关键词： 糖尿病肾病；红细胞钠-锂逆向转运

【摘要】目的探讨红细胞钠-锂逆向转运(SLC)活性在糖尿病肾病(DN)发病中的作用及其对DN的预测价值。方法采用Zerbini最新提出的600mmol/L法，测定正常对照24例、原发性高血压26例及2型糖尿病85例SLC活性。糖尿病组按尿白蛋白/肌酐比值分为正常、微量和大量白蛋白尿组。结果原发性高血压组(P＜0.001)和糖尿病组(P＜0.001)SLC活性明显高于正常对照组，微量白蛋白尿组(P＜0.01)和大量白蛋白尿组(P＜0.005)SLC活性明显高于正常白蛋白尿组。多元线性逐步回归分析显示SLC活性、病程、平均血压、甘油三酯为尿白蛋白/肌酐比值升高的独立危险因素。结论SLC活性增高是糖尿病肾病发生的主要危险因素之一，可作为糖尿病肾病的易感指标，有一定的预测价值，但缺乏特异性和敏感性。

Erythrocyte sodium-lithium countertransport and diabetic nephropathy

YANG Tao,CHEN Jiawei,ZHAO Rencheng,et al.

Department of Endocrinology,the First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University,Nanjing,210029

【Abstract】ObjectiveTo explore the effect of erythrocyte sodium-lithium countertransport (SLC) activity in the susceptibility of diabetic nephropathy.MethodsErythrocyte sodium-lithium countertransport activities in 24 healthy volunteers, 26 patients with essential hypertension and 85 patients with type 2 diabetes mellitus were measured with new 600mmol/L procedure advanced by Zerbini. The diabetic patients were divided by urinary albumin creatinine ratio (ACR) into normoalbuminuria group (ACR＜2.5mg/mmol), microalbuminuria group (ACR between 2.5～25mg/mmol) and macroalbuminuria group (ACR＞25mg/mmol).ResultsSodium-lithium countertransport activities were elevated in essential hypertension group (0.4467±0.1994mmol^.L_RBC^-1.hr^-1，P＜0.001) and diabetes group (0.4159±0.1624mmol^.L_RBC^-1.hr^-1，P＜0.001) as compared with normal control group (0.2885±0.0987mmol^.L_RBC^-1.hr^-1). Activities were also higher in microalbuminuria group (0.4589±0.1517mmol^.L_RBC^-1.hr^-1，P＜0.01) and macro-albuminuria group (0.4858±0.1319mmol^.L_RBC^-1.hr^-1，P＜0.005) than in normoalbuminuria group(0.3479±0.1617mmol^.L_RBC^-1.hr^-1). Multiple stepwise regression analyses showed that SLC, duration of diabetes, mean blood pressure and triglyceride were the independent risk factors of elevated urinary albumin creatinine ratio.ConclusionElevated sodium-lithium countertransport activity is one of the risk factors of diabetic nephropathy. Thus, SLC activity can serve as a marker for susceptibility of diabetic nephropathy. It has some prediction value, but lacks specificity and sensibility.

【Key words】Diabetic nephropathyErythrocyte sodium-lithium countertransport

糖尿病肾病(DN)是糖尿病(DM)最为严重的慢性并发症之一。但DN起病隐匿，早期诊断困难。微量白蛋白尿(MAU)的应用使DN的诊断提早到Ⅲ期(AER在20～200μg/min之间)，但更早诊断DN尚缺乏公认的敏感指标。近年有许多备选指标在研究中，其中红细胞钠-锂逆向转运(SLC)活性为原发性高血压的遗传易感指标^〔1〕，由于有高血压或高血压家族史的糖尿病患者更易发生DN^〔2〕，故推测SLC为DN的遗传易感指标^〔3，4〕。本研究采用Zerbini^〔5〕最新提出的600mmol/L高渗法测定SLC活性，旨在探讨SLC活性在糖尿病肾脏并发症遗传易感因素中的作用，衡量其在DN早期预测中的价值。

对象和方法

一、对象

1.糖尿病组：根据1985年WHO诊断标准，选择糖尿病患者85例，男41例，女44例，年龄(58.1±9.6)岁。根据尿白蛋白肌酐比值(ACR)，将糖尿病患者分为三个亚组，即正常白蛋白尿组(尿ACR＜2.5mg/mmol)，微量白蛋白尿组(尿ACR在2.5～25mg/mmol之间)，大量白蛋白尿组(尿ACR＞25mg/mmol)。排除尿路感染。

