【摘要】目的探讨头颈部恶性肿瘤与血小板聚集性的关系。方法采用电镜方法，以血小板聚集型百分比为指标，检测了37例头颈部恶性肿瘤患者的血小板聚集性，并以非肿瘤患者和良性肿瘤患者各10例作为对照。随访了手术后4～6个月的25例头颈部恶性肿瘤患者的血小板聚集性的改变值。结果 ①头颈部恶性肿瘤患者的血小板聚集型百分比均数显著高于非肿瘤患者和良性肿瘤患者(P值均小于0.05)；②头颈部恶性肿瘤患者血小板聚集型百分比随临床分期进展而显著增高(P＜0.05)；③手术后4～6月的随访患者中，17例无转移和无复发患者的血小板聚集型百分比较手术前显著降低(P＜0.05)；8例有转移或有复发患者的血小板聚集型百分比则较手术前显著增高(P＜0.05)。结论 ①头颈部恶性肿瘤患者的血小板聚集性增加；②电镜方法测定的血小板聚集型百分比在判断头颈部恶性肿瘤的发展、疗效和预后上可能有潜在的价值。

Observation on platelet aggregative ability in patients with malignant tumors of head and neck by electron microscopeZheng Yun, Liang Chuanyu . ENT Department , The First University Hospital of West China University of Medical Sciences , Chengdu 610041

【Abstract】Objective To investigate the relationship between the platelet aggregative ability and malignant tumors of head and neck.Method Platelet aggregative ability was detected by electron microscopy (EM) in 37 patients with malignant tumors of head and neck(Group C), 10 patients with non-neoplastic diseases(GroupA) and 10 patients with benign tumors of head and neck(Group B) as the control group, with the ratio of aggregative type platelets as the index. Twenty-five of 37 patients with malignant tumors except 8 cases of nasopharyngeal carcinoma were included in the follow-up study 4-6 months after operations.Results ①The mean ratio of aggregative type platelets in patients from Group C was significantly higher that that of Group A or Group B patients (P＜0.05);②In Gronp C , the mean ratio of aggegative type platelets inereased significantly with the development of clinical staging(P＜0.05);③In follow-up study, the mean ratio of aggregative type platelets of 17 patients without metastasis and recurrence was significantly lower than that before-operation, while the results of 8 patients with metastasis or recurrence was totally opposite.Conclusions ①The aggregative ability of platelets increased in patients with malignant tumors of head and neck;②The ratio of aggregative type platelets detected by EM has an important potential value in judging the development、therapeutic effects and prognosis of the malignant tumors of head and neck.

【Key words】Head and neck neoplasms Platelet aggregation Prognosis Microscopy, electron

近年来血小板与恶性肿瘤的关系日益受到重视。本实验目的在于通过对头颈部恶性肿瘤患者血小板聚集情况的电镜观察，初步探索血小板聚集性与头颈部恶性肿瘤的关系，以期为抗血小板药物在头颈部恶性肿瘤治疗中的应用提供实验参考，从而为在该领域进行更深入的研究作些前期工作。

材料与方法

一、对象及分组

A组：非肿瘤患者10例，其中慢性中耳炎4例，慢性扁桃体炎、食管异物、鼾症、鼻中隔偏曲、慢性上颌窦炎、Hunt综合症各1例。年龄45岁～68岁，平均51.3岁。均为男性。

B组：为头颈部良性肿瘤患者10例，其中鼻乳头状瘤5例，外耳道乳头状瘤2例，口咽部粘液腺瘤、会厌平滑肌瘤及喉乳头状瘤各1例。年龄42岁～65岁，平均51.5岁。男7例，女3例。

C组：为头颈部恶性肿瘤患者37例，其中鼻咽癌8例，喉鳞癌18例，下咽鳞癌5例，鼻腔鼻窦恶性肿瘤6例。按UICC 1987年头颈部恶性肿瘤TNM分期标准，Ⅰ期和Ⅱ期18例，Ⅲ期及Ⅳ期19例。年龄44岁～68岁，平均54.5岁。男34例，女3例。

D组：为C组中除去8例鼻咽癌（因放射治疗对血小板聚集性有影响）后的29例中随访4～6个月的25例。此组仅经过手术治疗，又分为a、b两组。

a组：手术后无转移和无复发组，共17例。鼻腔鼻窦恶性肿瘤3例，喉鳞癌12例，下咽鳞癌2例。其中，Ⅰ期和Ⅱ期患者13例，Ⅲ期和Ⅳ期患者4例。年龄44～64岁，平均55.4岁。男15例，女2例。

b组：手术后有转移或复发组，共8例。鼻腔鼻窦恶性肿瘤1例，喉鳞癌5例，下咽鳞癌2例。其中，Ⅰ期和Ⅱ期患者1例，Ⅲ期和Ⅳ期患者7例。局部复发2例，颈淋巴结转移5例，远处转移1例。年龄44～6.8岁。均为男性。

