，统计学上有良好的相关性。但从所发表文献看，采有ELISA法测定体液Npt的分析报道很较少，RIA法检测Npt的灵敏虽高，但成本昂贵。高效液相色谱荧法法是使用最早并延用至今的有效方法，它快速，简捷实用，方法学上各指标（回收率、变异系数、检测灵敏等）均可满足临床和科研检测分析的需求，因此是有文献报道中采用的主要方法。

血表Npt水平无性别差异，但不同年龄组间有所差异，Npt水平随年龄增长而有所增加。肿瘤等疾病患者尿Npt排泄的改变与血清Npt水平相关，Fuchs等^[8]对一组免疫性疾病作了比较，证实血、尿Npt水平呈强相关且有类似的诊断敏感性。因此，提出在肾功能正常时，血、尿Npt检测有着等同的诊断应用价值。

2体液Npt检测在恶性肿瘤疾病中的应用

2.1在妇科肿瘤疾病中的应用妇科肿瘤以卵巢癌报道较多，March^[9]等应用高效液相色谱法（HPLC）检测68例卵巢癌患者尿Npt，探讨其在疾病预后评定中的价值。结果，约50％患者Npt浓度超过截止水平（275nmol/mol肌酐）并表现了一个细胞介导免疫激活的体征；与Npt浓度正常者比，她们有一个较短的生存期，应用多变量Cox回归分析Npt可作为预测卵巢癌患者生存期的一个独立参数，同样，在一项应用诸免疫学指标对152例卵巢癌患者进行的研究中也得到同样的结论：尿Npt是疾病的一个独立预后变量^[10]。Haeger等^[11]则应用ELISA法对组织学确诊的良恶性卵巢癌患者多样本作了比较研究，结果恶性的患者血桨、腹水和卵巢囊液Npt浓度均明显高于等肿瘤体积的良性患者。进一步的研究见于Gadducci等^[12]的报道，他应用HPLC法检测了47例术前卵巢癌患者和113例术后良性卵巢癌患者血清Npt水平，以良性疾病组为对照确定了截止值为7.9nmol/L，结果：术前卵巢癌患者，Npt水平明显高于对照组，检测敏感性66.0％；对27例术前卵巢癌者，随访期中位数18个月，其中血清Npt＜7.9nmol/L的8例中有3例（37.5％），＞7.9nmol/L的19例中则有16例（84.2％）发生肿瘤进展，统计学分析表明两者之间有显著差异。另一项对29例术前卵巢癌患者，随期＞3年的研究也表明，血清Npt≥7.9nmol/L(11例)和＜7.9nmol/L（18例）之间的生存率有显著差异F(P＜0.01)^[13]。此外多指标的检测如联合CA125则敏感性或诊断效率可优于单用Npt^[12,13]。据以上作者认为，术前血清Npt检验有助于良恶性肿瘤卵巢癌的鉴别，患者Npt水平升高预示着一个不良预后。检测中若辅以CA125有助于提高疾病的诊断价值。早先的研究表明，宫颈癌患者血清Npt的关系，Strickler等^[14]测定了185例经阴道镜检查确诊的牙买加妇女血清Npt，选择年龄配对的72名健康牙买加妇女作对照，结果未见宫颈癌癌前病变者Npt水平升高。提示该病变的免疫反应未涉及机体实质性的系统免疫反应。也为疾病良恶性的鉴别提供了参考指标。

