【摘要】目的探讨鼻息肉中白介素-8(interleukin-8,IL-8)的表达及作用。方法应用免疫组化和酶联免疫吸附测定法，对22例鼻息肉和10例对照组（鼻中隔偏曲者）下鼻甲组织内IL-8 的分布及含量进行测定。结果IL-8免疫阳性染色物呈棕黄色颗粒，主要位于鼻息肉上皮细胞浆及炎性细胞浆，鼻息肉组织中IL-8的含量较对照组明显增高，鼻息肉组的吸收值范围在322.06～2 091.41 pg/ml之间，对照组的吸收值范围在29.31～332.19 pg/ml之间，2组之间差异有显著性(P＜0.001)。结论IL-8可能是鼻息肉发病机理中诸多因素之一，深入了解这一作用对寻找鼻息肉有效的治疗方法可能有重要意义。

Significance and detection of interleukin-8 in human nasal polyps

LI Xiangping，HUANG Aixin（Department of Otorhinolaryngology, Nanfang Hospital, First Military Medical University, Guangzhou 510515, China）

【Abstract】ObjectiveTo investigate the distribution and content of immunoreaction interleukin-8(IL-8)antigen in the human nasal polyps. Methods Twenty-two cases of nasal polyp and 10 cases of normal inferior turbinate were studied with immunohistochemical SABC method and ELISA method. Results Immunohistochemical results demonstrated that IL-8 antigen staining occurred predominantly within inflammatory and epithelium cell plasm. The level of IL-8 in nasal polyp tissue was higher than in normal control specimens. The value in nasal polyp tissue was in 322.06-2091.41 pg/ml, but in normal with a range of 29.31-332.19 pg/ml. The results demonstrated a remarkable difference between the two groups (P＜0.001).ConclusionThese data demonstrated the presence of IL-8 antigen in nasal polyps. Thus IL-8 likely plays a significant role in the pathogenesis of this disease process. There is an important significance of finding a potential treatment method.

【Key words】Nasal polyps；Interleukin-8； Immunohistochemistry； Enzyme-linked immunosorbent assay

鼻息肉的形成与多种因素有密切关系，其组织病理学显示鼻息肉内有各种炎性细胞浸润。白介素-8（interleukin-8,IL-8）是近年来发现的一种重要的促炎症性细胞因子，在机体免疫应答和炎症过程中起重要作用。本研究观察IL-8在鼻息肉的分布及含量，探讨IL-8在鼻息肉形成中的作用。

材料和方法

一、一般资料

22例鼻息肉取自本院住院患者。年龄13～62岁。其中男16例，女6例。15例既往有鼻息肉手术史。20例伴有不同程度前组或后组鼻窦炎。8例有变应性鼻炎病史。10例对照组标本取自鼻中隔偏曲矫正手术的下鼻甲组织，伴有变应性鼻炎或慢性鼻炎、慢性化脓性鼻窦炎、鼻息肉患者除外。

二、标本的收集与准备

鼻息肉切除后，取部分息肉组织用10%福尔马林固定，制作石蜡病理切片，供免疫组织化学研究。另一部分鼻息肉，放入液氮罐中储藏，直至标本收集完成后，融化收集标本，专人人工研磨成匀浆。PBS (pH7.4)稀释匀浆。离心(30 000 r/min)10 min。取其上清液，置-30℃冰箱保存待测。

三、免疫组化染色

鼠抗人IL-8抗体购自第四军医大学免疫教研室，所有第2抗体购自迈新公司，DAB显色盒购自美国Sigma公司。石蜡切片采用连续切片，每张5 μm，捞片5～6张，取其中2～3张做染色。每例均做常规HE染色，免疫组化采用SABC法。

四、鼻息肉组织中IL-8含量测定

采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）法。检测试剂购自迈新公司，按试剂盒说明书操作。酶标板为96孔聚苯乙烯塑料板。ELISA读数仪450nm处测其吸收值。

五、统计学处理

2组间显著性检验采用t检验

结果

一、IL-8免疫阳性细胞在鼻息肉组织中的分布

22例鼻息肉组织 HE 染色，病理确诊为鼻息肉。其中以嗜酸粒细胞浸润为主的12例，以中性粒细胞浸润为主10例。免疫组化染色显示 IL-8免疫阳性染色物呈棕黄色颗粒，主要在鼻息肉上皮层的细胞浆（图1,2），及炎性细胞胞浆内（图3）。对照组下鼻甲上皮组织，少见免疫阳性物质（图4）。

