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材料与方法将妊娠18～20天的大白鼠用乙醚处死。在细胞培养工作台下剖腹取出胚胎，显微镜下分离出海马组织，制成细胞悬浊液。将细胞悬浊液加入35mm的细胞培养皿中，用无血清N2-MEM培养于37℃5%CO2培养箱中。
用不同量的7.5%NaCl溶液与新鲜N２-MEM混合，使混合液中的NaCl浓度分别为0.05%、0.1%和0.25%。培养10～12天的海马神经细胞用于实验。分别于细胞暴露于混合液前及暴露于混合液后15分钟、60分钟、1天和7天，测试细胞的容积。
细胞容积采用细胞内水分含量的测定方法。选择［14C］标记的3-0-甲基-D-葡萄糖作为细胞内标记物。在液体闪烁计数仪上测其放射活性。用Pierce法测量其蛋白质含量。细胞容积用μl/100μg蛋白质表示。
所得结果以与对照组细胞容积(作为100)相比所得的平均相对细胞容积±标准差表示。实验组和对照组细胞容积的比较采用非参数统计方法的两组数据秩和检验法(Mann-Whithey法)。P＜0.05表示在统计学上有显著差异。
结果细胞置于0.05%、0.1%和0.25%NaCl混合液后15分钟，其细胞容积与同一实验时间的对照值相比无显著性差异(P＞0.05)。60分钟后细胞分别比各自同一时间的对照组细胞容积增加27.9%、124.9%和141.3%(P＜0.05)。1天后至第7天，各组细胞容积基本恢复至对照组细胞容积水平(P＞0.05)。
讨论细胞具有在非等渗环境中调节自身容积的能力，即“调节性容积增加”(RegulatoryVolumeIncrease，RVI)，或“调节性容积减少”(RegulatoryVolumeDecrease，RVD)。在我们的实验中，暴露于不同浓度高渗溶液中的海马神经细胞容积在15分钟后比对照组细胞容积稍有减少，与初始容积比较无统计学差异。说明海马神经细胞在置于0.05%、0.10%及0.25%NaCl混合液15分钟后，其容积能够基本上恢复到初始细胞容积水平。当细胞15分钟后从高渗液中取出，重新置于等渗培养基后60分钟时，细胞容积分别明显增加27.9%～141.3%。而1天后细胞容积重新减少，基本上恢复至增加前的水平。说明暴露于不同浓度高渗盐水混合液的海马神经细胞1～7天后保持与其初始细胞容积无明显的变化。
我们认为，如同其它细胞一样，海马神经细胞在暴露于高渗溶液后具有细胞容积调节功能。尽管当细胞重新置入等渗培养基后肿胀，但1天后直到第7天，细胞容积能够重新恢复至原来的水平。
(收稿：1997-04-28修回：1997-12-04)
