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Histological Analysis
Geva E.Mannor,MD,MPHMurray Meltzer,MD
（The Departments of Ophthalmology,Mount Sinai Medical Center.）
Robert G.Phelps,MDAlan H.Friedman,MD
（The Pathology, Mount Sinai Medical Center.）
Geva E.Mannor,MD,MPH
（The Surgical Service, Bronx Veterans Administration Hospital, New York, NY.）
目的：阐明二氧化碳(CO2)激光眼睑皮肤再铺平(resurfacing)后机体内的愈合情况。
设计：要求做上眼睑成形术的患者，同意在不同间隔时间切除一部分先前经受过CO2激光皮肤再铺平的上睑皮肤。睑成形术后，其皮肤标本由2位互不了解的病理学家进行组织病理学分析。
患者：8例为FitzpatrickⅠ型和Ⅱ型皮肤的患者。
手术：在计划上眼睑成形术前1、2、4或12周进行上睑CO2激光再铺平。
主要结果测量：表皮：厚度，极性，轮廓和结构。真皮：修复区厚度，血管和炎症类型，胶原沉积，和弹力纤维变化。
结果：7～10天内表皮再生。至3个月时，表皮显示出变平的表皮突伴有极性，角化细胞和黑素细胞的恢复。3个月的真皮显示有纤维修复区(500-700μm)、新的弹力纤维和扩张的毛细血管。
结论：眼睑皮肤的愈合类似于其他部位皮肤经CO2激光再铺平后的愈合情况。这种皮肤的愈合与以前报道的使用化学脱皮术的皮肤愈合类似。组织学的改变可以解释临床所见的皮肤变光滑和皱纹减少。
新的激光技术的出现，已经使得激光皮肤再铺平在非医学的新闻报道和宣传媒介中流行起来。在医学的不同学科有许多科学论文1，2描述了二氧化碳(CO2)激光皮肤再铺平临床的多种方面。大多数组织病理学的研究仅涉及外科手术切除的深度。少数文章描述了人眼睑皮肤激光美容术后的组织学改变。本研究旨在评价眼睑皮肤经CO2激光再铺平术后的早期病理组织学改变。
患者、材料和方法
要求行上睑美容成形术的8例患者(男性和女性各4例)，经检查以排除眼干燥症，暴露性角膜病，眼睑异位，眉下垂和睑痉挛。所有患者都否认既往有单纯性疱疹感染，全身真菌病，免疫损害性疾病，吸烟，面部照射、皮肤病，瘢痕增生及瘢痕疙瘩形成，和使用13-顺维生素A酸［isotretinoin(Accutane;Hoffman-LaRoche,Nutley,NJ)］。患者的皮肤类型是FitzpatrickⅠ型或Ⅱ型。让患者选择在睑成形术之前1、2、4或12周接受眼睑皮肤激光美容性再铺平。向每一位同意各个操作的患者，详述激光再铺平和眼睑成形术的风险和益处。
二氧化碳激光皮肤再铺平按标准方式实施2。在激光治疗之前，让患者用2%氢醌［metahexamide(Melanex; Neutrogena Inc, Los Angeles,Calif)］霜和宽光谱(UV-A和UV-B)阳光防护因子为15的防晒剂预先使用6周。在诊所，患者除眼的局部麻醉外(Ophthaine;Alcon Corp,Dallas,Tex)，还接受将近10ml加入1∶100000肾上腺素的2%盐酸利多卡因局部神经阻滞。
在规范的外科准备和给患者安装防护眼罩后，开始上眼睑的激光再铺平。调整至9W的CO2超脉冲激光(NovaPulse; Luxar Corp)经过校准手持部件释放至眶周的标准范围。每只眼睑实施2次操作。从激光皮肤再铺平当天开始，给予患者口服抗生素(盐酸头孢力新250mg，每日2次)和口服抗病毒药(盐酸无环鸟苷400mg，每日3次)直至新生上皮完全出现。每日观察患者直到新生上皮出现，然后每周观察1次直至他们行睑成形术时为止。