二、方法

1.标本的采集、制备：晨起空腹肘静脉取血1 ml，迅速注入含抗凝剂的试管内，并轻轻摇匀。将抗凝血铺于有Formvar膜的铜网载片上，37℃下孵育3分钟。清水冲洗后固定2分钟至5分钟。自然干燥后电镜观察。

2. 电镜观察：每例标本在电镜下（日本日立H-600型透射电子显微镜）连续观察100个不同的血小板，并同时进行分类计数。

3. 观测指标及判定标准： 电镜下血小板分四型：圆型、树枝型、展平型和聚集型^［1］。本实验以聚集型所占百分比为观测指标。除聚集型外，其余三型均称单体血小板。按下列公式计算血小板聚集型所占百分比:

各型血小板的判定标准^［1］：①圆型：形圆或椭圆，体积小，有一个大的电子致密核心，边缘为低电子密度的狭窄透明带(图1)；②树枝型：形态不规则，从中央致密区发出数量不等的细长或分枝状的伪足突起(图2)；③展平型：中央有一小的致密核心，周围有一相当宽的透明带，边缘光滑或有小突起(图3)；④聚集型：由数量不等的血小板聚集在一起形成的大小不等的聚集体，其中的血小板互相接触或彼此融合，周缘部的血小板可见有不同的伪足(图4)。两个或两个以上血小板粘连聚集在一起即称一个聚集型。

4.统计分析：对A、B、C三组间血小板聚集型百分比的比较用横断面研究，采用方差分析。

对D组手术前后血小板聚集性的比较是用自身前后对照研究，采用配对比较的符号秩和检验进行统计分析。

结果

1.A、B、C组患者血小板聚集型百分比均数（±s,%）分别为：A组 20.90±10.43; B组22.90± 8.32; C组37.38±18.71; C组的“Ⅰ期+Ⅱ期”31.39±13.76; C组的“Ⅲ期+Ⅳ期”43.05±21.24。 由此可见：A、B两组间血小板聚集型百分比均数差异无显著性(P＞0.05)。C组血小板聚集型百分比均数显著大于A组、B组（P值均小于0.05）。C组中Ⅰ期和Ⅱ期患者血小板聚集型百分比均数与A组、B组比较,结果差异无显著性（P值均大于0.05）,C组中Ⅲ期和Ⅳ期患者血小板聚集型百分比均数则显著大于A、B两组(P值均小于0.05）。

2.D组（随访组）中的a组术前与术后4～6个月的血小板聚集型百分比分别为（30.59±10.55）%和（25.82±6.26）%，二者之间差异有显著性（P＜0.05）；b组术前与术后4～6个月的血小板聚集型百分比分别为（56.00±13.94）%和（65.25±9.05）%，二者间差异亦有显著性（P＜0.05）。

讨论

大多数头颈部恶性肿瘤的原发灶经手术、放射治疗、化学治疗后多可得以控制，但肿瘤的转移和复发却常使治疗失败。研究血小板聚集性与头颈部恶性肿瘤的关系可以初步了解血小板在头颈部恶性肿瘤发展过程中所起作用，以寻找一种能有效地辅助治疗头颈部恶性肿瘤的方法,提高治疗效果。

测定血小板聚集性的方法中常见的是通过测定富含血小板血浆经搅动或加入聚集剂后的光密度变化来测定血小板聚集性。本实验是以Formvar膜为人工粗糙面使血小板粘附聚集，然后在电镜下测定Formvar膜上的血小板聚集型比例。此方法的优点在于不仅能通过对Formvar膜上的血小板分类计数计算出聚集型的比例，而且能直接看到血小板聚集型的大小。此外，本法所需血量不多(仅1ml），操作简易，所需试剂容易获得，是测定血小板聚集性的一种较为理想的方法。

本实验观察到电镜下血小板有四种形态：圆型、树枝型、展平型和聚集型，与文献报道一致^［1］。不同类型的血小板代表不同的功能状态：圆型与树枝型血小板表面活性小，聚集性低；展平型表面活性较大，提示血小板有聚集趋势；聚集型血小板是不同类型血小板相互接触或融合形成的血小板聚合物，可直接反映血小板聚集性。正常情况下，电镜下各型血小板有一定比例。据文献报道，聚集型血小板在25%以下为正常范围，26%～30%为可疑增高范围，30%以上应考虑为病理值。血小板聚集型的增加提示血小板聚集性增加及血小板的<