2.原发性高血压组：根据1978年WHO诊断标准，选择原发性高血压患者26例，男14例，女12例，年龄(58.8±8.1)岁，除外糖尿病、肾小球肾炎和继发性高血压。

3.健康对照组：共24例，男13例，女11例，年龄(59.4±10.6)岁，为排除糖尿病、高血压、高脂血症及糖尿病和(或)高血压阳性家族史的健康志愿者。

二、方法

1.患者空腹8小时以上采静脉血，送检空腹血糖(FPG)、肌酐(Cr)、甘油三酯(TG)、胆固醇(Ch)、糖化血红蛋白(HbA₁c)及SLC活性。测24小时尿白蛋白、肌酐。采血当日测静息坐位血压2次，取平均值；测量身高、体重；询问高血压、糖尿病家族史。血糖用葡萄糖氧化酶法，尿白蛋白用放射免疫法，血HbA₁c用亲和柱层析法，尿肌酐用苦味酸法，血肌酐、甘油三酯、胆固醇用自动生化分析仪。平均血压(MBP)为三分之一脉压差与舒张压之和。胰岛素敏感指数(SI)采用空腹血糖和空腹胰岛素乘积的倒数简便计算。

2.红细胞钠-锂逆向转运活性测定：在Canessa法基础上，采用Zerbini 95年改良的600mmol/L高渗法。锂浓度测定采用日本岛津AA-6501F原子吸收分光光度仪发射光谱法。SLC为饱和后红细胞中的锂在钠环境液和胆碱环境液中流出量的差值。计算公式如下：

Li_e=(Li₆₀-Li₀)×〔7+(1-Hto)×0.7〕/(1000×Hto×0.7)

SLC=Li_e钠-Li_e胆碱

Hto为锂外流测定前红细胞悬液比容；Li₆₀和Li₀分别为60分钟和0分钟的锂外流量，单位为mmol/L；Li_e为每小时锂的流出量，单位为mmol·L_RBC^-1.hr^-1。

三、统计学方法

正态性和方差齐性检验，不符合正态分布的取自然对数，两组间差异性比较，用t检验或t’检验，多组间差异性比较用方差分析。危险因素的估计用多元线性回归分析中逐步回归法，SPSS统计软件包处理。有关参数以±s表示。

结果

一、正常对照组、高血压组、糖尿病组SLC活性比较

三组共计135例，性别、年龄、体重指数(BMI)无显著差异。SLC活性(单位mmol·L_RBC^-1.hr^-1)分别为：正常对照组0.2885±0.0987，高血压组0.4467±0.1994，糖尿病组0.4159±0.1624，高血压组和糖尿病组SLC活性显著高于正常对照组(P＜0.001)，但有部分重叠。

二、糖尿病组SLC活性分析

1.糖尿病患者85例。正常白蛋白尿组、微量白蛋白尿组和大量白蛋白尿组，三组患者性别、年龄、BMI无显著差异，微量白蛋白尿组SLC活性为(0.4589±0.1517)mmol·L_RBC^-1.hr^-1，大量白蛋白尿组SLC活性(0.4858±0.1319)mmol·L_RBC^-1.hr^-1，明显高于正常白蛋白尿组〔(0.3479±0.1617)mmol·L_RBC^-1.hr^-1〕(分别P＜0.01和P＜0.005)，但有部分重叠，三组平均血压(MBP)依次增高，肌酐清除率(Ccr)依次下降，均有显著性差异；三组血甘油三酯(TG)、胆固醇(Ch)、糖化血红蛋白(HbA₁c)、高血压和(或)糖尿病家族史阳性率无显著性差异(见表1)。

2.根据正常对照组SLC活性平均值确定SLC的正常范围〔±1.96s，即(0.2885±0.1935)mmol·L_RBC^-1.hr^-1〕，以0.4820mmol·L_RBC^-1.hr^-1为正常上限将糖尿病组患者分为正常SLC组〔(0.3041±0.1140)mmol·L_RBC^-1.hr^-1〕、高SLC组〔(0.5688±0.0646)mmol·L_RBC^-1.hr^-1〕。两组ACR〔(15.00±28.26对30.75±46.25)mg/mmol,P＜0.005〕、MBP〔(103±16对110±14)mmHg(1mmHg=0.133kPa),P＜0.05〕、Ch〔(5.05±1.23对6.10±1.67)mmol/L,P＜0.001〕、TG〔(1.65±0.93对1.88±0.78)mmol/L,P＜0.05〕有显著差异，年龄、性别、BMI、病程、家族史、HbA₁c、Ccr差异不显著。

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