公认的阿片受体拮抗剂纳洛酮对阿片类药物具有肯定的逆转效应。为实验其对非阿片类麻醉药的药理作用如何影响及相互作用机制，我们采用膜片钳技术的吸附式构型和内面向外式构型在单通道水平研究了纳洛酮与依托咪酯和Kca通道的作用。

材料与方法

无菌条件下取新生1～3天SD大鼠皮质进行神经元体外原代培养^〔1〕。膜片钳实验选用对称性高钾溶液，选择培养4～8天具典型形态的活神经元进行实验。加药前先记录下-60mV～+60mV间以10mV间隔的各钳制电位下的单通道电流作为对照，然后加实验药物，2分钟后再在各对应电压下采样。资料用Pclamp(6.0.2)程序软件 (Axon Instruments Burliagme CA)分析，显著性检验采用配对t检验和方差分析。

结果

我们在五个膜片上进行了该实验。在三个吸附式构型膜片上的各12个钳制电压下，当20μmol*L^－1依托咪酯激活Kca通道后，加入1μmol*L^－1纳洛酮，则通道开放明显减少(P＜0.01)，加大纳洛酮浓度使至2μmol*L^－1，通道开放活动继续减弱，开放概率较20μmol依托咪酯组极显著减小(P＜0.01)，较1μmol纳洛酮组亦极显著减小(P＜0.01)。两组纳洛酮对通道电流幅值无明显影响(P＞0.05)，对平均开放时间和平均关闭时间无显著影响(P＞0.05)。二个内面向外式构型膜片上的实验结果和吸附式构型时相似。

讨论

近年发现纳洛酮具有多种中枢药理作用，包括逆转神经元损伤^〔2〕，抑制黄嘌呤氧化酶的活性，增加脂质过氧化物酶的活性^〔3〕，抑制白细胞介素-2和白细胞介素-6的活性^〔4，5〕等。Schroeder jE等^〔6〕认为阿片类药物及纳洛酮的作用涉及钾电流和钙电流。我们采用膜片钳单通道记录技术实验了依托咪酯对体外培养鼠皮质神经元Kca通道的作用及纳洛酮对这种作用的影响，结果依托咪酯明显激活Kca通道，而纳洛酮则明显逆转依托咪酯的这种激活效应，这表明纳洛酮能逆转依托咪酯的药理作用，同时显示纳洛酮影响Kca通道。

依托咪酯激活Kca通道后，纳洛酮抑制Kca通道的开放，使通道开放概率明显减少，主要是减少开放频率，而对平均开放时间和平均关闭时间无明显影响。当纳洛酮浓度由1μmol*L^－1增至2μmol*L^－1时，其对依托咪酯激活Kca通道的逆转效应进一步加强，表明纳洛酮对依托咪酯激活Kca通道的逆转效应具有浓度依赖性。

在内面向外式构型时，纳洛酮对Kca通道仍有明显的抑制作用，提示纳洛酮直接作用于Kca通道蛋白或其周围膜；“阿片受体”可能是通道蛋白的一部分。进一步工作待继续。

参考文献

1席新正，叶江鸿，陈助华，等.大脑皮质神经元钾通道的特性.中国科学(B辑)，1992，10：1063-1070.

2 林凌，顾海明，张维宁，等.吗啡增强谷氨酸单钠神经毒性及其作用机制.药学学报，1995，30：806-811.

3 KorotkinaRN，FomchenkovEP，AndreevVI，et al．Molecularmechanisms ofantioxidant actionof dalarginon the liverin experimentalcholestasis．BullEsp BiolMed，1992，113：38-40.

4 Karanth S，LysonK，AguilaMC，et al．Effectsof luteinizing-hormonereleasing hormone，alpha-melanocyte-stimulationghormone，naloxone，dexamethasoneand indomethacinon interleukin-2-inducedcorticotropin releasingfactor release．Neuroimmunomodulation，1995，2：166-173.

5 Xin L，BlatteisCM．Hypothalamicneuronal responsesto interleukin-6in tissueslices：effectsof indomethacinand naloxone．BrainRes Bull，1992，29：27-35.

6 Schroeder JE，FischbachPS，ZhengD，et al．Activationof mu opioidreceptors inhibitstransient high-andlow-threshold Ca^2＋currents，butspares asustained current．Neuron，1991，6：13-20.

(收稿：1997-09-09 修回：1998-03-02)