东菱克栓酶具有增强纤溶系统活性，减少血栓基质形成，降低血液粘滞性的作用，因而，临床上广泛用于动脉硬化引起的缺血性疾病。本研究的主要目的是探讨东菱克栓酶预处理对缺血再灌注大鼠心肌收缩功能及心肌超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的影响。

材料与方法

成年雄性SD大鼠30只，体重(300～350)g，随机分为空白对照组、缺血组、东菱克栓酶组，根据K-H液中东菱克栓酶的浓度又将东菱克栓酶组分为东菱克栓酶低浓度(5U^．L^－1)组(组1)、中浓度(10U^．L^－1)组(组2)及高浓度(20U^．L^－1)组(组3)等3个亚组。以戊巴比妥钠30mg^．kg^－1腹腔注射麻醉，同时腹腔注射肝素15mg^．kg^－1，翻正反射消失后，快速开胸取心并置于Langendroff模型，升主动脉插管供恒压灌注，灌注压为10kPa，经左房将自制的测压管插入左心室，连接Maclab监测仪，调节LVPmin在0.8～0.93kPa，并通过Macintosh微机持续监测左室舒张期压力(LVPmin)、左室最大压力(LVPmax)、LVPmax-min、压力升高速率(＋dp/dt)、压力降低速率(-dp/dt)及心率。空白对照组用95%O₂和5%CO₂混合气体饱和的K-H液持续灌注90分；缺血组用上述K-H液经升主动脉灌注平衡35分，全心缺血25分，复灌30分；东菱克栓酶三个亚组用单纯的K-H液灌注20分后再分别用含有东菱克栓酶5U^．L^－1、10U^．L^－1、20U^．L^－1的K-H液灌注15分，全心缺血25分后复灌30分。分别于平衡末、复灌后1、3、5、10、15、20、30分记录LVPmin、LVPmax、LVPmax-min、＋dp/dt、－dp/dt及心率，并在相应的时间点留取心肌灌流液，灌注结束时取心肌标本，液氮冷冻，－70℃保存，以比色法测定SOD、MDA。在实验过程中维持心肌周围环境及K-H液温度在37℃，K-H液的PCO₂和pH值在正常范围。

各数据以均数±标准差表示(±s)，5组间对应时间点的LVPmin、LVPmax-min、＋dp/dt、－dp/dt、SOD及MDA值采用方差分析，5组内复灌后的各时间点与平衡末之间的比较用配对t检验处理，P＜0.05为有统计学差别。

结果

5组间平衡末时LVPmax-min值无明显差别(P＞0.05)，复灌后的各时间点的LVPmax-min值，组1与缺血组之间无明显差别(P＞0.05)，组2和组3的LVPmax-min的值明显大于缺血组对应时间点(P＜0.05)。

东菱克栓酶组LVPmin在平衡末时及复灌后的各个时间点的值均显著低于缺血组，但高于空白对照组(P＜0.05)；

与空白对照组各对应时间点及5组平衡末相比，缺血组及东菱克栓酶组复灌后的－dp/dt值均明显升高(P＜0.05)，而缺血及东菱克栓酶组之间各对应时间点无差别(P＞0.05)。复灌后的缺血组及东菱克栓酶组的＋dp/dt值与各组平衡末及空白对照组相比均明显降低(P＜0.05)。

平衡末时5组之间及复灌后，缺血组及东菱克栓酶组间各对应时间点之间SOD值无明显差别(P＞0.05)，但缺血组及5U^．L^－1、10U^．L^－1组各时间点的SOD值均明显高于平衡末(P＜0.05)，20U^．L^－1东菱克栓酶组各时间点与平衡末的SOD值无差别(P＞0.05)。灌注后东菱克栓酶各亚组心肌组织的MDA含量(nmol^．L^－1．min^－1）(组1：166.83±25.61；组2：132.33±24.87；组3：125.50±21.90)显著低于缺血组(231±94.02，P＜0.05)，与空白对照组(129.33±28.14，P＞0.05)无明显差别。

讨论

东菱克栓酶是一种丝氨酸蛋白酶，具有增强纤溶系统活性，减少血栓形成并能溶解血栓，改善血液流变学的特点，因而广泛应用于缺血性疾病的治疗。在本研究中，东菱克栓酶预处理能明显降低缺血再灌注后左室舒张期的心室压力(LVPmin)，说明东菱克栓酶能增加心室的顺应性，改善心室的舒张功能。其机制可能为：(1)扩张血管，增加血流速度，改善心肌的氧供，从而增加心肌缺血前的能量贮备，增加对缺氧的耐受力^［1，2］；(2)清除氧自由基及减轻脂质过氧化的程度，减轻缺血再灌注损伤，维持心肌细胞的结构和功能的完整性^［6］。

超氧化物岐化酶(SOD)是一种重要的抗氧化酶。有研究认为，心肌缺血再灌注后，心肌中的SOD活性降低^［3］。但WilmoreWG^［4］研究发现，缺血可以使心肌中的SOD活性增加2倍。ChandrasekarB等^［5］的研究发现缺血再灌注可以促使抗氧化有关的酶基因(如SOD基因)快速表达，从而可以减轻缺血再灌注损伤的程度。在本研究结果中，SOD的变化与上述研究结果相似。同时提示东菱克栓酶对缺血再灌注后大鼠心肌的SOD活性无影响。因而东菱克栓酶预处理明显降低再灌注后心肌组织MDA含量，可能还有其它机制参与，对此还有待研究。

参考文献

1Izumi Y，Tsuda Y，Ichihara S，et al.Effec-ts of defibrination on hemorheology，cerebral blood flow velocity and CO₂-reactivity during hypocapnia in normal subjects.Stroke 1996，27：1328-1332.

2Glusa E，Brauns H，Stocker K.Endotheli-um dependent relaxant effect of thrombocytin，a serine proteinase from Bothrops atrox anake venom，on isolated pig coronary arteries.Toxicon，1991，29：725-732.

3陶军.丹参酮防治心肌再灌注损伤的实验研究.中华麻醉学杂志，1996，16：202-204.

4Willmore WG.Antioxidant systems and anoxia tolerance in a freshwater turtle trachemys scripta elegans.Mol Cell Biochem，1997，170：177-185.

5Chandrasekar B.Induction of proinflammatory cytokine and antioxidant enzyme gene expression following brief myocardial ischemia.Clin Exp Immunol，1997，108：346-351.

6Kuang PG，Tao Y，Tian YP.Protective effect of batroxobin on reperfusion injury in rat brain.Chin New Drugs J，1995，4：47.

收稿日期：1998-10-27；修回日期：1999-01-10