2.2在血液系统恶性肿瘤疾病中的应用将Npt用于血液恶性病的研究亦有报道。Piccinini等^[15]通过对25例何杰金淋巴瘤和57例何杰金淋巴瘤患者的尿测定后发现，Npt增加与疾病临床分期显著相关；处于疾病活动期患者Npt平均值明显高于疾病完全缓解者；经治疗有效者该指标均可下降并恢复正常。表明尿Npt可作为恶性淋巴瘤监视和预后的判定的有用标志。对35例多发性骨髓瘤患者的研究则表明，疾病确诊时和进展期患者尿Npt平均值（963.7nmol/mol肌肝）明显高于疾病稳定期患者（407.4nmol/mol肌肝）；Ⅲ期与Ⅰ、Ⅱ患者比较Npt排泄明显增加（P＜0.05）；Npr高水平持续者与难治性疾病有关，作者认为Npt是多发性骨髓瘤患者疾病活动性的一个良好标志^[16]。Millot等^[17]就中枢神经系统白血病患儿脑脊液Npt水平的研究作了报道，应用HPLC法测定48例正常儿童和13例小儿急性淋巴细胞白血病和2例小儿高恶性度淋巴瘤的脑膜复发者，所有患者脑脊液Npt水平均高于正常组平均＋25D。对复发前获得的10例患儿脑脊液检测的数据表明：复发者Npt水平显著高于诊断时的水平；有3例患儿Npt升高先于神经学体征的改变和15～30天在脑脊液中检出胚细胞。在无感染情况下，疾病活动期患儿脑脊液Npt升高反映了由恶性细胞诱导的一个细胞介导免疫过程。作者提出，脑脊液Npt的测定对监视和检出早期脑腊复发者是有帮助的。

2.3在消化道等恶性肿瘤疾病中的应用有报道，胃肠道肿瘤患者体液Npt水平也明显增加^[6]并与疾病预后有关，如Weiss等^[8]测定了确诊的44例结肠腺癌患者尿Npt，并辅以其它常规的临床和实验室变量以评价Npt对疾病的相对预测价值和各项指标预测肿瘤死亡的能力，随访期10年。结果：Npt与肿瘤分期或Dukes'分期无关；单变量分析中的4种变量[远端转移(P＝0.0001)、高Dukes'期(P＝0.0009)、高尿Npt(P＝0.0034)和进展期(P＝0.030)]是病症预后不良的有意义指标；多变量生存Npt可提供独立的预测信息，因此尿Npr分析是结肠腺癌患者预后的一项有意义指标。此外，对其它肿瘤如口腔鳞癌、肺癌、脉络膜黑色素瘤和生殖泌尿道肿瘤血清或尿Npt的检测也有个别报道：如对30例口腔鳞癌的检测敏感性可达63％^[19]；对72例肺癌患者随访期10年，单变量生存分析证实Npt是肺癌患者有意义的生存预测因子(P＝0.0013)^[20]；对99例恶性脉络膜黑色素瘤患者的研究表明，疾病的眼睑侵润或转移Npt呈高值。因此，Npt可作为该病随访的一项预后因子^[21]。有关生殖泌尿道肿瘤的报道较为详尽，Asano等^[22]采用HPLC法测定了90例恶性肿瘤、28例良性泌尿科肿瘤和34例健康人尿Npt。结果恶性肿瘤组Npt水平升高，检测敏感性分别为：肾细胞癌68％、肾盂和输尿管癌80％、膀胱癌47％、前列腺癌和睾丸癌30％，良性肿瘤组则为7％；肾细胞癌Ⅰ-Ⅱ期与Ⅲ-Ⅳ期比较、膀胱癌TIS-Ⅰ期与T2-4期比较Npt差异分别有高度显著性（P＜0.0005）；肾细胞和前列腺癌患者尿Npt水平也与肿瘤级别相关。作者得出以下结论：尿Npt可作为生殖泌尿道肿癌患者实验室检查的增补指标，可为肿瘤分期与疾病随访提供有用的信息。

总之，Npt是一项细胞介导免疫激活的敏感标志，其体液水平的改变不仅对病毒、细菌性感染和自身免疫性等疾病是一项有意义的指标，而且可独立发生于人类肿瘤，并在恶性肿瘤疾病的探测、良恶性肿瘤鉴别、疾病分期、复发与转移的监视和疗效观察与预后判定方面均有着较大意义和潜在的应用价值。因此，不失为一项可利用的肿瘤免疫学椟志。

参考文献

1 Iwangki H, Hizuta A.Tanaka N. et al. Immunol Invest.1995;24(3):479-487

2 Fuchs D, weiss G. Wachter H. Int Arch Allergy Immunol.1993;101(1):1-6

3 melichar B. Cas lek Cesk, 1994;133(15):455-458

4 Hobarth K, Szabo N, Hallas A. et al