任何1位男性和女性在门诊手术室行激光皮肤再铺平后1、2、4或12周，各自接受了标准的上眼睑成形术。在眼睑成形术时切除上眼睑皮肤，包括先前用CO2激光治疗过的皮肤。被切除的皮肤片，放入10%甲醛缓冲液中，用苏木精-伊红，Luna-Ishak,Verhoeff-Van Gieson (EVG)，和Shikata染色处理，光学显微镜检查。1位皮肤病理学家(R.G.P.)和1位眼病理学家(A.H.F.)，在不了解激光再铺平与睑成形术不同间隔时间的情况下，分析每一张切片。
结果
没有患者感受到激光皮肤再铺平或睑成形术的任何不良的反应。所有患者对他们最终美学效果均感到满意。患者平均年龄63岁(范围，45～84岁)。除1例之外，所有患者属于Fitzpatrick Ⅱ型皮肤。皮肤再铺平后上皮再形成持续时间平均6.9天(范围，4～10天)。观察到的上皮再形成的持续时间或病理组织学变化无性别差异。由于激光皮肤再铺平后1周获得的标本显示表皮没有很好地愈合，这些资料不包括在本文中。表皮的愈合和真皮的愈合分别讨论(表1和表2)，4周结果的讨论没有提供用作说明的组织学标本。
激光再铺平后2周，表皮有明显的改变(图1)。正常表皮突消失和表皮灶性增厚。与毗连的未照射激光的皮肤厚80μm比较，新的表皮平均厚100μm。未注意到有柱状基底角化细胞，与再生上皮相符。有少量黑素细胞，但偶见明显的成簇的黑素细胞。表皮的极性是不正常的。激光再铺平后4周、灶性棘皮症持续存在，但在其他区域，表皮是正常的80μm厚。在基底层，角化细胞再次变为柱状并有明显的黑素细胞。同样，正常的波浪形表皮突结构也再形成。极性呈变异性。激光再铺平后3个月，先前表皮的变化几乎完全正常化，仅有最轻度的棘皮症(图2)。表皮突呈轻度的波浪形，但较健康的、未经治疗的皮肤平坦。注意到有黑素细胞全部补足和极性正常的表皮。
图1CO2激光皮肤再铺平后2周的上眼睑皮肤，显示正常的波浪型表皮突消失和真皮与表皮界面
的极性消失。有少数色素细胞和无柱状基底层的角化细胞(苏木精-伊红，原大×10)
图2眼睑皮肤激光再铺平后3个月，几乎正常的表皮突很明显。出现一些正常成熟的柱状基底角化细胞(大箭头)。在真皮表皮交界处可见到散在的黑素细胞(苏木精-伊红，原大×8)
CO2激光再铺平后2周，显示真皮有很大的变化(图3)。修复范围达到700μm并且界限不清楚。修复区内的成纤维细胞从纤细和梭形改变成了多角形，含有星状胞质和巨大细胞核。也有显著的炎性浸润，其组成主要有少量单核细胞，并偶见异物巨细胞。在这种浸润中，小毛细血管显著。胶原基质水肿，充满葡萄糖胺聚糖(glycosaminoglycans)。弹性纤维染色显示在乳头和网状真皮浅层中的纤维有不同的灶性丢失的改变(图4)。在一些区域，受损的弹性纤维似乎是被浸润物“向下推”。
图3眼睑皮肤二氧化碳激光再铺平后2周，修复区延伸至真皮网状层的浅层(大箭头)，由存在于水肿的和发炎的基质中的疏松排列的梭形细胞组成。并出现散在厚壁的毛细血管(小箭头)(苏木精-伊红，原大×4)
图4眼睑皮肤CO2激光再铺平后2周，弹力纤维几乎完全消失，仅有极少数弹力纤维残留(箭头)［Verhoeff-van Gieson(EVG)原大×5］
激光再铺平后4周，显示真皮浸润的细胞成分明显减少。梭形成纤维细胞出现，但数量常减少。同样，在这些细胞之间有胶原基质增加，基质水肿和葡萄糖胺聚糖沉积较少。修复区的厚度至少为500μm。出现散在的单核细胞，但较前明显减少。偶见毛细血管扩张。在修复区，弹性纤维即使不缺乏，也减少了。激光再铺平后3个月，真皮显示散在的单核细胞浸润和明显的少量纤维变性(图5)。有显著的大内径的毛细血管扩张，没有明显血管生成的扩张的血管。Shikata染色证明，在浅层真皮乳头中有新形成的弹性纤维(图6)。
图5眼睑皮肤CO2激光再铺平后3个月。修复区(大箭头)清晰可见，为有极少量炎性细胞和毛细血管扩张的毛细血管的少细胞的纤维化带(小箭头)，(苏木精-伊红，原大×4)
