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银杏叶提取物心停跳液对心肌保护效果

2022-07-29
来源:求医网
近年发现,银杏叶提取物(Extract Ginkgo biloba,EGb)具有扩张心脑血管,清除氧自由基,特异性拮抗血小板活化因子(PAF),抑制血小板聚集等药理作用[1,2],并在离体动物心脏的研究中证实EGb具有良好的心肌保护效果[1]。据此,我们观察了EGb心停跳液对体外循环(CPB)犬心肌的保护效果。

材料和方法

一、方法与步骤取健康杂种犬10只,体重(16.0±1.6)kg,雌雄兼有。按我院方法建立麻醉及CPB[3]。以复方林格氏液预充,灌注量80mlkg-1min-1,维持MAP在(5.8~8.0)kPa(1kPa=7.5mmHg)。

二、实验分组随机分为两组,每组5只。对照组:采用低温[(26~28)℃]CPB,5分后阻断升主动脉,在主动脉根部灌注4℃St Thomas停跳液(K=16mmolL-1)10mlkg-1,隔30分复灌一次(28℃,1/2首量,K=10mmolL-1),循环阻断60分。银杏组:在St Thomas停跳液中加EGb(银杏黄酮8.1mgml-1、银杏总内酯1.7mgml-1)2.5mlkg-1,余同对照组。开放升主动脉后,出现室颤者用交流电除颤,心脏复跳后观察循环维持情况30分。全过程不用任何升压药。

三、取材及标本测定主动脉阻断前、阻断30、60及开放20分时于左心室取4块2mm×2mm全层心肌,备测定心肌组织脂质过氧化物丙二醛(MDA,硫代巴比妥酸法)含量、腺苷酸含量(高效液相色普法[4],并计算总腺苷量TAN及能荷EC)、水含量及超微结构检查(并对线粒体及糖原进行分级[5])。于阻断前、开放15、30分时通过Swan-Ganz漂浮导管测定心输出量(CO,热稀释法)及其他血液动力学指标。并观察复跳后心肌收缩力恢复情况。

实验数据用±s表示,统计比较用t检验,P<0.05为有显著性差异。

结果

一、停搏及复跳情况主动脉根部灌注停搏液后,两组心脏均在1分内完全停跳。血温维持在(26~28)℃。开放升主动脉后,银杏组3例自动复跳,2例除颤复跳,心搏有力;对照组均除颤复跳,心搏较弱,其中1例心脏再次停跳,除颤无效。

二、心肌组织MDA含量变化升主动脉阻断前、中、后,银杏组MDA无明显变化;对照组阻断60分时MDA显著升高(P<0.05)(较阻断前升高38.1%),开放升主动脉20分后进一步上升(P<0.01)(较阻断前升高46.8%)。两组同期比较差异显著(P<0.05或P<0.01).

三、心肌腺苷酸含量缺血60分时,银杏组ATP、TAN、EC仍保持在较高水平(分别为缺血前的81.6%、83.2%、100%),再灌注20分时达术前水平;而对照组ATP、TAN、EC在缺血60分时分别降至缺血前的43.8%、60.5%、85%,再灌注期间进一步下降。两组同期比较差异显著(P<0.05或P<0.01)。TAN=ATP+ADP+AMP,EC=(ATP+0.5ADP)/TAN,ATP为三磷酸腺苷,ADP为二磷酸腺苷,AMP为一磷酸腺苷。

四、心肌组织水含量变化银杏组各期无明显变化;对照组阻断60分、开放20分时,心肌水含量明显高于阻断前(P<0.05)及银杏组同期(P<0.05)。

五、心肌超微结构缺血期间,对照组正常线粒体、糖原含量明显减少(P<0.01)(缺血60分时分别为缺血前的65.9%、51.1%),开放循环20分后仍处于较低水平,而银杏组在缺血期及恢复循环后,心肌正常线粒体含量均接近缺血前水平,肌原纤维排列整齐、紧密,糖原丰富。两组同期比较差异非常显著(P<0.01)。

六、血液动力学变化缺血60分开放循环后,对照组MAP、每搏量(SV)、心输出量(CO)、心脏指数(CI)、左室搏出功(LVSW)、左室搏出指数(LVSWI)均明显降低(P<0.01),CVP升高(P<0.05);银杏组在开放循环30分时,各指标已接近或达到术前水平,与对照组比较差异十分显著(P<0.01)。

讨论

本实验结果表明,在常用的高钾、低温保护措施下,银杏叶提取物心停跳液间断灌注对缺血心肌具有保护效果:(1)明显减少缺血再灌注期间过氧化脂质的生成。除与其天然抗氧化特性[1]有关外,可能还与经EGb灌注的心肌由于ATP保存良好,次黄嘌呤、黄嘌呤的生成减少有关;(2)降低缺血心肌ATP的消耗,增加能荷EC,维持较强的细胞活力。银杏组至缺血60分时,ATP含量仍达缺血前81.6%(对照组仅为43.8%)。可能与较好的保持缺氧心肌ATP酶活性[6]、氧自由基生成减少,ATP消耗降低[7]有关;(3)心肌超微结构完好,正常线粒体及糖原含量接近缺血前水平;(4)血液动力学的迅速恢复。银杏组在开放循环后各项血液动力学指标在30分内恢复到缺血前水平。心肌超微结构(如线粒体)的良好保护,使能量生成迅速,促进心肌细胞收缩功能迅速恢复。

参考文献

1Haramaki N,Aggarwal S,Kawabat T,et al.Effects of natural antioxidant Ginkgo biloba extract(EGb)on myocardial ischemia-reperfusion injury.Free Radic Biol Med,1994,16:789-794.

2Koeltringer P,Langster W,Eber O.Dose-dependent hemorrheology effects and microcirculatory modifications following intravenous administration of Ginkgo biloba special extract EGb761.Clin Hemorheol,1995,15:649-656.

3喻田,余志豪,刘兴奎,等.缺血预处理对体外循环缺血心肌的保护效果.中华麻醉学杂志,1997,17:720-724.

4Wynants J,Belle HV.Single-run performance liquid chromatography of nucleotides,nucleosides and major purine bases and its application to different tissue extracts.Anal Biochem,1985,144:258-266.

5余志豪,丛连凯,李维才,等.用大量胰岛素提高心肌保护效果的研究.中华麻醉学杂志,1987,7:5-10.

6Punkt K,Welt K,Schaffranietz L.Chang-es of enzyme activities in the rat myocardium caused experimential hypoxia with and without Ginkgo biloba extract EGb761 pretreatment.A cytophotometrical study.Acta Histochem,1995,97:67-69.

7Koltai M,Tosaki A,Hosford D,et al.Ginkgolide B protects isolated hearts against arrhythmias induced by ischemia but not reperfusion.Eur J Pharmacol,1989,164:293-302.

收稿日期:1998-09-03;修回日期:1998-11-2