二、鼻息肉IL-8水平

ELISA法检测鼻息肉组织IL-8水平。22例鼻息肉组织中 IL-8含量为322.06～2 091.41 pg/ml，均值(956.074 4±474.866 5) pg/ml(±s，下同)。10例对照组下鼻甲组织中IL-8含量为29.31～332.19 pg/ml，均值(142.075 0±109.164 6) pg/ml。t检验P＜0.001，2组之间差异有显著性。

讨论

鼻息肉的发病机理未明。目前认为鼻息肉是一种多变模式的慢性炎症，支持这一观点的组织学证据是鼻息肉组织内有大量炎性细胞^［1］。炎性细胞以嗜酸粒细胞浸润为主，同时还有中性粒细胞、淋巴细胞、浆细胞等。深入研究这一慢性炎症过程的促炎介质和形成机理，可能有助于发现新的治疗方法。

IL-8是1988年命名的一种多源性细胞因子，来源较广泛，可来源于单核细胞、组织巨噬细胞、血管内皮细胞、淋巴细胞等。当这些细胞受IL-1、肿瘤坏死因子-α(tumor necrose factorα, TNF-α)、植物血凝素(phytohemagglutinin, PHA)和脂多糖(lipopolys-accharide, LPS)等诱导剂作用下，可直接或间接地产生 IL-8。IL-8具有多效生物学功能，在许多炎症病变和肿瘤中具有聚集和活化白细胞的功能，IL-8对中性粒细胞具有强烈的趋化作用^［2］，亦能刺激中性粒细胞，促使其释放超氧化物，促进脱颗粒，并刺激花生四烯酸代谢产物的生成。Collins等^［3］使用真皮内注射重组人工 IL-8诱导静脉内嗜酸粒细胞聚集到皮肤，其作用呈剂量依赖性，持续时间超过4 h。进一步研究显示，静止期嗜酸粒细胞具有产生、储存和释放IL-8的能力。IL-8对淋巴细胞和嗜碱细胞亦有趋化作用。这些炎性细胞释放基本蛋白质，嗜酸粒细胞阳离子蛋白、嗜酸粒细胞过氧化物酶、白三烯、血小板激活因子等，产生局部炎性损伤。研究还发现在创伤和肿瘤的新生血管形成过程中，IL-8是一个主要的血管生成因子^［4］。在鼻息肉的形成过程中，炎性细胞的聚集和新生血管的形成是其主要特征。因此，IL-8可能是鼻息肉形成的诸因素之一。

为探讨IL-8与鼻息肉的关系，Lee等^［5］应用原位分子杂交技术检测鼻息肉中的细胞因子，结果显示IL-8存在于鼻息肉组织中。1997年Allen等^［6］应用免疫组化和放射免疫技术探测18例鼻息肉中IL-8的水平和分布。结果显示IL-8存在于炎性上皮及炎性细胞浆内,IL-8与炎性细胞水平相关。当IL-8水平最高时，炎性细胞的数量最多。本研究用ELISA法检测22例鼻息肉匀浆组织中IL-8水平均高于对照组。免疫组化结果显示IL-8主要分布于鼻息肉上皮及炎症性细胞浆内。这一结果与Allen等报告相似。这一结果提示，IL-8参与了鼻息肉的发病过程。鼻息肉局部产生的IL-8又可以直接作用于鼻粘膜，加重了鼻粘膜的损伤，促进了鼻息肉的发展。进一步研究IL-8与其它炎性介质在鼻息肉发展过程的作用，将对寻找治疗鼻息肉的有效方法可能有重要意义。

1鼻息肉上皮细胞的细胞浆呈现棕黄色颗粒，强阳性。免疫组化染色×400

图2鼻息肉腺上皮细胞的细胞浆呈现棕黄色颗粒，强阳性。免疫组化染色×400

图3鼻息肉炎性细胞的细胞浆可见棕黄色颗粒，阳性。免疫组化染色×400

图4对照组下鼻甲上皮细胞的细胞浆少见棕黄色颗粒，阴性。免疫组化染色×400

通信作者：李湘平（Email:LP@fimmu.edu.cn）

参考文献

1，Bernstein JM，Gorfien J, Noble B. Role of allergy in nasal polyp osis: a review. Otolaryngol Head Neck Surg,1995,113:724-732.

2，Peveri P, Walz A, Dewald B, et al. A novel neutrophil-activating factor produced by human mononuclear phagocytes. J Exp Med, 1988,167:1547-1559.

3，Collins PD, Weg VB, Faccioli LH,et al.Eosinophil accumulation induced by human IL-8 in the gu